实验十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性测定_第1页
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1、实验十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定(精)实验十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定(精)3/3实验十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定(精)实验十保健食品中超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定一、实验原理依据GB/T5009.171-2003，将25时控制邻苯三酚自氧化速率50%所需的SOD定义为一个活力单位。在碱性条件下，邻苯三酚会发生自氧化，可依据SOD控制邻苯三酚自氧化能力测定SOD活力。二、实验试剂A液：pH8.20的0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液（内含1mmol/LEDTA2Na）。称取1.2114g三羟甲基氨基甲烷和37.2mgEDTA

2、2Na溶于盐酸溶液中，用蒸馏水定溶至100ml。B液：4.5mmol/L邻苯三酚盐酸溶液。称取邻苯三酚56.7mg溶于少许10mmol/L盐酸溶液，并定容至100ml。盐酸溶液：10mmol/L蒸馏水：二重石英蒸馏水三、实验仪器紫外-可见分光光度计精巧酸度计（0.01pH）离心计10ml比色管10ml离心管玻璃乳钵。四、测定步骤取茶叶样品1.00g置于研钵中，加入9.0ml蒸馏水研磨5分钟，移入10ml离心管。用少许蒸馏水冲刷研钵，洗液并入离心管中，加蒸馏水至刻度，经4000r/min离心15分钟，取上清液测定。在25左右，于10ml比色管中挨次加入A液2.35ml，蒸馏水2.00ml，B液0

3、.15ml。加入B液立刻混淆并倾入比色皿，分别测定在325nm波长条件下初始时和1Min后吸光度值，两者之差为邻苯三酚自氧化速率A325（min-1）为0.060。在25左右，于10ml比色管中挨次加入20.0ul样液或酶液，A液2.35ml，蒸馏水2.00ml，B液0.15ml。加入B液立刻混淆并倾入比色皿，分别测定在325nm波长条件下初始时和1分钟后吸光度值，两者之差为样液或酶液控制邻苯三酚自氧化速率A325（min-1）。加入样液或酶液的量使控制邻苯三酚自氧化速率为1/2A325（min-1），即0.030。五、计算SOD活力gA325A1325A325100%4.5DV150%Vm式中：V加入样液或酶液的体积，mlA325邻苯三酚自氧化速率A325样液或酶液控制邻苯

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