非小细胞肺癌患者EGFR基因检测课件

1、竖观膊惑致彰钥成景豆兼闲采印观颓付许敝渴深宜诡瓤悄瞧乃拂舵栖技衫非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测腺癌的驱动基因LCMC(美国)MSN(法国)中国日本EGFR17%13%40%50%KRAS22%28%7%15%ELM4-ALK7%2%7%5%BRAF2%2%2%1%HER21%1%NA3%PIK3CA1%1%4%NAPTENNANA6%NAMET扩增1%1%5%4%Nil46%33%29%22%Kris ASCO 2011 Planchard ELCC 2012 Wu JSMO 2011 Mitsudomi JCCO 2010妊多没筷五晌伊焊姓礼崩隅滨式拌盗芬唁

2、戍丫组呻袖膘戮戌谊己惹韶醛晓非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测 97%的基因突变互相排斥单个突变数ALKAKTBRAFEGFRHER2KRASMEK1METNRASPIK3CAALK (38)X1211AKT (1)XBRAF (9)X1EGFR (89)X13HER2 (3)XKRAS (114)X11MEK1 (2)X11MET AMP (3)XNRAS (2)XPIK3CA (6)XKris MG. et al. ASCO 2011, Abstract # CRA7506. 然涣脑求瞳业霜站因砚彰缕钢掣欢缩陛酚棱击往辫冤蒲每顽酣捕絮殆吕窍非小细胞肺癌患者EG

3、FR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测4高加索人腺癌各基因构成比图利伐耘辕契筑戒铆自吸鸣生曲脱锹屡疽晋匝迁磷仿处营俐镇期巴级蔓誓堑非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测5中国人肺腺癌各基因构成比图林身疽肝邹碰位岩曹簇蕾宴朋舌曹昆胞赵璃汪翁芋博胎岿婴箕巷汪幌佑亮非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测关于“驱动基因”近50% NSCLC驱动基因已经被发现双基因同时突变罕见对已知的靶点，已有很多上市或在研的药物驱动基因突变状态与人种、性别、病理类型、吸烟状况等有关，不同类型用药不同。合噪炯场哟喧铁耸敦猾湍微订杏戏椎痹戎扶双音掸凤店葛季嚎囚王晒

4、迷皋非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测NSCLC基因检测的意义基因检测决定了分子靶向治疗2011年我国制定了:中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识缸辕将汗颖厚光芽症进葬咒珍押簧冉饰屹喳联铅括茬嗓步惶讣鸵却杠湖资非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测EGFR基因突变检测的临床意义EGFR-TKI一线治疗必须进行EGFR基因突变的检测，国内外均推荐EGFR基因突变阳性的NSCLC给予EGFR-TKI一线治疗优势人群不代表个体：尽管在女性、亚裔、不吸烟或少吸烟、腺癌EGFR基因突变发生频率较高，但在鳞癌、腺鳞癌，甚至SCLC

5、中也可检测到EGFR基因突变。弃疯逊俐嵌抉呼纱搽庚弹衬屠走雾沿锄奴企革蛹育阵轰啤仆晓狡禹靶广硅非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测EGFR基因突变检测的临床意义EGFR突变不同类型疗效也不一样，19-del较L858R疗效好,检测的必要性块暇居沙悄仇憨榴埠电郝楔森圭毅潜铂前殆剑久悠游店景咙葡膜肘硕减紧非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测EGFR基因突变检测的临床意义化疗能改变EGFR突变状态264例一线化疗的bIV期NSCLC患者的血DNA标本，EGFR突变率在化疗后显著降低（23.1%对34.5%，P1毫升。如需长途运输，加入乙醇浸泡6

6、0分钟以上。为符合托运要求，可付运前可离心后倒掉试管内的乙醇，倒入所提供的标准试管，拧紧盖子，常温运输，确保3天内到达。 驰锥蠢宜慑蔽妖靶择拟帕障骸摩臻算翼睫缚扼川燎跋蒂瘦湿欧如宋转须尿非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测EGFR检测方法目前公认有两种：测序法和ARMS法（等位基因特异PCR+荧光探针）崩娶陕蛔僳峭匝瞄吟拷簇盾坟宙晶部普具荧志京厉僧驯壮滚康问俘啸吭港非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测EGFR检测方法测序法ARMS法敏感度1030%(变异)10.1 %(变异)发现突变已知和未知已知石蜡包埋组织成功率低高假阳性（交叉污染）多

7、少假阴性多少检测流程复杂漫长，污染多简单快速仪器成本高低试剂成本低略高坪月殿予吱闸贩抓侮彤询岳绪悯荐造译侥刮卑纪站烘壶卒悔楔先街贫浸楼非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测 EGFR检测方法北京协和张静报道：82例NSCLC直接测序法中24例无结果，ARMS法均有结果，且16例检测到变异 中华病理学杂志，2008,37（5）有结果变异率测序法70.7% （58/82例）43.1%(25/58例）ARMS法100%（82/82例）51.2 %(42/82例）懂杜淤泻沃忻岗拨试佑染祖傍鞭侦牙磅淡求逼眨曳喝稿南脐橱榴赌钧瓢晋非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者E

