纳米电化学生物传感器重点

1、收稿:2008年3月，收修改稿:2008年8月*深圳大学科研启动基金项目（No.200818 资助* 通讯联系人 e 2mail:yang HYPERLINK mailto: . cn纳米电化学生物传感器*杨海朋*陈仕国李春辉陈东成戈早川（深圳大学材料学院深圳市特种功能材料重点实验室深圳518060摘要纳米电化学生物传感器是将纳米材料作为一种新型的生物传感介质，与特异性分子识别物质如酶、抗原 P抗体、D NA等相结合，并以电化学信号为检测信 号的分析器件。本文简要介绍了生物传感器的分类和纳米材料在电化学生物传感器 中的应用及其优势，综述了近年来各类纳米电化学

2、生物传感器在生物检测方面的研 究进展，包括纳米颗粒生物传感器，纳米管、纳米棒、纳米纤维与纳米线生物传感器 以及纳米片与纳米阵列生物传感器等。关键词生物传感器电化学传感器纳米材料生物活性物质固定化中图分类号：O65711; TP21213文献标识码：A文章编号：10052281X（2009 0120210207Nanomaterials Based Electrochemical BiosensorsY ang Haipeng*Chen Shiguo Li Chunhui Chen Dongche ng Ge Zaochuan (Shenzhen KeyLaboratory of Special

3、 Functional M aterials, College of Materials Science andEngineering,Shenzhen University, Shenzhen 518060, ChinaAbstract Biosensors w hich utilize immobilized bioac tive compounds (such as enz ymes, antigen, antibody, D N A, etc. f or the c onversion of the target analytes into electroc he mically de

4、tectable products is one of the most widely used detection methods and have become an area of wide ranging research activity. The advances in biocompatible nano technology make it possible to develop ne w biosensors. A variety of biosensors with high sensitivity and excellent reproducibility based o

5、n nano technology have been reported in recent years. In this paper, the development of the researches on nano amperometric biosensors, one of the most important branches of biosensors, is revie wed. Nanoscale architectures here involve nano 2particles, nano 2wires and nano 2rods, nano 2sheet, nano

6、2array, and carbon nanotube, etc. Remarkable sensitivity and stability have been achieved by coupling immobilized bioactive compounds and these nanomaterials.Key words biosensors; electroche mistry sensors; nanomaterials; bioactive compounds; immobiliz ationContentsIntroduction to biosensorsNanomate

7、rials based electrochemical biosensors 2. 1 Challenges and developments of biosensors 2. 2 Introduction of nanomaterials3 Nanomaterials based electrochemical biosensors 2. 3. 1 Nano particles based electrochemical biosensors3. 2 Nanowires and nanorods based electrochemical biosensors3. 3 Carbon nano

8、materials basedelectrochemicalbiosensors3. 4 Nano array based electrochemical biosensors 2. 3. 5 Nanosheets based electrochemical biosensors 3 Concluding remarks第21卷第1期2009年1月化学进展PRO G RESS I N C HE M IST RYVol. 21No. 1 Jan. , 20091生物传感器概述生物传感器通常由生物识别元件（bioreceptor和信号转换器件（transducer两个部 分组成:生物识别单元具有专

9、一的选择性，可以获得极其高的灵敏度；而信号转换器 通常是一个独立的化学或物理敏感元件，可采用电化学、光学、热学、压电等多种 不同原理工作。把分子识别功能基底同高灵敏的信号转换器件相结合，就构成多种多样、千变万化的生物传感器1 40生物传感器可按照生物特异性授予机制或信号转换模式分类。按被选生物化学受体的不同，可将生物传感器分为酶传感器、 免疫传感器、组织传感器、微生物传感器和细胞传感器等。根据生物反应产生信息 的物理或化学性质，信号转换器通常采用电化学、光谱、热、压电及表面声波等技 术与之相匹配，而由此衍生出电化学生物传感器、光生物传感器、半导体生物传感 器、热生物传感器和压电晶体生物传感器等

