一、细菌的形态与结构观察

1、 第一次实验 细菌的形态和结构观察介绍实验室有关的内容实验内容实验小结 228963378/25/20221学习要求1、初步了解病原生物学和免疫学实验 技术的概念和内容；2、熟悉病原生物学实验室的注意事项；3、掌握显微镜的使用和保护方法；4、掌握细菌的基本形态和特殊结构；5、掌握细菌的革兰染色法；6、了解细菌的运动特点。8/25/20222介绍实验室有关的内容 1、总论 微生物实验 寄生虫实验 免疫学技术 2、实验室注意事项 评分标准 清洁卫生 操作规程 显微镜管理等8/25/20223实验内容1、显微镜使用和保护 （录像）2、细菌的镜下形态观察（学生操作）3、细菌的特殊结构（学生操作）4、革

2、兰染色（学生操作）5、细菌的动力观察 录像（教师示教） 8/25/202248/25/20225实验小结1、显微镜油镜的使用和保护 2、细菌的基本形态 球菌 杆菌 螺形菌 3、细菌的特殊结构 荚膜 鞭毛 芽胞 菌毛4、细菌的革兰染色法5、注意事项：评分、卫生、操作、管理。8/25/20226end8/25/20227细菌的基本形态观察(发片)1、球菌镜下形态： 葡萄球菌链球菌 肺炎链球菌脑炎奈瑟菌2、杆菌镜下形态： 大肠埃希菌破伤风梭菌 产气荚膜梭菌变形杆菌3、螺形菌革兰染色片： 霍乱弧菌或水弧菌 8/25/20228细菌的特殊结构(示教片)1肺炎球菌荚膜染色 示教片（示荚膜）2变形杆菌鞭毛染

3、色 示教片（示鞭毛）3破伤风梭菌芽胞染色或革兰染色 示教片（示芽胞）8/25/20229 细菌的革兰染色 革兰染色法是细菌检验中最常用的一种染色法。利用革兰染色法，可将细菌分为两大类，有助于鉴别细菌和选择用药等。 1、革兰染色法原理 2、革兰染色法操作步骤 3、革兰染色结果 通过革兰染色可以观察到什么？ 细菌的形态、排列、 荚膜、芽胞8/25/202210革兰阴性菌因其细胞壁中肽聚糖含量少，结构疏松，脂类物质含量高而被酒精脱色，经复染呈红色。 革兰染色原理：革兰阳性菌因细胞壁中含有大量的肽聚糖和磷壁酸，且结构致密，可保留结晶紫与碘的复合物，并不被酒精脱色而显示为紫蓝色。8/25/202211

4、革兰染色方法(录像） 涂片自然干燥火焰固定染色染色过程： 已固定的涂片加结晶紫 1分钟，水冲洗滴加碘液1分钟，水冲洗95%酒精 2030秒稀释石炭酸复红1分钟，水冲洗待干镜检初染媒染脱色复染一般用室温干燥，注意必须完全干燥后方可固定。涂片在酒精灯火焰上快速通过 34次以固定细菌，并使其不易从玻片上脱落。注意不要将涂片直接放在火焰上烤，以免破坏细菌结构。 8/25/202212 用灭菌的接种环取无菌生理盐水1-2环，置于玻片中。接种环灭菌，待接种环冷却后，挑取适量培养物混合于盐水中，涂抹均匀使成一层薄膜（若检材是液体则不必加生理盐水）薄膜涂抹的面积约1.52.0 cm 。按上法制备大肠杆菌涂膜。

5、 8/25/2022138/25/202214葡萄球菌（革兰染色）8/25/202215 葡萄球菌（革兰染色）8/25/202216葡萄球菌电镜照片8/25/202217链球菌（革兰染色）8/25/202218链球菌（革兰染色）8/25/202219链球菌电镜照片8/25/202220奈瑟菌（革兰染色）8/25/202221双球菌（革兰染色）8/25/202222双球菌电镜照片8/25/202223大肠埃希菌（革兰染色）8/25/202224大肠埃希菌（革兰染色）8/25/202225大肠埃希菌电镜照片8/25/202226霍乱弧菌（革兰染色）霍乱弧菌电镜照片8/25/202227荚膜 荚膜8

6、/25/202228荚膜8/25/202229荚膜8/25/202230变形杆菌鞭毛染色（示鞭毛） 8/25/202231变形杆菌鞭毛电镜照片 （示鞭毛） 8/25/202232破伤风梭菌（示芽胞）革兰染色和芽胞染色8/25/202233破伤风梭菌芽胞染色（示芽胞） 8/25/202234破伤风梭菌革兰染色（示芽胞） 8/25/202235破伤风梭菌芽胞电镜照片（示芽胞） 8/25/202236产气荚膜梭菌革兰染色（示荚膜）8/25/2022378/25/2022388/25/2022398/25/2022408/25/202241霍乱弧菌（革兰染色）霍乱弧菌电镜照片8/25/2022428/

7、25/2022438/25/2022448/25/2022451、实验时不迟到、不早退。2、实验时要保持实验室内的整洁、安静。3、正确使用显微镜，观察完毕应把镜头和载玻片上的镜油擦净。 4、各实验小组的实验用品、由各组保管使用，不得随意与他组调换或挪用。如需补发或增添，应说明原因。5、每次实验后应清点实验器材、用品数量，如有遗失或损坏应按规定赔偿。动物及标本要按规定处理，不可擅自拿走。6、实验结束后，各组应自觉清理实验器材，值日生做好全室清洁工作，关好门窗、水电，经指导教师检查合格后方可离开实验室。 1、要按时完成实验报告。2、实验报告要保证准确、工整、美观。3、实验课结束要将实验报告交病原生物学实验室评分存档。 1、操作考核。2、大体标本考核。3、镜下标本考核。 病原生物学与