淮山生物多糖分离提取工艺技术课件

1、淮山生物多糖分离提取工艺技术目录淮山生物多糖分离提取的研究意义淮山生物多糖提取工艺流程淮山生物多糖的结构及理化性质淮山生物多糖的分离参考文献淮山生物多糖含量的测定淮山生物多糖分离提取的研究意义淮山又名淮山药 ，本草纲目中记载，山药有益肾气、健脾胃等功效【3】。山药具有多种生物活性，主要活性成分是山药多糖，有果糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖等【9】。山药多糖有很多作用：苗明三研究了山药多糖对小鼠免疫功能的影响，结果表明淮山药多糖可明显提高小鼠淋巴细胞的转化率，提高小鼠的免疫功能【4】 。詹彤研究了小鼠代谢性衰老模型的各项指标，发现山药多糖具有良好的抗衰老作用【4】 。此外山药多糖还具有抗肿

2、瘤、抗氧化、降低糖尿病小鼠的血糖水平,并且具有抑制-淀粉酶活性的作用【17】 。因此，开展提取山药多糖的实验研究，开发以山药多糖为主的多功能生物制品，对提高人民的健康水平有十分重要的意义。淮山生物多糖的结构及理化性质 多糖是由糖苷键结合的糖链,由二十多个到上万个单糖组成的大分子，多糖除以游离状态存在外，也以结合的方式存在。结合型多糖有与蛋白质结合在一起的蛋白多糖和与脂质结合在一起的脂多糖等。淮山药中有多糖(52.4%)和蛋白质(47.6% )的复合体粘液质【5】 。粘液质在山药中的含量约为0.06%一1.09% 【5】 ，所含山药多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖等组成，含量约2.15

3、%一2.96%，是山药的主要活性成分，山药多糖无甜味，多糖不溶于高浓度的乙醇、苯、甲苯、氯仿、甲醇、丙酮等有机溶剂，多糖分子量越大，在水中溶解度越小。【1】山药中含有大量淀粉，占干物质质量的59.12%78.85% ，且与多糖性质相似。在提取过程中如果温度过高，则会有大量淀粉糊化溶解，醇沉后混入粗多糖中，并造成粗多糖量值的虚高。另一方面，由于山药淀粉颗粒的存在，提取温度低于淀粉糊化温度时，淀粉颗粒的包裹阻碍了山药多糖的释放，造成山药多糖提取的不完全【6】 。因此在提取多糖时，应除淀粉。溶剂提取法酸提法碱提法超滤法超声提取法微波提取法酶提法淮山生物多糖提取工艺流程冷冻干燥粗多糖山药去皮捣碎乙醇沉

4、淀离心残渣上清液提取多糖除淀粉加淀粉酶水解溶剂提取法：在所有溶剂中,水对植物组织的穿透力强,提取效率高，安全易得。最佳提取条件：料液比1:8 浸提温度45 ,浸提时间2h【2】，离心，除去杂质后将上清液蒸发浓缩。酸提法：为防止降解，用1%的醋酸，在5以下提取。碱提法：适宜提取条件为料液比为1:8,NaOH浓度0.3mo1/L，浸提时间为1h，乙醇浓度为80%【8】，为防止多糖降解,常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾【11】。 酶提法： 在多糖的提取过程中,使用酶可降低提取条件,在比较温和的条件中分解植物组织,加速多糖的释放或提取。此外,使用酶还可分解提取液中果胶、蛋白质等非目的产物,常用的酶有

5、蛋白酶,果胶酶等【12】。除淀粉：向山药中加水150mL，加入-淀粉酶0.16%，搅拌混匀后，置于70 水浴60min，再加入糖化酶0.12%，水浴60min，完成后取出煮沸。待其冷却后，以4000 r/min 离心5min，收集上清液抽滤并收集滤液。取该滤液3.0mL判断淀粉是否全部溶解【6】 。 淀粉检验方法：在PH=4,45以下，向山药溶液中加碘液（0.1I2与1 KI的混合液）,溶液变蓝，则代表淀粉未溶解完；反之，淀粉溶解完全。若溶液显蓝色，则重复上述除淀粉操作；反之，进行之后步骤。溶液的颜色（碘与淀粉的包合物）可在加热后去除【7】 。淮山生物多糖的分离活性炭脱色法双氧水脱色法盐析法等

6、电点法加热法溶剂沉淀法透析法粗多糖脱蛋白去小分子物质脱色淮山多糖脱脂石油醚回流将粗多糖置于索氏提取器中，加入石油醚在9 0 下回流提取1h 【2】 。盐析法：向提取液中加入大量的硫酸铵溶液，浓的盐溶液会中和电荷、破坏水化膜，从而降低蛋白质的溶解度，使蛋白质沉淀。等电点法：蛋白质在PH约为等电点的条件下，溶解度最小。 加热法：加热后，蛋白质变性凝固。蛋白质凝固多为絮状，先离心，再过滤。此法在本实验不适用，加热后呈粘稠状，不易分离。溶剂沉淀法：有机溶剂可以使蛋白质表面电荷基团或亲水基团的水化程度降低，破坏蛋白质胶体的水膜，降低溶液的介电常数，使蛋白质之间的静电引力增大，产生沉淀。透析法是利用小分子

7、物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。用截留量为8000的透析袋流水透析48h 。双氧水脱色方法是直接氧化提取液中的色素，氧化后的色素将作为杂质留在提取液内，达不到分离的目的。对于植物来源的多糖，可能含有酚型化合物而颜色较深，这类色素大多呈负性离子，不能用活性炭吸附剂脱色，并且活性炭会吸附多糖【2】 。弱碱性树脂DEAE纤维素柱层析阴离子交换柱山药去皮捣碎乙醇沉淀离心残渣上清液提取多糖除淀粉冷冻干燥粗多糖脱蛋白脱脂去小分子物质脱色淮山多糖淮山生物多糖提取分离工艺流程参考文献1.徐琴.江苏产淮山药多糖成分的研究D.南京工业大学，20062.聂凌鸿.淮山活性多

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