10、。因为电化学转换器件具有较高的灵敏度，易微型化，能在浑浊的溶液中操作等许 多优势，并且所需的仪器简单、便宜，因而被广泛应用于传感器的制备中5,6。根据电化学检测的模式不同，又可具体分为安培型、电势型、表面电荷场致效应晶体管 (FE Ts型和电导型电化学生物传感 器。生物传感器诞生在20世纪60年代,而对其研究的全面展开是在20世纪80年 代。20多年来该领域发展迅速，取得了显著的成绩。随着人类基因组研究的深入进 行和微纳米技术的普及与成熟，纳米传感器、基因芯片以及微全分析系统(T AS等 新器件、新系统的出现，把生物传感器的研究推进到一个崭新的发展阶段 7,8。本文主要综述纳米电化学生物传感器

11、近年来的研究进展。2纳米电化学生物传感器纳米电化学生物传感器是将纳米材料作为一种新型的生物传感介质，与特异性 分子识别物质如酶、抗原P抗体、D N A等相结合，并以电化学信号为检测信号的 分析器件。211生物传感器的挑战与发展多年来，生物传感器引起了人们的极大关注，相当多的公司与研究单位开展了生 物传感器的研究与开发，相应的文章与专利也急剧增加。然而，目前成，试生产阶段, 仅有少数品种已计划大规模生产。造成这种状况的主要原因之一在于生物识别元件 的稳定性差，不能满足生物传感器长期持续检测的客观要求。发展新型材料和优秀的固定化方法则是提高生物识别元件稳定性的有效 途径之一8 11020世纪90年

12、代以来，纳米技术的介入为生物传感器的发展提供了新的活力 ，并 已取得了突破性的进展7 12。纳米材料由于比表面积大、表面反应活性高、表面原子配位不全等导致表面 的活性位点增加、催化效率提高、吸附能力增强，为生物传感研究提供了新研究途 径。与传统的传感器相比，新型纳米材料传感器不仅体积更小、速度更快、而且精 度更高、可靠性更好。由于纳米粒子高的比表面积和其本身的生物兼容性，在生物电催化反应中起着重要作用。例如与纳米粒子组装后的酶，其活性中心可更接近电极表面，易于进行电子转移，提高了生物电催化活性，使其更有利于在电化学传感器 中应用13, 14o 212纳米材料概述纳米材料是指三维空间中至少有一维

13、处于纳米尺度 (1 100nm范围内的材料或 由它们作为基本单元组装而成的结构材料，包括金属、氧化物、无机化合物和有机 化合物等。该尺寸处在原子、分子为代表的微观世界和宏观物体交界的过渡区域 (介观体系，处于该尺寸的材料表现出许多既不同于微观粒子又不同于宏观物体的 特性，突出表现为4大效应。(1表面效应。指纳米粒子的表面原子数与总体原子数之比随粒径的变小而急 剧增大，从而引起数与总体原子数性质上的突变。粒径到达10nm以下，表面原子数与总体原子数之比迅速增大，当粒径降至1nm时，表面原子数与总体原子数之比超过90%以上，原子几乎全部集中到粒子的表面，表面悬空键增多，化学活性增强。此 时粒子的比

14、表面积、表面能和表面结合能都发生很大的变化。(2体积效应，亦称小尺寸效应。当纳米粒子的尺寸与传导电子的波长及超导态 的相干长度等物理尺寸相当或更小时，周期性的边界条件将被破坏，熔点、磁性、光 吸收、热阻、化学活性、催化性能等与普通粒子相比都有很大变化，这种特殊的现象通常称之为体积效应。该效应为其应用开拓了广阔的新领域。(3量子尺寸效应。颗粒尺寸下降到一定值时，可将大块材料中连续的能带分裂 成分立的能级，能#211#第1期杨海朋等 纳米电化学生物传感器量子尺寸效应。当热能、电场能或磁能比平均的能级间距还小时，就会呈现一系列与宏观物质截然不同的反常特性。(4宏观量子隧道效应。隧道效应是基本的量子现

