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文档简介
1、专题1 基因工程1.2 基因工程的基本操作程序比较DNA复制PCR技术区别解旋方式解旋酶催化DNA在高温作用下变性解旋场所细胞内(主要在细胞核内)细胞外(主要在PCR扩增仪内)区别酶DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等耐热的DNA聚合酶(Taq聚合酶)温度条件细胞内温和条件需控制温度,在较高温度下进行合成的对象DNA分子DNA片段或基因联系模板:均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成原料:均为四种脱氧核苷酸酶:均需要DNA聚合酶进行催化引物:均需要引物,使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸受体细胞方法植物细胞(体细胞)农杆菌转化法:目的基因插入Ti质粒的T-DNA农杆菌导入植物细胞稳定维
2、持和表达基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法动物细胞(受精卵)显微注射法:含有目的基因的表达载体提纯取卵(受精卵)显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物微生物细胞(原核细胞)Ca2处理细胞感受态细胞表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子目的基因随受体细胞的繁殖而复制比较起始(终止)密码子启动(终止)子本质三个相邻碱基DNA片段位置位于mRNA上位于DNA上作用启动(终止)翻译启动(终止)转录类型步骤检测内容方法结果显示分子水平检测第一步目的基因是否进入受体细胞DNA分子杂交(DNA和DNA之间)是否成功显示出杂交带第二步目的基因是否转录出mRNA分子杂交技术(DNA和mRNA之间)是否成功显示出杂交带第三步目的基因是否翻译出蛋白质抗原抗体杂交是否成功显示出杂交带个体水平鉴定需要做抗虫、抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的程度
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