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1、细胞毒理学实验小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能损伤的检测山东师范大学生命科学学院实验目的了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理。了解细胞吞噬作用的基本过程。了解吞噬百分数和吞噬指数的计算方法及其在物质毒性检测中的应用。实验原理吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式，也是高等动物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，当病原微生物或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化性，会向异物处聚集，将其内吞入细胞质，形成吞噬泡，然后吞噬泡与溶酶体融合，将异物消化分解。吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助，如果用降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞，则可阻断吞噬泡的形成

2、；免疫抑制剂环磷酰胺（CYP）对巨噬细胞的吞噬作用也有影响。通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬，计算吞噬百分数和吞噬指数，可以分析判断机体的免疫水平。实验原理实验用品1器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、 载玻片、盖玻片、吸管等2试剂： 0.85%生理盐水；阿氏（Alsever）血液保存液；蛋白胨2.0g加水100ml灭菌备用，环磷酰胺。3材料：小白鼠；1%鸡红细胞悬液实验步骤鸡翼下静脉取血后，加生理盐水离心两次，然后根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水，调至鸡红细胞浓度为1%。将小鼠分成实验组和对照组，实验组小鼠大剂量注射环磷酰胺溶液一次。实验前三天，每天向小鼠（实验组和对照组

3、）腹腔注射2%的蛋白胨溶液1ml，实验前30min，向腹腔内注射1%鸡红细胞1ml。引颈处死吸取腹腔液分别取实验组和对照组小鼠各1只，同时准备好玻片，做好标记，分别取材，制备腹腔液涂片。在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴腹腔液，静置10分钟，使腹水细胞贴壁，弃去生理盐水，待其稍干后，进行瑞氏染色(浓染1-2min，淡染3-5min)。未被吞噬的鸡红细胞吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞实验报告镜检时，你能在视野中看到几种类型的细胞？计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。 活化的吞噬细胞的数量吞噬百分数= 100个吞噬细胞 活化的吞噬细胞中吞噬的鸡红细胞的总量吞噬指数= 100个活化的吞噬细胞实验组对照组吞噬百分数吞噬百分数平均值吞噬指数吞噬指数平均值在实验组和对照组小鼠腹腔液涂片上各随机选取多个视野，统计各视野内的吞噬百分数和吞噬指数，并对结果进行统计学分析（独立样本T检验），比较两组数据有无显著性差异。思考与讨论在实验过程中如何保

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