大学生创新项目申请书

1、遵义医学院大学生创新性实验计划项目申请书项目名称 杜仲叶绿原酸提取物调血脂作用机制研究申请人罗灯明年级专业2 00 8级牛物工程导师姓名李文娜联系电话07 567623384E-mail:lielizabeth126. com 填表日期制表：遵义医学院实验教学管理中心2011年6月2日简 表项目名称杜仲叶绿原酸提取物调血脂作用机制研究起止时间2011年7月至2012年5月申请经费3700 元人及 文 团队学号姓名年级所在学院、专业联系电话E-mail200820116罗灯明2008珠海校区生物工HYPERLINK mailto:891903946 8919039462

2、00820132张雄2008珠海校区生物工HYPERLINK mailto:274719523 274719523导师姓名李文娜学院珠海校区职务/职称教研室副主任/副教授E-mail HYPERLINK mailto: 电 话07567623384一、项目简介（300-500字左右）本课题将研究杜仲叶绿原酸超声提取物的调血脂抗动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS）作用。当前，心血管疾病是危害人体生命健康的最严重病症之一，而心血管疾病的主要病理基础是AS。研究发现，植物中的多酚类具有抗AS作用，特别是杜仲中含有大量的多酚类，其中又以绿原酸的潜在抗AS作用

3、较强。杜仲叶中绿原酸的含量相当丰富，且杜仲叶比杜仲皮的价格更为低廉。有研究表明杜仲叶具有降血脂抗 AS的作用，但具体机制尚不明确。血脂的高低与脂肪的吸收具有密切的关系，而胰脂肪酶在脂肪吸收中发挥着重要作用，抑制该酶能减少小肠脂肪的吸收，从而起到调血脂作用。胆汁酸是胆固醇的主要排泄通路，与脂肪的吸收也同样有着紧密联系，若干预胆汁酸的肝肠循环，将降低脂肪的吸收并增加体内胆固醇的代谢，起到调血脂作用。所以本研究构想以抑制脂肪吸收与增加胆汁酸排泄为降血脂作用靶点，探索杜仲叶绿原酸超声提取物对脂肪吸收，以及胆汁酸代谢的影响。本课题研究结果将有助于更深入了解杜仲叶绿原酸超声提取物的调血脂及抗AS作用机制，

4、为杜仲叶的开发与利用提供理论依据， 为新型降脂药的发现提供新的思路， 并为临床治疗AS等心血 管疾病提供新的手段。二、申请理由（包括自身具备的知识条件、自己的特长、兴趣等）经过三年的学习，对相关专业（生理学、生物化学、药理学等）的基础知识有了一定的了解；通过实验课的学习，掌握了相关实验的基本操作。并且本人对科研的兴趣浓厚， 加上本人动手能力 较强，与本课题组同学能够相互融洽的沟通协作，所以申报了这次学校2011年度大学生创新性实验计划项目。三、立项背景(研究现状、趋势、研究意义等，参考文献和其他有关背景材料)杜仲作为一种重要的中草药，在中国、日本和韩国已被广泛使用。近年来有研究称，杜仲叶含有与

5、杜仲皮相似的医药成分和营养物质1-3,并且杜仲茶已开始用于高血压的治疗。另外，有研究发现杜仲具有抗 AS的潜力。目前的研究表明，杜仲的某些药理活性与抗AS有关，如杜仲叶提取物对喂食高脂肪饲料的仓鼠具有降血脂作用4 ,杜仲叶水提取物对C57BL/KsJ-db/db小鼠具有降血糖和降血脂的作用5 ,杜仲水提取物具有抑制由Cu2+ 诱导的LDL的氧化修饰作用1等。现发现杜仲叶中绿原酸的含量相当丰富，并且绿原酸很可能具有保护心血管疾病的药理活性。 有研究发现，绿原酸对高脂饲料喂养金仓鼠的血脂和血糖代谢以及肝过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR的表达具有调节作用6 o PPAR亚科有三种蛋白：PPAR

