第3章中药制剂的检查

1、第3章中药制剂的检查【目的要求】掌握重金属、砷盐的检查原理和方法熟悉中国药典现行版制剂通则的检查项目及特殊杂质的检查原理了解农药残留量的检查原理和方法了解黄曲霉毒素的检查方法药物分析学科中药制剂的检查项目：制剂通则检查一般杂质检查特殊杂质检查微生物限度检查药物分析学科1 中药制剂杂质检查一、中药制剂的杂质指能危害人体健康或影响药物质量的物质。（一）杂质的分类一般杂质（如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐）特殊杂质：根据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。（二）杂质来源中药材原料中带入生产制备过程中引入贮存过程中引起的中药制剂自身理化性质的改变药物分析学科二、杂质的限量检

2、查1、杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量，通常用%或ppm表示。2、杂质限量检查及计算方法1）限量检查：规定一定限度，要求所检测的样品中某组分的含量不超过此限度。 2）检查方法对照品比较法：取一定量与被测杂质相同的纯物质或其它对照品配制成标准溶液，与一定量供试药物的溶液，在相同处理条件下，比较反应结果，从而确定杂质限量是否超过规定。灵敏度法：在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，观察有无正反应出现。1 中药制剂杂质检查药物分析学科1 中药制剂杂质检查3）计算方法药物分析学科1 中药制剂杂质检查例1：注射用双黄连（冻干）中砷盐限量检查 取本品0.4g，加2%硝酸镁乙醇溶液3ml，点燃，燃尽

3、后，先用小火炽灼使炭化，再在500600炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸5ml与水21ml使溶解，依法检查（中国药典2000版附录 F）如果标准砷溶液（1gAs/ml）取用量为2ml，计算杂质限量。药物分析学科1 中药制剂杂质检查规定：含重金属百万分之五(5ppm)计算：应取标准铅溶液(10gPb/ml)多少ml？例2. 葡萄糖中重金属的检查方法：药物分析学科1 中药制剂杂质检查例4. 肉桂油中重金属检查取肉桂油10ml，加水10ml与盐酸1滴，振摇后，通硫化氢气使饱和，水层与油层均不得变色。例3. 溴化钠中砷盐检查S = = x106 =0.5gC.VL2.0X1/1064方法：中国药典规定，取

4、标准砷溶液2.0mL(每1mL相当于1g砷) 制备砷斑规定：含砷量不得超过4 ppm计算：应取供试品量(g)？药物分析学科一、重金属检查法1、重金属的概念重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属. 如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等.重金属存在影响药物的稳定性及安全性. 铅易在体内积蓄中毒,以Pb为代表.2 一般杂质检查药物分析学科一、重金属检查法（一）第一法：硫代乙酰胺法1、原理：2 一般杂质检查2、适用范围：适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中显色的重金属限量检查。药物分析学科2 一般杂质检查2 操作方法样品管对照管结果观察 样

5、品 对照药物分析学科2 一般杂质检查3讨论标准铅溶液浓度：27ml溶液中Pb2+标准溶液10g/ml 12ml硫代乙酰胺试液： 95版药典改用硫代乙酰胺为显色剂溶液的pH： pH在3.03.5时, 呈色较完全. 供试品溶液有颜色时的处理a.外消色法：. 稀焦糖溶液调节， . 指示剂调节b.内消色 药物分析学科2 一般杂质检查3讨论 干扰物的排除方法a.供试品中微量高价Fe3+存在干扰：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S,产生混浊影响检查.排除：加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+.如：葡萄糖酸亚铁中重金属的检查.b.供试品为铁盐（大量的Fe3+）Fe3+在HCl溶液中能形成配位化合

6、物用乙醚提取Fe3+HCl HFeCl62-（黄色）或水层加氨试液调至碱性,残存的Fe3+可用KCN掩蔽, 按第三法检查. 如：枸橼酸铁铵的重金属检查药物分析学科一、重金属检查法（二）第二法：灼烧后检查1、原理：供试品先炽灼破坏后,使有机结合的重金属游离, 再按第一法检查.2 一般杂质检查2、适用范围：适用于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理后在酸性溶液中显色的重金属限量检查适用于绝大多数的中药药物分析学科一、重金属检查法（二）第二法：灼烧后检查3、操作：2 一般杂质检查 缓缓炽灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供试品 炭化 加热 HNO3 500-600H2SO4 除尽

