高效液相色谱法测定万寿菊花萃取物中的叶黄素含量

1、高效液相色谱法测定万寿菊花萃取物中的叶黄素含量李岑岭王佩维聂永亮宋鹏【摘要】目的用高效液相色谱法对万寿菊花萃取物中所含的叶黄素含量举行阐发测定。要领起首由万寿菊花萃取物制备出叶黄素单体，利用色谱柱为Diansil18柱；活动相为甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水3029401;流速0.75lin-1;检测波长450n;柱温25;进样量20l。结果该要领最低检出限量110-7gl-1,叶黄素在0.824gl-1范畴内线性干系精良，要领细密度RSD相对尺度缺点为0.96%,加标接纳率为99.49%100.22%,RSD为0.82%1.64%。结论该要领轻便、正确、重复性好。【关键词】万寿菊叶黄素高效液相色谱

2、法叶黄素(LutEin)，别名“植物黄体素，是一种普及存在于蔬菜、花草、水果与某些藻类生物中的自然抗氧化剂。叶黄素高活性、富含电子的长多烯碳链，能庇护人体免受单线态氧和自由基的作用而带来的损害1，并且叶黄素是人体血液中重要的类胡萝卜素之一，可以或许按捺肿瘤生长，可以防范因机体朽迈而引发的心血管硬化、冠心病2，3；叶黄素可以或许很好地庇护皮肤免受阳光灼伤，淘汰人体所受来自于电脑屏幕、电视屏幕等的辐射和超量紫外线照耀的损害4，具有显着的防辐射、护肤、润肤和抗朽迈作用。别的，叶黄素和玉米黄质是眼睛中仅有的两种类胡萝卜素，防范老年性眼球视网膜黄斑区病变引起的视力落落与失明5、白内障等眼部疾病6是叶黄素

3、的奇特的成效。别的，叶黄素照旧一种很好的自然着色剂，在饲料中添加叶黄素不但可以给动物增补营养，还可以进步动物肉质和蛋的品格，因此，叶黄素被普及应用于医药、保健品、化装品、食品着色、烟草、水产物及动物饲料1。在国际市场上，1g叶黄素的代价与1g黄金相称，以是人们把它称为“植物黄金。万寿菊花花瓣中叶黄素是最重要的类胡萝卜素，通常另有3%6%的玉米黄质,别的类胡萝卜素的含量很小，因此黑白常好的叶黄素泉源。从万寿菊花中提取叶黄素已经成为国表里研究的热门，以是创立科学、不变、可靠的阐发要领非常需要。如今,阐发检测叶黄素的重要要拥有：紫外-可见分光光度法、色谱法、质谱、液质联用、核磁共振等，HPL可以实现

4、对待测物中叶黄素的定性定量阐发7，8。本实行重要研究了由万寿菊萃取物制备的叶黄素的高效液相色谱阐发要领。1仪器与试剂L5500高效液相色谱仪,北京工具电子技能研究所；ESJ120-4型电子天平，沈阳龙腾电子称量仪器；E211型超声波洗濯器，美国etterEletrnis公司；illipre膜过滤器及真空泵，美国aters公司；紫外可见分光光度计：UV22450UV-Visiblespetrphteter；叶黄素样品，由万寿菊干花经超临界2萃取制备出浸膏，经皂化、分散和纯化处置惩罚制得，所得的叶黄素样品经自然产物尺度样品国度焦点实行室北京阐发断定含量为97.29%作为尺度样品。阐发用试剂为阐发纯

5、，北京化工场消费，水为二次蒸馏水。2要领万寿菊花经超临界2萃获得到萃取物，将万寿菊花萃取物在碱性条件下皂化，然后分散出游离叶黄素，颠末纯化处置惩罚得到叶黄素样品。称取叶黄素样品20.0g，用活动相配成810-6gl-1的溶液。色谱条件:色谱柱为Diansil18柱；活动相为甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水3029401；流速0.75lin-1；检测波长450n;柱温25;进样量20l。3结果3.1色谱条件简直定试验了差异体积比的甲醇-乙腈、甲醇-乙腈-醋酸乙酯、甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水为活动相，终极确定活动相为甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水3029401；流速0.75lin-1；分散度、柱压及峰形均较抱负，

6、取叶黄素尺度样品适量，用活动相溶解,制成810-6gl-1的溶液，用紫外-可见分光光度计在200800n的波长范畴内扫描见图1，最大汲取波长为450n，本文选择450n为检测波长。叶黄素样品高效液相色谱图见图2。以叶黄素峰面积A(vs-1)对进样浓度(gl-1)举行回归,得到回归方程为:Y=-14377.4+59811.7,r=0.9939。此方程可以用于叶黄素峰面积与浓度之间的定量阐发与盘算。配制110-7g/l的叶黄素尺度溶液，检出信号薄弱，确定最低检出限为110-7g/l。图3叶黄素尺度曲线3.4加标接纳率按差异比例正确称取含量的叶黄素样品和叶黄素尺度品,配制如表2所示的5种样品,并用活动相溶解,制得浓度为810-6gl-1的溶液,在上述色谱条件下测定，每种样品进样3次，结果见表2。接纳率为99.49%100.22%,RSD为0.82%1.64%。表1细密度实行结果3.5样品测定将2022-12-13制得的叶黄素样品，别离于2022-12-14、2022-03-25、2022-04-29在上述色谱条件下检测其间样品在暗处、0、密闭保存每个样品进样3次，结果见表3。表3样品测定结果结果表白，叶黄素在暗处、0长时间安排对叶黄素含量有较显着影响。4结论实行研究选定了以甲醇-乙腈-醋酸乙酯-水3029401为活动相;流速0.75lin-1;检测波长450n;柱温25;进样量20