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文档简介

1、基因工程通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取(复制)出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传特性。一、基因工程的概念优点:与杂交育种相比与诱变育种相比1、周期短2、可克服生殖隔离3、目的性强,可定向改造生物性状基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程实质结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平人类需要的基因产物剪切 拼接 导入 表达基因重组基因工程的概念基因工程培育抗虫棉的简要过程:提取棉花细胞(含抗虫基因)苏云金芽孢杆菌抗虫基因与运载体DNA拼接导入普通棉花(无抗虫特性)棉花植株(有抗虫特性)上述基因工程培育抗虫棉的关键步

2、骤:关键步骤一:抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内剪切提取出来关键步骤二:抗虫基因与运载体DNA连接关键步骤三:抗虫基因导入受体(棉花)细胞二、 DNA重组技术的基本工具准确切割DNA的工具(“分子手术刀”)限制性内切酶DNA片段的连接工具(“分子缝合针”)DNA连接酶基因转移工具(“分子运输车”)基因进入受体细胞的载体基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具:思考在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例?现今存在的生物为什么没有在长期的进化过程中被外源DNA的入侵而灭绝,仍能保持一种稳定

3、状态?怎样才能使外来的DNA失效从而保护自身?从哪里可以找到这种切割外来的DNA而对自身不切割的物质?科学家是怎样找到这种酶的?这种酶具有什么作用?限制性核酸内切酶的作用:能识别特定核苷酸序列;从特定部位的两个核苷酸之间切开 。作用结果:产生黏性末端或平末端1.限制性核酸内切酶“分子手术刀”内切酶切割DNA后形成的末端黏性末端、平末端是如何形成的? 回文序列重播DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端,能够通过互补进行配对。2.基因的针线DNA连接酶切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接,你觉得可以用什么酶?限制酶切割后有两种不同的结果

4、,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否可以不加选择? 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,Ecoli DNA连接酶或T4DNA连接酶即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键3.基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。基因进入受体细胞的载体假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样?作为载体没有切割位点将怎样?目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉?如果载体对受体细胞有害将怎样?如果不能分离会怎样?作为载体的必要条件能自我复制有切割位点能与目

5、的基因结合能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达;有遗传标记基因对受体细胞无害、容易分离比较容易得到常见 运载体能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点有标记基因的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别。练习1.在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用( )同种限制酶 B. 两种限制酶同种连接酶 D. 两种连接酶2.基因工程常用的受体细胞有( )(1)大肠杆菌 (2)枯草杆菌(3)支原体 (4)动植物细胞A. (3)(4) B. (1)(2)(4)C. (2)(3)(4) D. (1)(2)(3)3.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 ( ) B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNAD4、关于限制酶的说法中,正确的是( )A、限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序 列B、EcoRI切割的是GA之间的氢键C限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNAD限制酶只存在于原核生物中C5. (多选)有关基因工程的叙述

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