6、a , PPAR / 8 , PPAR 丫。其中PPAR ”是一种细胞核受体，主要能调节游离脂肪酸(FFA)的键合、运输、氧化与合成7。其激活后，能增加FFA氧化酶的活性，提升肝脏与肌肉中脂类能量的利用8从而起到调节血脂的作用。另外有研究还发现，绿原酸能激活肝脏甘油三酯(TG的彳t谢9来调节血脂。此外，绿原酸对高脂饮食诱导的肥胖小鼠显示出抗肥胖活性，并改善其脂质的代谢10 o还有研究表明，绿原酸可以改变(fa/fa ) Zucker大鼠血浆和肝脏中胆固醇、TG和某些矿物质的浓度11。导师课题组前期研究发现杜仲叶绿原酸提取物(HPLC测定，绿原酸含量40%能够在体外抑制胰脂肪酶和HMG-Co娅原

7、酶的活性，并且作用效果强于或等同于临床现有的调血脂和减肥药物辛伐他汀和奥利司他。因此本课题设计了对杜仲叶绿原酸提取物的在体实验研究，以期望验证其体外降血脂的作用效果，为深度开发杜仲叶作为减肥和降血脂药物提供进一步的理论依据。虽然目前对杜仲叶的相关研究还不是很多，但随着其越来越多的药用有效成份及其药理活性的发现，杜仲叶的研究即将成为生物医学研究的一个热点。此项研究能够进一步探索杜仲叶对心血管系统的保护作用。并为我们将课本上的知识进行吸收与加工，以及将科学技术向现实生产力转化提供了实践的机会。参考文献Luo J, Tian C, Xu J, et al. Studies on the antiox

8、idant activity and phenolic compounds of enzyme-assisted water extracts from Du-zhong (Eucommia ulmoides Oliv.) leaves. J Enzyme Inhib Med Chem, 2009,24(6):1280-7.杜红岩，李钦，杜兰英等.杜仲雄花茶营养成分的测定分析.中南林业科技大学学报.2007. 27(6): 88-91.赖娟华，徐丽瑛，饶华，李玉云.杜仲叶化学成分和药理作用研究概况.实用中西医结合临床.2004. 4(2):67-68,78.Choi MS, Jung UJ,

9、Kim HJ, et al. Du-zhong (Eucommia ulmoides Oliver) leaf extract mediates hypolipidemic action in hamsters fed a high-fat diet. Am J Chin Med, 2008,36(1):81-93.Park SA, Choi MS, Kim MJ, et al. Hypoglycemic and hypolipidemic action of Du-zhong (Eucommia ulmoides Oliver) leaves water extract in C57BL/K

10、sJ-db/db mice. J Ethnopharmacol, 2006,107(3):412-7.Li SY, Chang CQ, Ma FY, et al. Modulating effects of chlorogenic acid on lipids and glucose metabolism and expression of hepatic peroxisome proliferator-activated receptor-alpha in golden hamsters fed on high fat diet.Biomed Environ Sci, 2009,22(2):

11、122-9.Aoyama T, Peters JM, Iritani N, et al. Altered constitutive expression of fatty acid-metabolizing enzymes in mice lacking the peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARalpha). J Biol Chem, 1998,273(10):5678-84.Muoio DM, Way JM, Tanner CJ, et al. Peroxisome proliferator-activated re

12、ceptor-alpha regulates fatty acid utilization in primary human skeletal muscle cells. Diabetes, 2002,51(4):901-9.Shimoda H, Seki E, Aitani M. Inhibitory effect of green coffee bean extract on fat accumulation and body weight gain in mice. BMC Complement Altern Med, 2006,6:9.Cho AS, Jeon SM, Kim MJ,

13、et al. Chlorogenic acid exhibits anti-obesity property and improves lipid metabolism in high-fat diet-induced-obese mice. Food Chem Toxicol, 2010,48(3):937-43.de Sotillo DV R, Hadley M. Chlorogenic acid modifies plasma and liver concentrations of: cholesterol, triacylglycerol, and minerals in (fa/fa

