菊花组织培养经典

1、关于菊花的组织培养经典第一张，PPT共四十五页，创作于2022年6月第二张，PPT共四十五页，创作于2022年6月菊花的组织培养第三张，PPT共四十五页，创作于2022年6月有丝分裂受精卵细胞分化 在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。1、细胞分化的概念知识回顾（一）第四张，PPT共四十五页，创作于2022年6月 黑色素细胞在体外培养30多代后仍能合成黑色素；离体培养的上皮细胞，始终保持为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。 2、稳定性3、不可逆性细胞分化发生在整个生命进程中。1、持久性2、细胞分化的特点 造血干细胞 原红细胞 早幼红细胞

2、中幼红细胞 晚幼红细胞 成熟红细胞 死亡4、普遍性第五张，PPT共四十五页，创作于2022年6月 细胞分化是否意味着细胞中遗传物质的改变？ 遗传物质没有改变，不同组织的细胞共同来源于受精卵，经有丝分裂产生。第六张，PPT共四十五页，创作于2022年6月3、细胞分化的实质ABDCEEDCABEDCABEDCABEDCAB基因在个体发育过程中，不同细胞中遗传信息的执行情况不同即基因的选择性表达的过程第七张，PPT共四十五页，创作于2022年6月 红细胞合成血红蛋白 (不合成肌动蛋白)肌细胞肌动蛋白基因开启合成肌动蛋白 (不合成血红蛋白)肌动蛋白基因关闭血红蛋白基因关闭血红蛋白基因开启试一试:现在你

3、能解释这些现象了吗?4、细胞分化的结果细胞产生了不同种类的蛋白质即出现了不同的结构和功能第八张，PPT共四十五页，创作于2022年6月愈伤组织胚状体1958，美国，斯图尔德 植物组织培养离体回顾知识（二）第九张，PPT共四十五页，创作于2022年6月（一）、植物组织培养概念关键词： 外植体、脱分化、再分化、愈伤组织 在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其脱分化产生愈伤组织再分化形成丛芽，最终形成完整的植株。又称：植物离体培养第十张，PPT共四十五页，创作于2022年6月脱分化（或去分化）：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织

4、的过程。再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。愈伤组织：细胞排列疏松、无规则、高度 液泡化的无定形的薄壁细胞。第十一张，PPT共四十五页，创作于2022年6月切取形成层无菌接种诱导愈伤组织的形成试管苗的形成培养室移栽脱分化再分化（二）、植物组织培养的基本过程第十二张，PPT共四十五页，创作于2022年6月植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素生长素愈伤组织芽根细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素细胞分裂素有利于根的分化有利于芽的分化，抑制根的分化促进愈伤组织生长第二十三张，PPT共四十

5、五页，创作于2022年6月思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？生长素/细胞分裂素高 利于根的形成适中 利于愈伤组织的形成第二十四张，PPT共四十五页，创作于2022年6月供参考的配方1、诱导菊花愈伤组织：在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度均为0.5mg、诱导菊花从芽：在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度分别为2-3mg和0.020.03mg3、诱导菊花生根：在MS培养基各成分用量减半，并添加入NAA或IAA，质量浓度均为0.1mg第二十五张，PPT共四十五页，创作于2022年6月(4)、pH、温度、光照（菊花组织培养为例） pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h第二十

6、六张，PPT共四十五页，创作于2022年6月制备MS固体培养基外植体消毒 接种 培 养栽 培四、实验操作 移 栽冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗至少三次之上配制各种母液配制培养基灭菌第二十七张，PPT共四十五页，创作于2022年6月（一）制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4保存配制好的培养基母液来制备1、配制各种母液无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量第二十八张，PPT共四十五页，创作于2022年6月2、配

7、制培养基分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 配制培养液 调PH培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌第二十九张，PPT共四十五页，创作于2022年6月1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝（二）外植体消毒2、消毒流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右 酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70的酒精中摇动23次，持续67s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗 消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1的氯化汞

8、溶液中12min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液第三十张，PPT共四十五页，创作于2022年6月（三）接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种第三十一张，PPT共四十五页，创作于2022年6月第三十二张，PPT共四十五页，创作于2022年6月4、接种注意事项每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为70的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后

9、再接种外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜34块，菊的茎或叶68块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分第三十三张，PPT共四十五页，创作于2022年6月正常苗污染苗第三十四张，PPT共四十五页，创作于2022年6月1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁污染途径第三十五张，PPT共四十五页，创作于2022年6月思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培

10、养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。第三十六张，PPT共四十五页，创作于2022年6月（四）培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒培养温度控制在18-22每日用日光灯光照12h第三十七张，PPT共四十五页，创作于2022年6月（五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日1、打开封口膜2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间3、移栽幼苗长壮后，移栽到土壤中第三十八张，PPT共四十五页，创作于2022年6月固体基质型，含水量高、蓄水性强、透

11、性好，适合栽培珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的结构，所以被命名为珍珠岩 。蛭石是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。 第三十九张，PPT共四十五页，创作于2022年6月（六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花第四十张，PPT共四十五页，创作于2022年6月1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？第四十一张，PPT共四十五页，创作于2022年6月结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格第四十二张，PPT共四十五页，创作于2022年6月五、课题延伸1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季第四十三张，PPT共四十五页，创作于2022年6月练习1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于