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文档简介
1、1 基因 :基因是基因组中的一个功能性遗传单位,是贮存有功能的蛋白质多肽链或 rna 序列信息及表达这些信息所需的全部核苷酸序列;2 基因组 :基因组是一个细胞或一种生物体的整套遗传信息;3 质粒 :是指细菌细胞染色体意外,能独立复制并稳固遗传的共价闭合环状分子;4 蛋白质组 :是指一种基因所表达的全套蛋白,既包括一个细胞或一个组织或一个机体的基因所表达的全部蛋白质;7DNA重组 : 是指不同来源的 DNA通过磷酸二酯键连接而重新组合成新的 DNA分子的过程,8 限制性内切酶 : 是指能识别和水解双链 DNA分子的内特异序列的核酸水解酶;9 载体 :是指携带靶 DNA片段进入宿主细胞进行扩曾和
2、表达的运载工具,常用的载体有 : 质粒载体、噬菌体载体,病毒载体和人工染色体等;12 核酸分子杂交 :单链的核酸分子在适合的条件下,与具有碱基互补序列的异核酸形成双链杂交的过程;13 杂交 : 将一种核酸单链标记成探针,再与另一核酸单链进行碱基互补配对,可以形成异源核酸分子的双链结构的过程,14PCR: 是一个在体外特异的复制一段已知序列的 中获得大量拷贝的特异核酸片段;DNA片段的过程,这项技术使人们能够人们很快的从试管15 分子生物学检验 : 从基因水平上说明疾病发生气制,明确疾病诊断,跟踪疾病过程,指导个体化治疗的先进技术手段;17 反义核酸 :是用人工合成的15-25 个核苷酸片段,
3、通过碱基互补配对挑选与特定的RNA或 DNA互补结合,从而能专一性的抑制基因的转录与翻译;18 核酶 : 是一类具有酶的特异性催化功能的RNA分子,能序列特异性地剪切底物RNA或修复突变的RNA;19 致病基因 :能导致遗传病或遗传病发生相关的基因;20 血红蛋白 :是由于编码血红蛋白的基因反常而发生的一类遗传性贫血;分两类一反常血红蛋白病 eg 镰状细胞贫血二球蛋白生成障碍性贫血也称地中海贫血21 地中海贫血 :也称球蛋白生成障碍性贫血;是由于球蛋合成速率降低,引起 a 链和非 a 链缺乏称为球蛋白生成障碍性贫血;22 血友病 :由于基因缺陷而使其中某一凝血因子蛋白表达降低或的确造成的一种疾
4、病;分类;A 型 B 型23 转座因子 : 一类在细菌染色体,质粒或噬菌体之间自行移动并具有转位特性的独立 DNA序列;24 操纵子 : 启动基因,操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称;25 单顺反子 : 是真核基因转录的产物,即一条mRNA模板只含有一个翻译起始点和一个终止点;因而一个基因编码一条多肽链,每个基因转录有各自的调剂元件;3 原核生物基因组特性?1 具有类核结构 2 基因组中只有一个复制起点 3 具有操纵子结构 4 基因连续无内含子 5 无基因重叠现象 6可编码同工酶序列 7 编码序列占基因组的 508 基因组中有重复序列 9 基因组中有转座子4 病毒基因组的特性?1 基因的
5、碱基组成相对简洁 2 基因组的核酸序列类型较多 3 基因组中有基因重叠现象 4 基因组中具有操纵子 5 病毒基因可间断可连续 6 基因组中重复序列少 7 基因组是单倍体 8 相关基因从集 9 病毒基因组含有不规章结构基因 10 基因组中非编码区少5 真核基因组的特性?1 单顺反子结构 2 断裂基因 3 重复序列 4 多基因家族和假基因 5 多太性 6 基因重叠 7 端粒6 western 印迹基本过程 :蛋白质样品的制备,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的转移,蛋白质与抗体的结合及相应的显色反应;和染色体重排;7DNA测序方法有?双脱氧核苷酸末端终止法,化学断裂法,DNA自动测序8 抑制基因
6、表达的技术有?反义核酸,核霉和脱氧核酶及小 RNA干扰;9 探针的种类,常用的标记物?探针种类 DNA探针, RNA探针,寡核苷酸探针;标记物有:放射性标记最敏锐牢靠的是 32p 标记,非放射性标记多由生物素,地高辛或荧光素标记;10 核酸分子杂交的基本原理?基本过程是变性 - 复性 - 杂交;在肯定条件下双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,DNA分子变成单链,形成无规章团,这一过程称为变性;变性的 DNA只要排除变性条件,具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链,这一过程称为复性;依据这一条件,将一种核酸单链标记成探针,在于另一核酸单链进行碱基互补配对,可以形成异源核酸分子的双链结构这一过程