15、象之一 ，即当微观粒子的总能 量小于势垒高度时，该粒子仍能穿越这势垒。近来年，人们发现一些宏观量，例如微 颗粒的磁化强度、量子干涉器件中的磁通量以及电荷等亦具有隧道效应，它们可以穿越宏观系统的势垒而产生变化，故称之为宏观的量子隧道效应。纳米粒子也具有 这种贯穿势垒的能力。213纳米电化学生物传感器从纳米材料在电化学生物传感器中的具体应用来看 ，纳米电化学生物传感器主 要包括如下类型：纳米颗粒生物传感器，纳米管、纳米棒与纳米线生物传感器，纳米 片以及纳米阵列生物传感器等。其中因为碳纳米管的优异性能，使得基于碳纳米管 的电化学生物传感器发展极为迅速15 1721311纳米颗粒电化学生物传感器纳米颗

16、粒在电化学生物传感器中的应用非常广泛。纳米粒子由于具有大的比表 面积和很高的表面自由能，在吸附固定生物分子方面可以扮演重要的角色，用于生物 分子的固定,可以增加固定的分子数量，从而增强反应信号130金溶胶纳米颗粒由于吸附生物大分子后仍能保留其生物活性，因而最初广泛用于电子显微镜中标记生物分子18。自从Z hao等19报告了葡萄糖氧化酶被固定在金溶胶上制备了高性能的葡萄糖传感器以来，研究表明，多种酶可以牢固地吸附在金纳米颗粒 表面，并且能保留其催化活性。金纳米颗粒对氧化还原蛋白质在电极上起到定向作 用，可以改变氧化还原蛋白质的微环境，并可作为固定化氧化还原蛋白质与电极之间 有效的电子媒介体，从而

17、使得酶的氧化还原中心与电极间通过纳米粒子进行直接电 子转移成为可能。金溶胶逐渐被广泛用于固定化酶制备电化学生物传感器20 220目前已有多种纳米颗粒材料用于电化学生物传感器的制备。所用的纳米颗粒包括 TiO 2、Au、A g、Pt、Pd以及 SiO 2 等23 28。Tang 等23制备了憎水和亲水型的纳米二氧化硅及金颗粒，研究了不同颗粒的吸附性能和酶的活 性之间的关系。他们发现不论何种类型的颗粒，在同样制备条件下酶的吸附量总是随着颗粒尺寸的降低而增加。Jena等29把纳米金颗粒分散到二氧化硅溶胶凝胶网络中，形成了金纳米粒子修饰电极。该电极和脱氢酶组合成,（N AD H的检测极限低至5nM ,

18、显示了极高的灵敏度。Neufeld 等结合基因工程技术制备了全细胞的生物传感器，对基于细胞膜破坏类型的有毒化学物质，有极高的电流响应灵敏 度，对苯酚的检测极限可达116ppm。侯宪全等采用纳米Z nO与聚乙烯醇缩丁醛（PVB构成的复合膜基质来固定葡萄糖氧化酶（G OD ,制成的葡萄糖 生物传感器对葡萄糖响应的灵敏度大幅度提高。Z hao等32在铝电极表面自组装，憎水蛋白膜固定酶，制备了电流型葡萄糖传感器，其酶的利 用效率得到很大提高。Jena等33用L 2乳酸脱氢酶、羟胺和金纳米粒子制作了对 L 2乳酸盐敏感的电流型生物 传感器，该传感器具有灵敏度高、稳定性好、可多次重复使用的特点。Huang