7、 放冷 完全灰化 蒸干HCl 2ml 水15ml 中性 按第一法检查 蒸干 氨试液注意：做空白试验 药物分析学科一、重金属检查法（二）第二法：灼烧后检查4、讨论：a. HNO3处理后,必须蒸干除尽NO.b. 炽灼温度严格控制：500-600c. 含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用铂坩埚或硬质玻璃 (玛瑙) 蒸发皿.如：盐酸氟奋乃静中重金属检查2 一般杂质检查药物分析学科一、重金属检查法（三）第三法：硫化钠法1、原理 在碱性介质中,以Na2S为显色剂, 使Pb2+与S2-作用生成PbS 的混悬液, 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较, 不得更深.2、适用范围 适用于难溶于稀酸（或在稀酸中即生

8、成沉淀）但能溶解于碱性溶液的药物中重金属的检查.3、方法 取供试品适量,加NaOH试液5ml和水 20ml使溶解后,置纳氏比色管中,加Na2S试液5滴, 摇匀, 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较.2 一般杂质检查药物分析学科一、重金属检查法（四）第四法：微孔滤膜法1、原理 同第一法2、适用范围 当重金属含量低(2-5g) 时, 在比色管中难于目视观察,采用本法.3、方法 使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上(铅斑)提高检查的灵敏度. 2 一般杂质检查药物分析学科二、砷盐检查法（一）古蔡氏法Gutzeit（法定方法）1、原理：2 一般杂质检查 AsO33-+3Zn+9H+AsH3+3Zn

9、2+3H2O砷化氢与溴化汞试纸作用： AsH3+2HgBr22HBr+AsH(HgBr)2 (黄色) AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3 (棕色) As5+反应速度慢，需将As5+转化为As3+初生态的氢药物分析学科二、砷盐检查法（一）古蔡氏法Gutzeit1、原理：故加入碘化钾、酸性氯化亚锡还原剂，将5价砷还原为3价砷AsO43-+2I-+2H+ AsO33-+I2+H2OAsO43-+Sn2+2H+ AsO33-+ Sn4+H2OI2+Sn2+ 2I-+Sn4+4I-+Zn2+ ZnI42-Sn2+Zn Sn+Zn2+2 一般杂质检查促进反应向右进行形成锌锡齐，有利于反应平

10、稳的进行药物分析学科二、砷盐检查法（一）古蔡氏法Gutzeit2、装置：3、操作： A瓶：标准砷溶液(1g/ml )2ml+盐酸5ml+水21ml+KI试液5ml+酸性SnCl2试液5滴，室温放置10min A瓶锌粒2g，接导气管C 25 -40水浴45min取出，比较砷斑颜色深浅2 一般杂质检查HgBr2试纸醋酸铅棉60mg(装管高度6-8cm)药物分析学科二、砷盐检查法（一）古蔡氏法Gutzeit4、讨论1） Zn粒 2）溴化汞试纸的选择3）适宜的PH值及反应温度和时间4）干扰物的排除a、供试品是硫化物,亚硫酸盐,硫代硫酸盐干扰：排除方法：加入浓硝酸处理b、 供试品是铁盐(Fe3+) 干扰

11、：Fe3+能消耗还原剂(KI、SnCl2), 并能氧化砷化氢.排除方法：先加酸性SnCl2试液使 Fe3+ Fe2+2 一般杂质检查药物分析学科二、砷盐检查法（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）（法定）第一步：同古蔡氏法生成砷化氢第二步：砷化氢还原Ag-DDC溶液,产生红色的胶态银.目视比色法仪器分析 510nm，可定量2 一般杂质检查SSHAg63+AsC2H5NC2H5CSS+C2H5NC2H5CAsH3 C2H5NC2H5CSSAgNCSS +6药物分析学科二、砷盐检查法（三）白田道夫法（灵敏度低）1、原理：SnCl2在HCl中能将砷盐还原为棕褐色的胶态砷, 与一定量的标准砷