7、称为杂家;核酸分子单链之间的互补碱基序列,以及碱基对之间非共价键的形成是核酸分子杂交的基础;11PCR原理及基本过程?变性: DNA双螺旋的氢键断裂,形成单链分子作为反应的模板?退火:引物与模板互补结合,形成杂交链;延长:依据模板链的序列以互补的方式一次把 形成新的 DNA双链;12PCR反应体系包括?dNTP加至 3 端, TapDNA聚合酶使杂交双链不断延长,直至模板,引物,脱氧核苷三磷酸,TapDNA聚合酶,镁离子浓度及其它反应因素;13 生物芯片的医学应用?DNA芯片的医学应用包括基因表达分析,基因型,基因突变和多态性分析,疾病诊断,药物挑选,指导临 床用药,预防医学;蛋白质芯片的医学
8、应用包括特异性抗原抗体的检测,生化反应的检测,疾病诊断,疾 病机制讨论,药物挑选及新药的研发;14 双向凝胶电泳由那两项电泳组成?其机制是什么?聚焦凝胶电泳;其次向是以蛋白质分子量差异为基础的 不同而分别;其次向依据蛋白质分子量不同区分;15 核酸分子杂交的过程?第一向是以蛋白质电荷差异为基础进行分别的等电 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;第一向依据等电点电荷1 样品制备:印迹杂交的前提是获得具有肯定纯度和完整性的核酸;2 电泳分别通过琼脂糖凝胶电泳分别;3 印迹:将带测定核酸分子通过肯定的方法转移并结合到肯定的图像支持物上;4 预杂交:将固相膜上能够结合核酸的住点全部封闭;5 杂交:用探针与固相
9、膜上的核酸结合;6 洗膜:除去固相膜上未杂交的游离探针和形成非特异性杂交低的探针;16 镰状细胞贫血发生的机制?7 分析:通过放射自显影或或化学分析待测核酸片段的大小和含量;镰状细胞贫血患者由于b 珠蛋白基因中第六位密码子存在单个碱基的突变,由原先GAG转变成 GTG,结果使 B 珠蛋白链的第六位氨基酸残基由原先的谷氨酸转变成结氨酸转变后的反常血红蛋白称为镰状血红蛋白;17 影响杂交速率和杂化分子稳固性的因素1 温度 2 离子强度和甲酰胺浓度3 探针种类和浓度4 核酸分子大小和浓度5 杂交时间 6 杂交促进挤7 非特性杂交18 简述双脱氧末端终止法测序的原理;以待测单链DNA为模板,寡聚核苷酸
10、为引物,在DNA聚合酶的作用下,按碱基互补原就合成互补 DNA单链,在合成过程中链可终止于双脱氧核苷酸处,获得不同长度的 而得到待测 DNA分子的碱基序列;19 病毒感染的分子生物学检测策略是什么?DNA单链,在经电泳分别,读序A,一般性检出策略,供应是否存在某种病毒感染;B 完整性检出策略,对病毒存在做出明确带菌者和潜在感染者仍有对病毒拷贝数,基因分型,基因亚型及耐药性监测;20HBV基因组结构以及表达产物HBV是带有部分单链区的环状 DNA双链分子,由两条链组成,长链和短链;长链长度固定,携带病毒全部编码信息;HBV基因组长链有 6 个开放读码框架, 其中 S.C.X.P 是最主要 表达产
11、物 :1 ,S 区 外膜蛋白 C 区,核心区蛋白;P 区, DNA多聚酶蛋白 x 区, x 蛋白;21 写出 HIV 基因组结构及表达产物;由两条相同的正义 RNA组成; 两段为长末端重复序列 LTR,LTR是顺势调控序列,包含启动子增强子负调控区,掌握前病毒的表达;LTR之间为编码区,包含 9 个基因,各基因存在重复序列,有部分,也有完全重叠;表达产物, 结构基因 gap 多聚蛋白前体 env 包膜前体蛋白 pol 编码合成前体蛋白 调控基因 tat 反式激活的转录因子; rev 促进大分子量 mRNA转运 nef 负调剂蛋白22 写出结合分枝杆菌基因组结构特点;环状双链 DNA,4000 个基因,其基因序列高度保守,基因组大多数插入序列位于基因间或非编码区共有 3924 个开放阅读框,其中91有潜在的编码才能,有三个毒力因子:mce,过氧化氢酶,过氧化物酶,和 siga 23 等电聚胶凝迈电泳机理依据蛋白质分子静电荷或等电点进行分别的技术,在等电聚焦过程中,电场所采纳的载体两性电解质有脂肪族多氨基的羧基,可在电场形成正极酸性,负极碱性的连续 ph 梯度,蛋白质在连续梯度中电
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