19、等34将葡萄糖氧化酶吸附在硫化镉（CdS纳米粒子上，研究了纳米粒子对葡萄糖 氧化酶电子传递的促进作用。Bai等35利用金纳米粒子和介孔二氧化硅复合材料固定酶，制备了高效的电流型葡萄糖传感器。Chandra 等36把纳米金颗粒负载到功能化的介孔交联聚合物之中，制备了可灵敏检测过氧化 氢的修饰电极，该电极可以进一步发展为一系列的电化学生物传感器。纳米颗粒增强的电化学生物传感器的应用大大丰富了生物传感器的研究内容。然而对于纳米颗粒在这一体系之内所起的具体作用（例如究竟利用的是纳米材料4 大效应中的哪些效应 还不是很清楚。本课题组针对这一问题也进行了一定的探讨。通过对一系列不同粒径的纳米颗粒修饰的葡萄

20、糖生物传感器和不同厚度的纳米 二氧化硅膜修饰的生物传感器的性能测试研究，发现对于非金属的纳米颗粒而言，提 高传感器响应电流的途径可能仅仅是通过增加比表面从而提高酶的有效负载量来实 现的37,380而对于含有金属纳米颗粒的电化学生物传感器，我们认为金属纳米颗粒的存在 能够起到加速电极上电子传递过程的作用，从而改变电极反应规律390这与其他课题组的结论相符14核酸适配体（aptamers是一小段经体外筛选得到的寡核甘酸序列,能与相应的配 体进行高亲和力和强特异性的结合。它的出现为化学生物学界和生物医学界提供了 一种新的高效快速识别的研究平台,并在许多方面展示了良好的应用前景400郑静等利用金纳米颗

21、粒标记的核酸适配体以及被固定在磁性纳米颗粒上的核酸适配体与凝血酶蛋白同时结合形成磁性颗粒P凝血酶P纳米金胶的三明治结,#212#化学进展第21卷电极表面，通过检测电极上金胶的电化学信号，实现对凝血酶靶蛋白的检测。这 种生物传感器对凝血酶蛋白具有很高的特异性识别能力 ，其检测不受其他蛋白质如 牛血清白蛋白等存在的干扰，可应用于实际血浆中凝血酶的检测。在量子点电化学生物传感器方面,Liu等利用碳纳米管和硫化镉量子点的协同效应研制了检测葡萄糖氧化酶的电化学生物 传感器。该传感器可检测到峰形很好的葡萄糖氧化酶的氧化还原信号，与单独的确化镉量子点或碳纳米管修饰电极相比，该生物传感器在灵敏度及稳定性方面均

22、有显 著改善。Jie等研究了水溶性CdS纳米晶的电致化学发光(EC L o通过自组装与金纳米颗粒放大技术研制成一种新型的纳米量子点非标 记型ECL生物传感器，具有重现性好、响应速度快和稳定性好等优点。该课题组 还利用硒化镉纳米品与碳纳米管复合制备了无标记的ECL免疫传感器，对人抗体的检测极限低至 01001ng ml -144 o虽然量子点与生物大分子共价结合后能实现超敏感的生物检测，但是因为量子 点本身是一种有效的荧光标记物，所以量子点在电化学生物传感器中的应用不如在 结合荧光分析类的传感器中应用广泛。Varshney 等把抗体与磁性纳米粒子的组合体系与微电极阵列耦合在一起，制备了能够快速、

23、特异检测食品中大肠杆菌的阻 抗型传感器，对大肠杆菌的检测极限低至714104FU ml -1为了实现对单个细菌的检测，Lu等46经由lift 2of f过程，把厚度为100nm的金膜制成微电极阵列，在该电极上固定 抗体后可以实现对单个埃希氏菌的电流检测，并且可实现对细菌的现场监测。纳米颗粒修饰的生物传感器是最有发展前景的传感器之一。纳米颗粒种类多，制备和形貌控制方法较为完善，与不同的生物相容材料组合而成的修饰电极，在生物 传感器领域必将发挥越来越大的作用。21312纳米棒、纳米线电化学生物传感器一维纳米材料中氧化锌纳米棒既具有高的表面能和良好的生物相容性，又有良好的电学和光学特小生,其应用备受

