实验6-小篮子法测定种子呼吸速率

1、实验六 环境温度对种子呼吸速率的影响（p165166）小篮子法测定种子呼吸速率呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一。测定呼吸速率的方法很多，可以分成两大类：测定吸氧速率或者测定放出CO2速率。前者有测压法、氧电极法；后者有小篮子法、红外线CO2气体分析仪（IRGA）等方法。测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对O2的吸收，样品用量少，且精确度高。利用红外线CO2气体分析仪测定植物呼吸速率比较快速、准确，是科研上常采用的方法。呼吸速率的测定方法1. 实验目的1）学习呼吸强度的碱吸收测定方法；2）了解环境因素（如温度）对呼吸强度的影响。 2. 实验原理（小篮子法）植物进行呼吸时放出CO2，计算一定

2、的植物样品在单位时间内放出CO2的数量，即为该样品呼吸速率。呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收，实验结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2的量。 Ba(OH)2 +CO2 BaCO3+ H2OBa(OH)2（剩余）+ H2C2O4BaC2O4+ 2H2O每毫升144 mol/l 的草酸相当于1mg CO2 3. 材料和仪器设备1）材料： 发芽的小麦种子和煮死的小麦种子2）仪器设备： 呼吸测定装置（小篮子）； 电子天平； 酸式及碱式滴定管。3）试剂：饱和Ba(OH)2溶液144mol/l 草酸溶液酚酞指示剂 4. 实验步骤1）

3、取500ml 广口瓶4个，标记为0、1、2、3号，瓶口用橡皮塞塞紧，瓶塞下面挂一铁丝小篮，以便装植物样品，整个装置即谓“广口瓶呼吸测定装置”。Ba(OH)2溶液2）称取20g死种子，放入其中的一个小篮子中；再称取3份活种子，每份20g，分别放入另外3个小篮子中；3）分别在4个广口瓶中准确加入20ml饱和Ba(OH)2溶液；4）将3个放有活种子的小篮子分别挂在编号为13的广口瓶内，盖紧瓶塞，在低温（1号，冰箱冷藏室）、室温（2号）和高温（3号，40C）中处理，经常摇动，以破坏碱液表面的硬膜；5）将放有死种子的小篮子挂在0号广口瓶内，在室温中按以上步骤处理；6）20min后，取出广口瓶中的小篮子，

4、加入12滴酚酞指示剂，盖紧瓶盖；7）用草酸滴定广口瓶中的碱液至红色刚好消失为止，记录空白及各个温度处理下的草酸用量（记为V0、V1、V2、V3）；编号0123种子（10g）死种子活种子活种子活种子温度室温低温4C室温高温40CBa(OH)220ml反应时间20min草酸体积V0V1V2V3实验处理情况列表5. 数据记录与处理处理空白滴定草酸用量（ml）处理滴定草酸用量（ml）空白与处理草酸用量差值（ml）呼吸速率（mgCO2 g1 fw h1）低温室温高温结果计算与分析呼吸速率v（mgCO2 g1 fw. h1）：上式中，V0：空白滴定用去的草酸量（ml） Vn：处理滴定用去的草酸量（ml）v =（V0-Vn）X 草酸浓度 X CO2分子量种子质量（g）X 反应时间（h）=（V0-Vn）X X 4410 X0.3 X（V0-Vn）=4416020注意事项防止口中呼出的气体进