复方双辛喷雾剂对豚鼠过敏性鼻炎的影响

1、复方双辛喷雾剂对豚鼠过敏性鼻炎的影响【摘要】目的考察复方双辛喷雾剂对豚鼠过敏性鼻炎的治疗效果。方法以2,4-二异氰酸甲苯酯(TDI)为致敏原，建立豚鼠鼻变态反响模型,以鼻炎滴剂为对照，设置复方双辛喷雾剂高、中、低3个剂量组，经过处理，测定各组豚鼠鼻黏膜内组胺含量。结果复方双辛喷雾剂对实验性变态反响性鼻炎豚鼠模型的各种变应性鼻炎的病症和体征均有明显改善作用；与模型对照组比拟,各给药组动物鼻腔分泌物量、喷嚏次数、抓鼻次数明显减少；复方双辛喷雾剂还能显著降低豚鼠鼻黏膜中组胺含量(P0.01)。结论复方双辛喷雾剂对实验性变态反响性鼻炎有显著的改善作用，且具有方便、平安、副作用小等优点。【关键词】复方双

2、辛喷雾剂豚鼠组胺变应性鼻炎Abstrat:bjetiveTevaluatetheeffetsfShuangxinNasalSpraynhypersensitiverhinitisinguineapigs.ethdsithtluene-2,4-diisyanate(TDI)assensibilisingen,theguineapignasalallergydel,usingrhinitisdrpasparisn,high,idestandlthreedsesfShuangxinNasalsprayeresetup.Aftertreatent,thehistainententasdeterined

3、.ResultsShuangxinNasalSprayuldbviuslyiprveeahkindfallergirhinitissyptsfguineapigallergiadels.paredinediatinadinistratingrupsiththentrlgrup,thenasalseretins,thefrequenyfsneezingandthetiesfgripingnsearebviuslyredued.AndtheShuangxinNasalsprayalsuldsignifiantlydereasehistainententinthenasalusafguineapig

4、s(P0.01).nlusinShuangxinNasalSprayansignifiantlyiprvetheallergiarhinitis,andithasanyadvantages,suhasnveniene,safetyandlsideeffetsandsn.Keyrds:ShuangxinNasalSpray;Guineapig;Histaine;Allergirhinitis过敏性鼻炎是由IgE介导的I型变态反响，是发生在鼻黏膜的变态反响性疾病,以鼻痒、喷嚏、鼻分泌亢进、鼻黏膜肿胀等为主要特点,是耳鼻咽喉科常见并多发病,且近年发病率呈上升趋势1。组胺是本病发病中的重要介质,抗组胺

5、药仍是治疗本病主要而有效的药物。复方双辛喷雾剂的主要成分为细辛和辛夷的挥发油，细辛和辛夷都是常用于治疗鼻炎的中药，现代药理学研究说明，其有效成分均为挥发油，具有抗菌、消炎、抗组胺等作用，再配以具有疏风、清热、通窍作用的薄荷脑研制而成。本实验通过观察复方双辛喷雾剂对豚鼠变应性鼻炎鼻黏膜组胺含量的影响,并与鼻炎滴剂对照,以提醒其疗效机制。1器材与方法1.1药物与仪器复方双辛喷雾剂(主要由细辛、辛夷、薄荷脑组成,由石河子大学医学院附院药剂科研制),鼻炎滴剂(佛山德众药业消费，批号06052),正丁醇和正戊烷为分析纯，组胺标准品(购自国药集团化学试剂)，邻苯二甲醛(Siga公司)，FSH-2A可调高速

6、匀浆机，光学显微镜LYPUS。1.2变应性鼻炎豚鼠分组及模型的建立采用国内外公认的TDI为致敏原,对豚鼠进展鼻内给药法建立鼻超敏反响动物模型2。然后按体重、性别将豚鼠随机分为正常组、模型组、复方双辛喷雾剂低、中、高剂量组、鼻炎滴剂组共6组,每组8只。除正常组单纯用橄榄油10l(每侧5l)滴鼻外,其余每只豚鼠均用10%TDI橄榄油溶液10l滴鼻(每侧5l),1次/d。记录每次激发后30in内动物的鼻痒、喷嚏、清涕出现的时间、次数与轻重程度,并打分(鼻痒:轻度1分,轻擦鼻数次;重度2分,抓挠鼻、面不止,到处摩擦。喷嚏:13个为1分,410个为2分,11个以上为3分。清涕:流到鼻前孔为1分,超过鼻前

