蛋白纯化策略和工艺_第1页
蛋白纯化策略和工艺_第2页
蛋白纯化策略和工艺_第3页
蛋白纯化策略和工艺_第4页
蛋白纯化策略和工艺_第5页
已阅读5页，还剩26页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、蛋白纯化策略和工艺吕虎.8.18第1页五大层析原理第2页内容:介绍蛋白纯化策略怎样建立纯化方案纯化工具总结第3页介绍第4页早期蛋白纯化1789-1940s层析纯化1950s-1980s今天蛋白纯化第5页决定原因第6页层析技术第7页蛋白纯化策略第8页蛋白纯化策略CIPPKEEP SIMPLE第9页关键因子分辨率速度载量回收率Phase 1：CapturePhase 2：Intermediate PurificationPhase 3：Polishing第10页层析技术推荐第11页交替利用互补技术，合理衔接降低样品处理，尽可能简单化第12页综合考虑起始和结束条件衔接第13页设计合理纯化路线相互衔接

2、，降低中间处理第14页建立纯化方案明确纯化目了解纯化产物特征CIPP纯化策略建立有效分析方法确立最终纯化方案第15页明确纯化目MassspectrometryAntigen forimmunizationFunctionalstudiesStructuralstudiesTherapeuticproteinHomogeneityActivityPurityAmount pg ng ug mg g kgOften not necessary rigid requirements Moderate 80% High 95% -99% Very high 99%Often not necessary

3、 rigid requirements第16页了解目标产物特征目标产物特征:分子量 等电点可溶性稳定性 起始条件:样品量 pH离子强度成份关键杂质 第17页CIPP纯化策略筛选层析技术筛选填料优化条件第18页筛选层析技术：标签蛋白第19页筛选层析技术:非标签蛋白第20页筛选填料第21页筛选填料第22页筛选填料不一样HIC填料分离同种蛋白质分离结果第23页优化条件不一样pH条件下，目标蛋白与DEAE柱结合情况第24页优化条件不一样洗脱方式对蛋白纯化结果影响第25页有效分析方法第26页纯化追踪表Purification stepProteinConc.（mg/ml）Volume（ml）AmounttotalProtein（mg）Totalactivity（U）Specificactivity（U/mg）recovery（%）Purification factor回收率&纯化因子第27页纯化工具手动纯化:重力纯化磁珠纯化离心纯化优点:简单易掌握经济自动纯化:预装柱配合层析设备优点:自动化解放人力更高效洗脱伎俩多样化结果更优高重复性，结果可追溯第28页总结纯化目&目产物特性CIPP纯化策略Capture、Intermediate Purification and Polishing综合运用多种层析技术互相衔接保持简单纯化工具第29页思索： 假如要得到一个去GST标签蛋白，该怎样设计纯

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 医学制药

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论