2022医学课件大肠菌群检验重点

1、大肠菌群检测第一页，共二十四页。检验程序检 样25g(mL)样品+225mL稀释液，均质10倍系列稀释选择适宜3个连续稀释度的样品匀液，接种至月桂基硫酸盐胰蛋白胨LST肉汤管不产气产气煌绿乳糖胆盐BGLB)肉汤不产气产气大肠菌群阴性大肠菌群阳性查MPN表报告结果36148h2h36148h2h检样初发酵复发酵报告第二页，共二十四页。检 样固体样品：在电子天平上称取25g + 225mL0.85%灭菌生理 盐水液体样品：直接取用固体样品存放罐第三页，共二十四页。固体样品称量用镊子取酒精棉擦手，点燃酒精灯；翻开稀释瓶盖，放在天平上，等显示屏上的数字稳定后，按“去皮键，当显示屏上的数字显示为“0时，

2、可开始称量。去皮键第四页，共二十四页。初 发 酵取带上试管架：单料管9支装有0.85%灭菌生理盐水的生理盐水灌1个装有9mL 0.85%灭菌生理盐水的试管3支第五页，共二十四页。操 作 步 骤1. 用酒精棉消毒操作台第六页，共二十四页。操 作 步 骤2. 用酒精棉消毒双手第七页，共二十四页。 操 作 步 骤3. 点燃酒精灯第八页，共二十四页。操 作 步 骤4. 为装有培养基的试管编号第九页，共二十四页。为试管编号编号原那么：固体样品：1、0.1、0.01表示参加的固体样品为1g、0.1g、0.01g液体样品：10、1、0.1表示参加的液体样品为10mL、1mL、0.1mL双 料单 料1110.

3、10.10.10.010.010.011010101110.10.10.1第十页，共二十四页。用量筒量取225mL0.85%灭菌生理盐水至稀释瓶中。注意：稀释瓶、带塞锥形瓶开盖前要过火，量筒、装有0.85%灭菌生理盐水的锥形瓶及其塞子应放在酒精灯周围15cm的范围内固体样品称量后处理第十一页，共二十四页。液 体样 品液体样品：直接吸取1mL样液至单料管中1110.10.10.11mL1mL1mL注意： 加样液后不能振摇试管。第十二页，共二十四页。液体样品：吸取25mL液体样品至稀释瓶中，参加225mL0.85%灭菌生理盐水，盖上盖子，混匀；从稀释瓶中分别吸取1mL被稀释10倍的饮用水至最后三支

4、单料管中。液 体样 品0.10.10.125mL1mL1mL1mL注意： 加样液后不能振摇试管。第十三页，共二十四页。固体样品：从稀释瓶中吸取1mL样液至装有9mL0.85%灭菌生理盐水的试管中，盖上盖子，混匀；从该试管中分别吸取1mL样液至最后三支单料管中。0.010.010.011mL1mL1mL1mL注意：将样液参加装有稀释液的试管后，振摇试管，混匀。样液参加培养基后不能振摇试管。第十四页，共二十四页。观察初发酵结果取回初发酵结果，观察。确定有几支初发酵管内的小倒管中有气泡产生。第十五页，共二十四页。根据对初发酵结果的观察，有几支小倒管中有气泡，那么取几支煌绿乳糖胆盐复发酵管。内有小倒管

5、复 发 酵第十六页，共二十四页。在有气泡的初发酵管后的相应位置放上复发酵管 用接种环移取有气泡初发酵管中液体一环至相对应的复发酵管中。注意接种环的灼烧、冷却第十七页，共二十四页。将接种好的初发酵管和复发酵管放入恒温培养箱。注意选择设置为361的培养箱。361 48h 2h 第十八页，共二十四页。观察复发酵结果，小倒管内有气泡为阳性+，无气泡为阴性-。+-+-+-注：初发酵管产气，复发酵结果可能产气，也可能不产气。第十九页，共二十四页。查MPN表 1 1 1 11第二十页，共二十四页。检验结果记录检样量初发酵结果（管）复发酵结果（管）阳性管数10mL1g（或mL）+-+-10.1g（或mL）+-

6、+-10.01g （或mL）-+-+-10.001g （或mL）培养条件温度： 时间：温度： 时间：检验结果 MPN/g = 1.1备注标准值： 单项检验结论：符合（不符合） 检验人： 检验日期：固体样品第二十一页，共二十四页。检验结果记录检样量初发酵结果（管）复发酵结果（管）阳性管数10mL+-+-11g（或mL）+-+-10.1g（或mL）-+-+-10.01g （或mL）0.001g （或mL）培养条件温度： 时间：温度： 时间：检验结果 MPN/mL = 0.11备注标准值： 单项检验结论：符合（不符合） 检验人： 检验日期：液体样品第二十二页，共二十四页。小 结本次检验操作共取： 双料管3支，单料管6支，装有灭菌生理盐水的锥形瓶1个，装有9mL灭菌生理盐水的试管1支固体样品，复发酵管假设干支根据初发酵结果本次检验操作共用： 固体样品：10mL吸量管1支，1mL吸量管2支，接种环 液体样品：25mL移液管1支，10mL吸量管1支，1mL吸量管2支，接种环第二十三页，共二十四页。内容总结大肠菌群检测。361。装有0.85%灭菌生理盐水的生理盐水灌1个。注意：稀释瓶、带塞锥形瓶开盖前要过火，量筒、装有0.85%灭菌生理盐水的锥形瓶及其塞子应放在酒精灯周围15cm的范围内。吸取25mL液