7、孔为2分,涕流满面3分。记录鼻痒、喷嚏、清涕,评分用叠加法计总分)3。连续刺激7d,病症平均积分超过5分,鼻分泌物涂片嗜酸性细胞阳性为造模成功。从造模第8天起,TDI改为隔日刺激直至实验完毕。根据Lrn氏法4。自制微型小棉棒,伸入鼻腔轻擦取下鼻甲外表3次制作涂片,均匀地涂于载玻片上进展right染色,在光镜下寻找嗜酸性细胞。大量嗜酸性细胞为造模成功。1.3给药方法每组均从造模开场后第8天进入处理过程，给药2次/d，连续14d。除正常组和模型组每天喷相应体积赋形剂外,其余各组每天经鼻给予相应药物,剂量按人鼠体外表积折算。1.4鼻甲黏膜组胺含量测定5，6实验用药观察2周后,取鼻黏膜前60in再给1

8、次实验药物,30in后分别荧光法测定。取鼻黏膜的方法：暴露鼻中隔及双侧鼻腔后,从基底部剪下上、中、下鼻甲,在冰上剥除软骨,用生理盐水洗去污血，滤纸吸干后准确称量组织重量,参加3l0.4l/L的高氯酸在冰水浴中匀浆破细胞，转速20000r/in，低温离心15in，转速10000r/in，取上清组胺提取液1.6l，将上清液置于已加1gNal带塞10l试管中,再加4.0l正丁醇和2.5l/LNaH0.2l，立即混匀,置康氏震荡器震荡5in,静置后取出3.6l正丁醇相加到已加0.1l/LHl1.5l和正庚烷2.0l的10l带塞试管中,震荡5in,弃有机相,取1.0lHl相置入10l带塞试管中。1.0l

9、Hl相用三蒸水稀释1倍,加2l3%的硼酸缓冲液pH=10碱化,混匀并迅速参加0.1%PT甲醇液0.1l，立即混匀,室温下反响5in,加2l2.5l/L的柠檬酸终止缩合反响,测定荧光值(激发波长350n,发射波长443n)。1.4.1标准曲线的绘制准确称量组胺标准品10g，以0.1l/L的稀盐酸稀释成2g/l的组胺溶液。用移液管分别移取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0l于10l带塞试管中，缺乏1l的以0.1l/L的稀盐酸补足，再经上述方法测定，得到荧光读数与组胺含量的线性方程：Y=5.0739X-37.779，r=0.9984Y为组胺量(ng)，X为荧光读数2结果2.1统计方法所有计量资料

10、采用(s)表示,均数差异的显著性采用SPSS统计软件进展t检验。2.2Lrn氏法涂片检查结果正常组的豚鼠鼻腔分泌物在光镜下未见或见到少量嗜酸性细胞，其余各造模组的豚鼠鼻分泌物均见到大量红色呈球型或椭圆型的嗜酸性细胞，说明模型制作成功。2.3鼻部病症观察致敏豚鼠从第1次滴药开场,鼻腔滴药后10in内均不同程度地出现了鼻痒和喷嚏病症,但无明显清涕.上述病症随着药次数增加而逐渐加重,并出现清涕。第4天出现典型的鼻痒、喷嚏和清涕病症。7d后造模全部成功。正常组偶有鼻痒或喷嚏,但无清涕,与文献报道根本符合1。见表1。表1给药前后病症积分比拟(略)2.4鼻甲黏膜组胺含量测定见表2。表2对鼻甲黏膜组胺含量的

11、影响(略)3讨论组胺在变应性鼻炎发病的多个环节中起主导作用,是产生变应性鼻炎病症的主要炎性介质,可冲动鼻黏膜上分布的三叉神经末梢上的H1受体,引起三叉神经的动作电位,产生鼻痒和喷嚏,同时可使微血管扩张、血管通透性增加、组织水肿、嗜酸性细胞增多及分泌活动亢进等。本实验说明复方双辛喷雾剂可通过抑制豚鼠鼻黏膜组胺释放,阻断组胺信息作用于鼻黏膜,收缩黏膜血管，减少炎性细胞浸润、减轻组织反响;减轻变态反响病症而起治疗作用。因此，复方双辛喷雾剂对豚鼠过敏性鼻炎的治疗是具有积极意义的，为本病的中药治疗提供了广阔的前景。【参考文献】1黄选兆.耳鼻喉科学，第4版.北京：人民卫生出版社，1995：382黄振华，李三鸣，曹颖林，等.曲安奈德喷雾剂对变应性鼻炎的作用J.沈阳药科大学学报,2022,21(6):446.3赵秀杰,董震,杨占泉.鼻超敏反响实验模型建立J.中华耳鼻喉科杂志,1993,28(1):17.4kingH.tlargnglgiAllergysypsiaspeialists.Flrida,1981,229.5BEilD,KinderH,Pas