24、瞩目47 0 Z hang等48用气相沉积法制备了氧化锌纳米棒，并在其上直接固定尿酸氧化酶，构成了新型 无电子媒介体的传感器，具有独特的热力学稳定性。接电子转移一直是生物传感器领域一项重要的基础研究工作。Willner等利用共价结合在金电极上的叱咯唾咻苯酿（PQQ单分子层制备了酶电极，PQ Q作为分子导线在酶的活性 中心和金电极之间传递电子。这可认为是纳米线传感器的早期形式之一。Rakitin等50的研究发现锌、锲、钻等离子能够进入 D N A双螺旋的中心，在一定条件下可 以稳定D NA含有金属离子的状态，获得了导电的D NA电线。此类金属化的D N A仍然保持选择性结合其他分子的能力，利用该

25、特点，可以开发各种遗传畸变探测生 物传感器。Yi等51利用硼掺杂硅纳米线（SiN Ws ,制作了一种基于电流测量的小型、快速、灵敏度高的实时检测生物和化学牛品的传感器。Curreli等52利用In 2O 3纳米线构造了一种可对靶点 D N A检测的生物传感器。Hahm等 53利用p型Si纳米线制备了可对D N A进行检测的电化学D NA传感器,该传感 器检测限可达到10f M。Sabahudin等54通过电化学刻蚀和电化学共沉淀固定化酶，制备了单根纳米柏 丝生物传感器，在对葡萄糖含量的检测中背景电流低于110-12A,响应时间仅为2s,检测下限达到20L M。此种传感器可用于监测单个细胞内的生

26、物 物质（如肾上腺素、复合胺等，可用于单细胞行为研究和生理学研究。由于纳米线 材料的广泛应用前景，相关研究工作还在不断推进之中55。21313碳纳米材料生物传感器碳纳米管（C N T所表现出的许多优良白物理性能使得对CN T修饰材料的研究成为目前电化学生物传感器领域备受关注的前沿课题之一15,56。但是，CNT是由成千上万处于芳香不定域系统中的碳原子组成的大分子，几乎不溶于任何溶剂，而且在溶液中容易聚集成束，这就限制了对其化学性质方面的研究， 也难于将它纳入生物体系，大大限制了 CNT在各方面的应用。许多研究工作就是 从改进碳管的溶解性开始的。把碳纳米管分散于 Nafion 壳聚糖等高聚物的溶

27、液 中修饰玻碳电极制备的生物传感器，可大大提高了传感器的响应灵敏度和抗干扰能 力。Wang等57首先把碳纳米管分散到Nafion溶液中，制备了抗干扰能力突出的电流型生物传感器。Hrapovic 等58把碳纳米管分散到Nafion溶液中，与直径为2 3nm的柏纳米颗粒复合之后修饰 玻碳电极，制备了电化学葡萄糖传感器。这种 G C P C NT P Pt nano P G O x传感器 对葡萄糖具有很高的响应速度和灵 5#213#第1期杨海朋等 纳米电化学生物传感器响应关系，灵敏度高达2111L A #m M -1,检测极限可达015L M。 Z hang等59把碳纳米管分散到壳聚糖溶液中，得到了

28、一个具有良好生物相容性的制备生物 传感器的平台。Liu等60在壳聚糖2碳纳米管体系中固定葡萄糖氧化酶，观察到了酶和电极之间直接电 子转移的证据，得到了具有良好性能的葡萄糖传感器。张凌燕等61利用层层组装技术，将多壁碳纳米管P辣根过氧化物酶P纳米金固定在玻碳电 极表面，制得了灵敏度高、稳定性好的过氧化氢生物传感器。段大雪等62借助碳纳米管以及柏纳米颗粒制备了检测葡萄糖的生物传感器，该传感器稳定 性好、响应速度快。Zeng 等用多氨基枝状化合物修饰多壁碳纳米管，制备了高效的葡萄糖生物传感器。该课题组还把亚铁氟化钻与碳纳米管 和壳聚糖组装起来，利用碳纳米管极佳的电子转移能力，大大提高了亚铁氟化钻的氧

