维生素E对水产动物免疫功能的影响

1、维生素E对水产动物免疫功能的影响维生素E（Vitamin E）又名生育酚，在水产养殖中应用较为广泛，是对水产动物免疫功能影响较大的维生素之一。VE在清除自由基、维护生物膜结构、抗氧化和增强机体免疫力方面发挥着巨大的作用，人们称其为体内营养防御剂。近年来，维生素E对水产动物免疫功能影响的研究已成为了水产动物营养免疫学研究的热点问题之一，并在适宜添加量、对水产动物细胞和体液免疫的影响、与水产动物抗病力的关系、与维生素C的协作关系及免疫作用机理等方面，取得了一些重要的研究进展。1维生素E对水产动物细胞免疫反应的影响Wise等（1993）1以不同剂量的VE饲喂斑点叉尾鮰，结果表明，试验鱼白细胞的吞噬指

2、数上升，呼吸代谢爆发能力增强。Pulsford等（1995）2报道，补充VE可使比目鱼的吞噬细胞活性提高。Clerton等（2001）3研究发现，改变VE的饲料添加量可调节虹鳟肠道白细胞的吞噬功能，饲料中添加VE对肠道局部免疫反应的影响比对全身免疫反应的影响大。蔡中华等（2001）4用VE处理鲤鱼，发现VE可使鲤鱼白细胞的吞噬能力显著增强（表现在吞噬指数明显上升）。Lee等（2004）5在饲料中添加不同剂量的VE饲喂斑节对虾稚虾，8周后发现，75、100mg/kg的VE饲料组的斑节对虾的血细胞总数（THC）显著高于50mg/kg以下的VE饲料组的斑节对虾。2 维生素E对水产动物体液免疫因子的影

3、响研究发现，在饲料中添加300mg/kg的VE能显著提高尖吻鲈的补体活性6，600mg/kg的VE对金头鲷血清的补体活性及头肾吞噬细胞的活性没有影响7，但1 200mg/kg的VE却能明显促进之8。Montero等（1998）9报道，当饲料VE添加量为600mg/kg时，不能提高虹鳟的补体活性，当添加量提高到1 200mg/kg时，补体活性才显著提高。蔡中华等（2001）4用VE处理鲤鱼，对鲤鱼体内的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及氧化代谢产物丙二醛（MDA）进行了测定，结果表明，VE不仅本身具有抗氧化能力，还可诱导鲤鱼显著增加SOD的产生能力，实验组较对照组肝脏、脾脏SOD含

4、量显著增加，氧化代谢产物MAD的量显著降低。周显青等（2003）10报道了VE对中华鳖幼鳖血清补体C3和C4的影响及补体在酸应激下的变化。在6组幼鳖的饵料中添加不同剂量的VE，喂食4周后，每组取半数幼鳖经酸应激处理24h。然后取幼鳖血清，用透射比浊法测定血清补体C3和C4的含量。结果表明，经过或未经酸处理的、添加250、500和1 000mg/kg的VE实验组幼鳖血清补体C3的含量均明显高于对照组（饲料中未添加VE），添加50和250mg/kg的VE实验组鳖的C4含量也明显高于对照组；经酸应激的幼鳖与未经酸应激的比较，对照组和添加50mg/kg的VE实验组鳖的C3和C4的含量显著下降，其余4组

5、没有变化。综上所述，VE在一定剂量范围内能促进血清补体C3和C4的合成，酸应激能导致其下降；而高剂量的VE对酸应激导致的不利影响有拮抗作用。Dandapat等（2000）11报道，在罗氏沼虾饲料中添加VE（每千克饲料中添加200、400、600mg），能降低罗氏沼虾鳃和肝胰腺中的脂类过氧化反应（LPX）水平，调节抗氧化防御系统，但这种调节作用具有较强的组织特异性。Lee等（2004）5报道，用含50200mg/kg VE的饲料投喂斑节对虾，其SOD活性显著高于投喂含25mg/kg以下和400mg/kg的VE饲料的斑节对虾的SOD活性。3 维生素E与水产动物抗病力的关系研究表明，当饲料中缺乏VE

6、时，水产动物的抗病能力显著降低。Hardie等（1990）12指出，用杀鲑气单胞菌（A. salmonicida）攻毒时，缺乏VE的饲料组的大西洋鲑的死亡率显著高于商品饲料组和VE含量高的饲料组。同样，当用鲁克氏耶尔森氏菌（Yersinia ruckeri）攻毒时，食用VE含量低的饲料的虹鳟死亡率显著高于VE含量高的饲料组13。有关VE对水产动物寄生虫病和病毒病抵抗力影响的研究还未见报道。4 维生素E在水产饲料中的添加量及与维生素C的协作关系Ortuno等（2000）7的研究表明，与1 200mg/kg的VE添加量相比，当饲料中VE的添加量为1 800mg/kg 时，并不能提高金头鲷头肾白细胞