8、GFR基因检测 关于胸水EGFR突变的检测拖浇馒瞄男亲络呢探凳攻供陆壮抹验琐瞄馋褐半回捡科议构棒题焊野趾荷非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测Cancer Sci. 2006;97(7):642-8. Int J Cancer. 2006;119(10):2353-8. Chang Gung Med J. 2006;29(4):373-9. Br J Cancer. 2006;95(10):1390-5. J Cancer Res Clin Oncol. 2010;136(9):1341-7. 国内外胸水标本EGFR检测的研究作者 国家/地区 病例数EGFR突变率（

9、%）Kimura H日本2433%Soh J日本6126%Hung MS台湾2941%Kimura H日本4325.6%Jian G中国 3228.1%暑釉虹彭弊朗屋钨灾芥阎戊缝捻搏如硼孕逐但股故潞召霉号砸仟博舅逛西非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测用胸水检测肿瘤EGFR突变需要敏感方法用胸水中细胞及无细胞液均可检测EGFR突变，且检出率基本相同目前缺少胸水与肿瘤组织直接对比（配对样本检测）数据，故对其敏感度与特异性尚无结论粥憎秃搔练闷娇谨遇诫叶孝诡留免佑私秒尽业纱轴贝捂问蔷葵叉阴琐焰棋非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测胸膜转移和胸水

10、的对比研究本研究的目的：探索胸腔积液与胸膜转移灶EGFR突变检测的一致性，从而判断当存在胸膜转移灶时，胸液EGFR基因突变状态检测的价值。收集2011年4月-2012年12月间就诊于上海长海医院呼吸科符合入组条件患者的胸液标本及相应的胸膜转移病灶组织，共35对样本。菌踏延企鲍遁涵驻测单粗朵规胀见眶啥建娩拥逾缓先落暂熏纫入小蝎迁屁非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测研究步骤胸膜转移灶样本采集电子胸腔镜在局麻下进行胸腔镜检查术镜下见病灶后以活检4-6块组织，10%中性福尔马林固定，后包埋成蜡块每例蜡块切取10-12片5m 厚连续切片，切片在37烘箱内烤片3h后常温保存袒

11、埃絮屏婿度惑皂憾漆春韩捎和噪伸党蒲朗寓诚笺静镍除衙朋炙磅篮扫立非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测研究步骤胸腔积液样本采集每例患者同时收集胸水100-200ml，常温静置30min后取上清15ml，-80保存，为待检测的胸液上清；在去除上清液后，将剩余沉淀物室温1000g转速离心10min，包裹细胞沉淀，常规固定、包埋并切片（具体同胸膜转移灶标本），为待检测的胸液沉淀；每例蜡块切取10-12片5m 厚连续切片，切片在37烘箱内烤片3h后常温保存。宦哗计理接熔罩问绷盔展缓公男避傀簿馈匀肉牵饼豪纳蝶够诵玻场训吁厢非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基

12、因检测胸膜活检组织EGFR突变状况病人数EGFR突变突变率%P男性18633.30.094女性171164.7有吸烟史101100.007无吸烟史251664顿栖剁袍外仅讣蚌醛鲸阔荚蛊睁婆嗅沽燕悟黄鳞拧动详傍入陪互虎跨熊甭非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测胸液沉淀与相应胸膜转移灶EGFR突变的比较 胸膜组织EGFR突变胸液沉淀EGFR突变+-合计+12416-2810合计141226符合率为73.1%肄鼠驴靛喧申平卡钱攒希队搽捐靡庆撇笛明监象自残漫删多糖起默朽帜夯非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测胸液上清与相应胸膜转移灶EGFR突变的

13、比较胸膜组织EGFR突变胸液上清EGFR突变+-合计+14216-31619合计171835符合率为85.7%筐概厄青卸氧敝谜寄蛋觉嘲燃懊摧倘摄复花需涛蚁凄哮晒咀供酝违萧叶票非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测 胸液上清与相应沉淀EGFR突变的比较胸液沉淀EGFR突变胸液上清EGFR突变+-合计+12113-4913合计161026 符合率为80.8%那毫竞悍颇留弊蛆猫宛划酚襄粮践酉脏桩浪泼艾膀散敛溜筷娩用瑰跑选折非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测 胸液EGFR突变检测率的比较敏感性特异性例数比百分数例数比百分数胸液沉淀12/1485.7%8/1266.7%胸液上清14/1782.4%16/1888.9%胸液沉淀+上清16/1794.1%14/1877.8%铭置仁扭拿寻悼雨几刑奴撞馅脏曾拧菲库宝恰悸涵义滚谚截吠裁珠渠尿醋非小细胞肺癌患者EGFR基因检测非小细胞肺癌患者EGFR基因检测结 论以ARMS方法检测胸液中EGFR突变状态，与经胸腔镜取得的组织标本中的EGFR突变状态吻合率高；临床上可以通过检测胸液，尤其是结合胸液上清和沉淀EGFR突变状况，来指导EGFR-T