29、 化还原活性，制备的葡萄糖生物传感器可以在-012V电压下工作，避免了溶液中电活 性物质的干扰o M anesh等采用静电纺丝的方法，把包裹了多壁碳纳米管的聚阳离子电解质（PD D A和聚甲基丙烯酸甲酯制成纳米 纤维膜,在膜上固定葡萄糖氧化酶得到了一种新型的葡萄糖传感器，具有很宽的线性范围和良好的选择性、稳定性及重复使用性能。本课题组把碳纳米管分散到B 2环糊精聚合物中，也得到了稳定的葡萄糖生物传感器。纳米碳纤维具有和碳纳米管相似的机械强度和电学性能，也被广泛用于电化学生物传感器的制备。Huang等66利用静电纺丝技术和热处理过程把钳纳米颗粒负载到碳纳米纤维上。该复合体 系经由电化学阻抗谱和循

30、环伏安法证实具有很高的导电能力，并大大加快了电子转移速率，所制备的过氧化氢传感器在-012V工作电压下检测极限低至012L M。 21314纳米阵列生物传感器M iao 等67利用化学和电化学方法使叱咯单体在模板孔隙中生长，得到了与模板相应结构的聚叱咯微管。这种微管具有较大的比表面积，能容纳大量的酶分子，并减少反应物和 产物的扩散障碍，有效地提高了酶电极的性能。Yang等利用电沉积的方法在聚碳酸酯模板上制备了柏纳米阵列，柏纳米电极密度为5108cm -2,所制备的葡萄糖传感器线性范围非常宽。Chang等利用氧化铝模板制备了导电聚苯胺纳米管阵列，并把低聚核甘酸探针共价结合到管上，得到了具有极高

31、灵敏度的电化学D NA与上述阵列间距可控程度较差的纳米阵列传感器不同,Lin等70 72在镀铭的硅衬底上电沉积纳米锲粒子,用等离子体增强化学气相沉积技术在锲纳米粒子上生长出了低密度碳纳米管阵列(电极密度低至106c m -2。该阵列的突出优点在于碳纳米管之间的距离可以在很宽的范围内调节，间距可以达到5L m,远远大于碳管的直径，从而得到在实际测试中仍然保持微电极特性 的纳米电极阵列。在此基础上制备的低密度碳纳米管阵列葡萄糖传感器，显示了很高的选择性和灵敏度。但是这种间距在大范围内可控的纳米阵列制备过程较为复杂 至今尚未见到其他有关低密度纳米阵列传感器的报道。21315片状、层状纳米材料生物传感

32、器层状纳米材料被认为是周载生物分子最有潜力的材料之一73o以层状材料为载体周载多种蛋白质已经被广泛地应用于生物电化学和生物催化等领域74。Shan等75使用层状双氢氧化物黏土 (L D H固载蛋白质构建了生物传感器，实验结果表明 这类传感器具有很好的电催化性能，如高灵敏度和低米氏常数等。Z hang等76使用二氧化钛纳米片和HRP分子组装而成的生物传感器对过氧化氢表现出很 好的催化性能，具检测限低、检测范围宽。Xiao等77利用二氧化钮纳米片固定 HRP制备了酶传感器，对过氧化氢的检测极限低至0121LM 。3结束语纳米技术的介入为生物传感器的发展提供了丰富的素材，纳米电化学生物传感 器在十多

