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文档简介

1、大肠杆菌的检验方法样品制备：以无菌操作取25样品，放入装有225稀释剂的灭菌均质杯内，于8000均质12制成11（样品匀液也可用灭菌乳钵研磨的方法代替。稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计，用稀释剂将样品匀液制成一系列十倍递增的样品稀释液，如10、20、304。从制备样品匀液至稀释完毕，全过程不得超过15。和初步筛选：对每个样品，选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白月示肉汤，每管接种1。将接种管置于361C培养482h。观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生，用直径为3的接种环将所有482h内产气的肉汤管培养物移种于肉汤管中。将所有接种的肉汤管在30

2、内放入带盖44.50.5C水浴箱内，培养482h。平板：取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝平板,361C培养242h。检查平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落。如有典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个典型菌落；如无典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个可疑菌落。用接种针接触菌落中心部位,移种到营养琼脂斜面上,361C培养1824h。生化试验：将斜面培养物移种到下列培养基中进行生化试验。1色氨酸肉汤：在361C培养242h后，加氏试剂003m上层出现红色为靛基质阳性反应。培养基：在361C培养482h。以无菌操作移取培养物1m至13mmX100mm试管中，加a萘酚乙醇溶液06m,细氢氧化

3、钾溶液02m和少许肌酸结晶，振摇试管后静置2h,如出现伊红色，为试验阳性。将培养物的剩余部分再培养48h滴加滴甲基红溶液。如培养物变红色,为甲基红试验阳性,若变黄色则为阴性反应。氏枸椽酸盐肉汤：于361C培养6!h记录有无生长。肉汤：于361C培养482h，观察试管中是否产气。革兰氏染色：取18h营养琼脂斜面培养物作革兰氏染色。大肠杆菌为革兰氏阴性。大肠杆菌与非大肠杆菌生化鉴别如下：1111靛基质11111枸椽酸盐1鉴定型别11+1-11-1-1-1-1典型大肠杆菌1非典型大肠杆菌+11-1+1典型中间型-11-1+1非典型中间型F-+1-1-11+1典型产气肠杆菌+1-11+1非典型产气肠杆菌如出现上表以外的生化反应类型,表明培养物可能不纯,应重新划线分离,必要时做重复试验。结果报告：大肠杆菌为

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