14、) Zucker rats. J Nutr Biochem, 2002,13(12):717-726.四、项目方案.课题目标：通过动物实验，主要观察杜仲叶绿原酸提取物对脂肪吸收与胆汁酸代谢的影响，探讨其主要作用机制及抗AS作用，并为新型降脂药的开发提供新的思路， 以及临床治疗AS等心血管疾病提供新 的方法。.课题思路：文献报道杜仲叶绿原酸提取物，具有调血脂的作用，但其作用机制尚不明确，有待进一步研究。 因此，本课题以脂肪的吸收与胆汁酸的代谢为降血脂的作用靶点初步探索杜仲绿原酸提取物的降血 脂及抗AS作用。以奥利司他为阳性对照对其在大鼠体内调血脂进行比较。初步确定药物调血脂及 抗AS的作用机制及

15、其调控环节。.技术路线奥利司他；杜仲叶绿原酸提取物；绿原酸标准品大鼠灌胃收集粪便测定粪便中所含的总脂含量测定粪便中所含的胆汁酸含量测定粪便中所含的胆固醇含量重量法测定总脂磷铝酸比色法测定总胆汁酸三氯化铁法测胆固醇统计分析数据，撰写论文五、特色与创新本实验的特色与创新主要有：在前人研究的基础上以价格低廉的杜仲叶代替价格较之昂贵的中药杜仲皮为原料来提取具有 生物活性的药用有效成分。通过考察杜仲叶绿原酸提取物对脂肪、胆固醇吸收，以及胆汁酸代谢环节的影响，初步探索 调节血脂的多靶点效应机制及杜仲叶提取物的抗AS作用机制。六、进度安NF （选题、自主设计实验、实验研究、数据处理、研制开发、撰写总结报告、

16、成果推广或论文发表等）2011年6月-2011年8月选题及实验设计2011年9月-2012年2月实验研究2012年3月-2012年5月数据处理及撰写总结报告，并撰写论文发表七、中期及结题预期目标（即中期检查和结题验收时考核的依据）统计数据撰写综述2篇；参与生物工程系本科毕业生答辩，提交答辩论文2篇。八、经费使用计划 （注：预算支出科目按下列顺序填写：1.科研业务费2.实验材料费3.仪器设备费4.其他，开支范围参见国家自然科学基金资助项目财务管理办法第二章。）经费支出项目名称具体支出内容金额（元）使用时间科研业务费测试生化指标，提取杜仲叶绿原 酸所需水电煤气，论文打印，查 阅复印文献费用2002

17、011年7月至2012年5月实验材料费sd大鼠共50只（1250元），高脂饲料配制（100元），其他化学试剂（ 350元），绿原酸标准品（300元），奥利司他（500元）25002011年7月至2012年5月其他（测定试剂盒）胆固醇、胆汁酸、总脂肪测定试剂盒10002011年7月至2012年5月九、申请者承诺我保证上述填报内容的真实性。如果获得资助，我与本项目组成员将严格遵守遵义医学院大学生创新实验项目管理办法的有关规定，切实保证研究工作时间， 按计划认真开展研究工作，按时报送有关材料。申请者（签章）年 月 日十、审批情况指导教师对项目的评价及承诺:签字：年 月 日院（部系）推荐意见:主任签字

18、：（盖章）年 月 日 学校专家组评审意见:组长签字：年 月 日实验教学管理中心意见：实验教学管理中心（盖章）注：请认真、如实填写栏目中各项内容。如果表格空间不够,范围4.14.2可依次序顺延填写。合同管理制度本标准规定了龙腾公司合同管理工作的管理机构、职责、合同的授权委托、洽谈、承办、会签、订阅、履行和变更、终止及争议处理和合同管理的处罚、奖励;本标准适用于龙腾公司项目建设期间的各类合同管理工作，厂内各类合同的管理，厂内所属各具法人资格的部门，参照本标准执行。规范性引用中华人民共和国合同法龙腾公司合同管理办法定义、符号、缩F略语职责总经理：龙腾公司经营管理的法定代表人。负责对厂内各类合同管理工作实行统一领导。以法人代表名义或授权委托他人签订各类合法合同，并对电厂负责。工程部：是发电厂建设施工安装等工程合同签订管理部门；负责签订管理基建、安装、人工技术的工程合同。4.3经营部：是合同签订管理部门，负责管理设备