33、年发展中已经显示出了优异的性能，具有巨大的生命力。纳米电化学生物 传感器具有选择性好、灵敏度高及适于联机化的优点，并具有电分析化学不破坏测试体系、不受颜色影响和操作简便的优势。可以预料 ，纳米电化学生物传感器将在 疾病诊断、环境污染物在线监测、食品安全和卫生保健等诸多方面发挥重要作用。 纳米电化学生物传感器的发展需要不同学科背景的研究者通过相互交流来达到不断 创新，最终发展出技术上能规模化生产、成本优势大、集检测和分析等多种功能于 一体的实用高效生物传感器。参考文献1董绍俊（Dong S J，车广礼（CheG L ,谢远武（Xie Y W.化学修饰电极（修订版（C hem ical Modif

34、ied Electrode, Revised Edition，北京:科学 出版社（B eiji ng:Science Press , 2003, 501 538（J , （S 析#214#化学进展第21卷第1期杨海朋等 纳米电化学生物传感器28 29 30 31 # 215 # Journal of Analyt ical Chemistry ,1994, 22: 1065 1072 3 4何星月（He X Y,刘之景（Liu Z J . 物理（Physics , 2003, 32: 249 25漪旭（Chen X .中国科学院长春应用化学研究所博 士学位论 文（Doctoral Disser

35、tation of Changchun Institut e of Applied Chemistry, Chinese Academy of Sciences , 2002 5 6 7王丽红（Wang L H ,张林（Zhang L , 陈欢林（Chen H L .化学进展（Progress in Chemistry , 2006, 18: 440 452长炯（Zhang J ,万莹（Wan Y ,王丽华（Wang L H 等.化学 进展（Progress in Chemistry , 2007, 19: 1576 1584金利通（Jin L T ,鲜跃仲（Xian Y Z ,张芬芬（Zha

36、ng F F .华东师范大学 学报（自然科学版（Journal of East China Normal University（Natural Science , 2005, 5P6: 13 24 8 9 10 11 12 13 14吴子刚（Wu Z G ,林鸿波（Lin H B ,封 伟（Feng W .化学进 展（Progress in Chemistry , 2006, 18: 1200 1207 Davis J, Vaughan D H, Cardosi M F. Enzyme Microb. Tech. , 1995, 17: 1030 1035 Tess M E, Cox J A.

37、 J. Pharm. Bio med. Anal. , 1999, 19: 55 68 Li J, Tan S N, Ge H. Anal. Chim. Acta, 1996, 335: 137 145缪煜清（Liao Y Q ,刘仲明（Liu Z M ,官建国（Guan J G .传 感器技术 （Journal of Transducer Technology , 2002, 21: 61 64# 芳琼（Tang F Q，孟宪伟（Meng X W ,陈东（Chen D 等.中国科学 B （ Science in China B , 2000, 30: 119 124张玲 （Zhang L .

38、中国科 学技 术大 学博士 学位 论文（D octoral Dissertat ion of The University of Science and Technology of China , 2007 15麦智彬（Mai Z B，谭学才 （Tan X C，邹小勇（Zou X Y .分析测试学报（Journal of Instrumental Analysis , 2006, 25: 120 125 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 Zeng Y L, Huang Y F, Shen G L, et al. Electrochem. Commun. ,

39、 2007, 185 190 Manesh K M, Kim H T, Santhosh P, et al . Biosens . Bioelectron. , 2008, 23: 771 779 Chandrashekar T K, Willgen H V, Ebersole M H. J. Phys. Chem. , 1984, 19: 4326 4332 Zhao J, Henkens R W, Stonehuerner J, et al . J. Electroanal. Chem. , 1992, 327: 109 119 志贤（Liu Z X , 陈钢进（Chen G J，周永洽（