7、的吞噬和迁移活性，这与Montero等（1998）9在体外得到的实验结果相一致：当VE的浓度为1或10g/ml时，并不能对金头鲷白细胞的吞噬活性产生影响，而当VE的浓度为0.01或0.1g/ml时，却能显著影响其活性。可见，维生素E的添加并不是越多越好，而是存在一个适宜的添加剂量。而且，水产动物对VE的需要量随水产动物的种类、年龄、大小，水质条件，应激因素及饲料中其它营养物质等的不同而不同。因此，有关水产动物对VE的需要量还要做大量的研究工作。VC和VE分别作为水溶性和脂溶性抗氧化剂，具有共同保护脂肪、蛋白质和生物膜不被氧化损坏，从而维持细胞结构和功能完整性的作用。VC的主要作用是净化和消除水

8、相中的氧自由基及其各种氧化产物，VE则在膜相中起同样作用。因此，注意VC和VE的适宜添加比例，才能有效地刺激水产动物的免疫系统，从而提高免疫反应的水平。Wahli等（1998）14发现，当饲料中VC和VE的含量都高时，可显著地刺激刀豆素A诱导的外周血淋巴细胞的增生和巨噬细胞的呼吸爆发；当VC和VE都处于最适需要量时，大鳞大麻哈鱼的成活率提高，该作用还会随其中任何一种含量的提高而提高。然而，当两种维生素都达到或超过试验的最高剂量时，鱼体对病原菌的抵抗力却没有继续提高。在病毒和多子小瓜虫的感染实验中，当VC和VE的含量都最高（VC/VE=3 000/800）或至少其中一种处于最高含量时，鱼的成活率

9、较高，但无显著差异。Ortuno等（1999）15推测，只有VC和VE的含量适宜、比例恰当时，才能保护鱼类的补体因子不被氧化。周显青等（2004）16报道，VC和VE混合饲喂中华鳖幼鳖，对酸应激后中华鳖血细胞的吞噬率、血清溶菌活力、杀菌活力和补体C3含量有显著协同促进作用，对血清补体C4的合成则无协同作用。说明VC和VE混合饲喂能显著增强中华鳖抗酸应激能力。周显青等的试验还表明，按2 500mg/kg的VC和250mg/kg的VE混合添加，中华鳖的抗应激能力最强。5 维生素E影响水产动物免疫的机制目前，关于VE对水产动物免疫功能的影响机制，尚无专门的研究报道，在此介绍VE影响机体免疫的一般机理

10、。首先，VE通过抗氧化作用来影响机体的免疫功能。VE是血液和组织中的脂溶性链式阻断抗氧化剂，通过与来源于生物膜磷脂或脂蛋白中不饱和脂肪酸产生的过氧化自由基反应，形成稳定的脂质脱氢过氧化物，显著降低有害的脂质自由基的数量，从而维持生物膜的正常流动性，使免疫细胞能够发挥正常的生理功能。因此，饲料中添加VE能使水产动物的吞噬细胞获得保护，从而增强吞噬细胞对微生物等异物的吞噬和清除能力。其次，VE通过调节前列腺素（PG）的生物合成，达到调节机体免疫水平的作用。各种免疫细胞均可代谢产生PG，而PG（尤其是PGE2）对免疫的影响较大，它们主要是通过抑制B细胞产生抗体来抑制体液免疫，抑制T细胞增殖，转化和产

11、生多种细胞因子来抑制细胞免疫，还能抑制白细胞和巨噬细胞的吞噬功能。在炎症反应中，PG与白三烯一起增强趋化作用。PG是在细胞膜上，在合成酶系的作用下由花生四烯酸形成的。VE主要是通过调节花生四烯酸的水平来调节PG。脂肪在磷脂酶A2的作用下分解释放出花生四烯酸，进而合成PG。在PG合成中会产生自由基，自由基反过来促进PG的合成。VE能有效地抑制磷脂酶A2的活性，从而降低PG的合成水平；VE与其它物质还能通过调节环加氧酶来控制PG的合成。花生四烯酸合成PG的酶中有一种环加氧酶，该酶受VE和氢过氧化物等联合控制。在PG级联中脂质过氧化作用与PG代谢有一种密切关系，即有效的抗氧化剂保护作用会使PG合成速度变慢。VE很可能通过与酶、氢过氧化物一起作用于环加氧酶来改变PGE2的合成速度，从而达到调节免疫水平的作用；VE在降低花生四烯酸水平的同时也降低了白三烯的水平，使白三烯与PG参与炎症反应的速度降低。此外，VE通过降低对免疫有抑制作用的肾上腺皮质激素的浓度来调节免疫，也