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1、第38讲 基因工程考点一 基因工程的基本工具固必备知识提关键能力固必备知识一、限制性核酸内切酶(限制酶)1.来源:主要从_生物中分离纯化而来。原核2.作用:识别双链DNA分子的某种_并切开每条链中特定部位的两个核苷酸之间的_。特定的核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端专一性二、DNA连接酶1.作用:将限制酶切割下来的DNA片段_。在两个核苷酸之间形成新的磷酸二酯键。拼接成新的DNA分子2.类型常用类型 连接酶 连接酶来源_ 噬菌体功能只“缝合”_“缝合”_结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的_,形成重组DNA分子大肠杆菌黏性末端黏性末端和平末端磷酸二酯键三、载体1.常用载体质粒(1) 化学本质:_双

2、链环状DNA分子(2) 特点能自我复制有一个至多个_有特殊的_限制酶切割位点标记基因动植物病毒3.载体的作用:携带外源DNA片段进入受体细胞。4.载体具备的条件条件作用稳定并能复制使目的基因在宿主细胞中稳定存在,且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点供外源DNA片段(基因)插入其中具有特殊的标记基因供重组DNA的鉴定和选择限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关酶的分析比较名称作用部位作用底物形成产物限制酶磷酸二酯键DNA分子带黏性末端或平末端的DNA片段DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段重组DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸子代DNA分子DNA(水解)酶磷酸二酯键DNA分子游离的脱氧核

3、苷酸解旋酶碱基对间的氢键DNA分子脱氧核苷酸单链RNA聚合酶磷酸二酯键核糖核苷酸单链RNA分子用相同限制酶切割来源不同的DNA后,可产生相同的末端启动子和终止子(4) 科学家将生长健壮、苗龄一致的转基因香蕉(实验组)与非转基因香蕉(对照组)进行_处理,鉴定两组之间的抗寒性差异,如果_,则说明获得了抗寒的香蕉优质品种。氨苄青霉素低温实验组的抗寒能力明显高于对照组提关键能力考向 基因工程的工具酶和载体 (2021海南月考)下列是基因工程的有关问题,请回答:(1) 限制性核酸内切酶可以识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并可以使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的_(填化学键名称)断开,形成的末端

4、通常可分为两种类型,分别是_和_。磷酸二酯键黏性末端平末端解析 限制性核酸内切酶作用的化学键是磷酸二酯键,切割DNA分子后形成平末端或黏性末端。(2) 目的基因和载体重组时需要的工具酶是_,与限制性核酸内切酶相比,它对所重组的DNA两端的碱基序列_(填“有”或“无”)专一性要求。DNA连接酶无解析 DNA连接酶将目的基因与载体连接起来,它能催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键,不具有专一性。分析可知,可用限制酶_(填“”或“”)切割目的基因所在的DNA,这样做的原因是_。目的基因两端均有酶的识别序列解析 分析题图可知,目的基因两端均有酶的识别序列,因此应用限制酶切割目的基因所在的DNA。甲乙(1) 基因工程就是按照_,通过体外_和_等技术,赋予生物以新的遗传特性,由于基因工程是在_水平上进行设计和施工的,因此又叫作DNA重组技术。人们的意愿DNA重组转基因DNA分子具有多个限制酶切割位点、具有标记基因(3) 将目的基因与此质粒构建成基因表达载体时,通常用图中的_两种限制酶切割此质粒

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