40、Zhou Y Q 等.化学试剂（Chemical Reagent s , 1996, 18: 260 262 Xiao Y, Ju H, Chen H. Anal. Chim. Acta, 1999, 391: 73 77 Jia J, Wang B, Wu A, et al. Anal. Chem. , 2002, 74: 2217 2223 Chen Z, Ou X, Tang F, et al. Colloid Surface B, 1996, 7: 173 179 Li Q W, Luo G A, Feng J, et al. Electroanal. , 2001, 13: 413

41、416 Qhobosheane M, Santra S, Zhang P, et al . Analyst , 2001, 126: 1274 1278 Hilliard L, Zhao X, Tan W. Anal . Chim. Acta, 2002, 470: 51 56 Luo X, X J, Chen H, et al . Sensor Actuat . B, 2004, 97: 249 u 255 Zhang F F, Wan Q, Jin L T, et al. J. Electroanal. Chem., 2004, 571: 133 138 Jena B K, Raj C R

42、. Anal. Chem. , 2006, 78: 6332 6339 Neufeld T, Biran D, Popovtzer R , et al . Anal. Chem. 2006, 78: 4952 495嵌完全（Hou X Q ,任湘 菱（Ren X L ,唐芳琼（Tang F Q 等.分析 化学（Chinese Journal of Analyt ical Chemistry , 2006, 34: 303 306 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 Zhao

43、Z X, Qiao M Q, Yin F, et al . Biosens. Bioel ectron. , 2007, 22: 3021 3027 Jena B K, Raj C R. Electroanal. , 2007, 19: 816 822 Huang Y X, Zhang W J, Xiao H, et al. Biosens.Bioelectron. , 2005, 21: 817 821 Bai Y, Yang H, Yang W W, et al. Sensor Actuat. B: Chem. , 2007, 124: 179 186 Chandra D, Jena B

44、K, Raj C R, et al. Chem. Mater. , 2007, 19: 6290 6296 Yang H P, Zhu Y F. Anal. Chim. Acta, 2005, 554: 92 97 Yang H P, Zhu Y F. Talanta, 2006, 68: 569 574 Yang H P, Zhu Y F. Biosens. Bioelectron. , 2007, 22: 2989 2993谢海燕（Xie H Y ,陈薛钗（Chen X C,邓玉 林（Deng Y L .化学进展（Progress in Chemistry , 2007, 19: 1026

45、 1033郑静（Zheng J，何品刚（He P G ,方禹之（Fang Y Z 等.中 国科学 B （ Science in China B , 2006, 36: 485 492 Liu Q, Lu X B, Li J, et al. Biosens. Bioelectron. , 2007, 22: 3203 3209 Jie G F, Zhu J J, Chen H Y, et al. Anal. Chem. , 2007, 79: 5574 5581 Jie G F, Zhang J J, Zhu J J, et al . Anal. Chem. , 2008, 80: 4033 4

46、039 Varshney M, Li Y B. Biosens. Bioelectron. , 2007, 22: 2408 2414 Lu Y C, Chuang Y S, Yew T R, et al. Biosens. Bioelectron. , 2008, 23: 1856 1861 Liu B, Zeng H C. J. Am. Chem. Soc. , 2003, 125: 4430 4431 Zhang F F, Wang X L, Jin L T. Anal. Chim. Acta, 2004, 519: 155 160 Willner I, Heleg 2Shabtai V

47、, Blonder R, et al. J . Am. Chem. Soc. , 1996, 118: 10321 10322 Rakit in A, Aich P, Papadopoulos C, et al. Phys. R ev. Lett . , 2001,86: 3459 3694 Yi C, Wei Q Q, Park H K, et al. Science, 2001,293: 1289 1292 Curreli M, Li C, Sun Y H, et al. J. Am. Chem. Soc. , 2005, 127: 6922 6923 Hahm J I, Lieber C M. Nano Lett . , 2004, 4: 51 54 Hrapovic S, Luong J H T. Anal. Chem. , 2003, 75: 3308 3315 Kawashima T, Mizutani T, Nakagawa T, et al. Nano Lett. , 2008, 8: 362 368