12、溶液按同法处理后进行比较, 判断供试品中砷盐的限量.2 一般杂质检查2As 3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As + 3SnCl4 + 6H+棕褐色2、对含锑药物中砷盐的检查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法.药物分析学科2 一般杂质检查二、砷盐检查法（四）奇列氏法（次磷酸法）1、原理：在盐酸酸性溶液中, 次磷酸还原砷盐为棕色的游离砷,与标准砷溶液同法处理后比较颜色.NaH2PO2+HClH3PO2+NaCl3H3PO2+H3AsO33H3PO3+2AS2. 特点不受S2-,SO32-,Sb干扰灵敏度较古蔡氏法低药物分析学科2 一般杂质检查三、铁盐检查法第一法 硫氰酸盐法1. 原理 铁盐在

13、盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配离子,与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比较.2. 操作4ml25mld.HCl30%硫氰酸铵过硫酸铵50mgH2O50mlH2O 样品标准溶液影响药物稳定性药物分析学科2 一般杂质检查四、硫酸盐检查指示性杂质1、原 理硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡的白色浑浊液,与一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在相同条件下生成的浑浊比较.2. 操作法2ml40mld.HCl25%BaCl25mlH2O50mlH2O 样品标准溶液浓度范围：0.1mg0.5mgSO42-/50ml药物分析学科2 一般杂质检查五、氯化物检查指示性杂质1. 原理利用氯

14、化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应, 生成氯化银白色浑浊液, 与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较, 浊度不得更大.Cl- + Ag+ AgClH+5ml HNO3/50ml，30-40，置暗处反应) 适宜的浓度范围：50-80 g Cl- /50ml药物分析学科2 一般杂质检查六、干燥失重药品在规定的条件下，经干燥后所减失的重量，包括水分及其他挥发性成分。检查方法常压恒温干燥（烘干法）-受热较稳定的中药制剂 恒重：连续2次干燥后的重量差异不超过0.3mg干燥剂干燥 -受热易分解或挥发的供试品 硅胶，五氧化二磷，硫酸等干燥剂减压干燥熔点低、受热不稳定及较难赶除水分的供试品药

15、物分析学科2 一般杂质检查七、水分测定法检查方法烘干法-不含或含少量挥发性成分的供试甲苯法-含挥发性成分的供试品减压干燥-含挥发性成分的贵重药品气相色谱法-散剂、颗粒剂、丸剂、片剂等 各类型中药制剂中微量水分的测定 费休法药物分析学科2 一般杂质检查八、炽灼残渣1、定义：有机物经高温炽灼后残留的非挥发性物及杂质，多为金属的氧化物或无机盐类。2、操作：供试品1.02.0g 置已恒重的坩埚中 精密称定 炽灼至炭化放冷 硫酸0.51ml使湿润 低温除尽硫酸蒸气700800至灰化 精密称定 恒重3、注意：如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必须控制 在500600。 药物分析学科2 一般杂质检查九、灰

16、分测定1、总灰分：中药经粉碎后加热，高温炽灼至灰化，则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残留，由此所得灰分为“生理灰分”，即总灰分 2酸不溶性灰分 中药经高温炽灼得到的总灰分加盐酸处理，得到不溶于盐酸的灰分，成为酸不溶性灰分。 注意：当灰分本身差异较大时，增加酸不溶性灰分的测定药物分析学科2 一般杂质检查十、有害元素的测定05版药典增加“铅、镉、砷、汞、铜”的限量测定测定方法：原子吸收分光光度法 电感耦合等离子体质谱法测定药材：甘草、黄芪、西洋参、丹参、白芍、金银花限 量：铅5ppm，镉0.3ppm，砷2ppm， 汞0.2ppm，铜20ppm药物分析学科3 特殊杂质检查特殊杂质：指在该药品的生产和贮存过程中，根据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。西洋参中人参的检查大黄中土大黄苷的检查阿胶中碱性挥发性物质的检查乌头酯型生物碱的检查药物分析学科4 农药残留量的检查常见农药的种类 （1）有机氯类：DDT、六六六等 （2）有机磷类：敌敌畏、乐果等 （3）植物性农药：烟叶、尼古丁，除虫菊酯等 （4）无机农药：磷化铝、砷酸钙等 （5）苯氧羧酸类除草剂：2，4-D；2，4，5-T等分析方法：GC（法定方法） ，TLC药物分析学科5 黄曲霉毒素的检查（食标）黄曲霉毒素（aflatoxin）极强的毒性和致癌性在紫外线照射下，能发出荧光耐热，在280时发生裂解低浓度时易受紫外线破坏，被氧