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1、文档编码 : CX5W4Z1G6L1 HE8E8T3L8G2 ZU5U10R4T2W5学习必备 精品学问点 选修一 学问点 填空 专题一传统发酵技术的应用 课题 1 果酒和果醋的制作 1果酒制作的原理 (1)人类利用微生物发酵制作果酒,该过程用到的微生物是 , 它的代谢类型是 ,与异化作用有关的方程式有 生活状态:进行发酵,产生大量 ; ( 2)果酒制作条件 传统发酵技术所使用的酵母菌的来源是 酵母菌生长的; 最适温度是 ; PH 呈 ; (3)红色葡萄酒显现颜色的缘由是:酒精发酵过程中,随着 的提高,红色 葡萄皮的 进入发酵液,使葡萄酒呈 色; (4)在 , 的发酵液中,酵母菌可以生长繁衍,
2、而绝大 多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制; 2果醋的制作原理 (1)果醋发酵菌种是 ,新陈代谢类型 ; (2)当氧气和糖源充分时醋酸菌将糖分解成 ,当糖源不足时醋酸菌将 变为 再变成醋酸,其反应式 ; 3操作过程应留意的问题 (1)为防止发酵液被污染,发酵瓶要用 的空间; d消毒; (2)葡萄汁装入发酵瓶时,要留出大约 (3)制作葡萄酒时将温度严格把握在 ,时间把握在 左右,可通过 对发酵的情形进行准时的监测; (4)制葡萄醋的过程中,将温度严格把握在 ,时间把握在 d,并注 意适时在 充气; 4酒精的检验 (1)检验试剂: ; 条件下,反应显现 ; (2)反应条件及现象:在 5.
3、 制作果酒,果醋的试验流程 选择葡萄 课题 2 腐乳的制作 果酒 果醋 1.制作原理 ( 1)经过微生物的发酵,豆腐中的蛋白质被分解成小分子的 , 和 ,脂肪 被分解成 和 ,因而更利于消化吸取; , 等, ( 2)腐乳的发酵有多种微生物参加, 如 , 其中起主要作用的是 ;它是一种丝状 ,常 菌种直接接种在 见 , , , 上; ( 3)现代的腐乳生产是在严格的 条件下, 将优良 第 1 页,共 17 页豆腐上,这样可以防止其他菌种的 学习必备 精品学问点 ,保证产品的质量; 2. 腐乳制作的试验流程: 让豆腐长出 密封腌制; 3. 试验留意事项 ( 1)在豆腐上长出毛霉时, 温度把握在 ,
4、自然条件下毛霉的菌种来自空气 中的 ; ( 2)将长满毛霉的豆腐块分层加盐, 加盐量要随着摆放层数的加高而 , 近瓶口的表层要 ;加盐的目的是使豆腐块失水, 利于 ,同时也能 的生长;盐的浓度过低, ;盐的浓度过 高, ; ( 3)卤汤中酒精的含量应把握在 左右,它能 微生物的生长,同 时也与豆腐乳特别的 形成有关;酒精含量过高, ;酒精含量过 低, ;香辛料可以调制腐乳的风味,同时也有 作用; ( 4)瓶口密封时,最好将瓶口 ,防止瓶口污染; 课题 3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量 1乳酸菌代谢类型为 ,在 情形狂下,将葡萄糖分解为乳 酸;在自然界中分布广泛, 在 , , , 内都有分布; 常
5、见的乳酸菌有 和 两种,其中 常用于生产酸奶; 2亚硝酸盐为 ,易溶于 ,在食品生产中用作 ;一般不 会危害人体健康,但当人体摄入硝酸盐总量达 g 时,会引起中毒;当摄入总量 达到 g 时,会引起死亡;在特定的条件下,如 , 和 的作用下,会转变成致癌物质亚硝胺,亚硝胺对动物有致畸和致突变作用; 3泡菜制作大致流程:原料处理 装坛 成品 ( 1)配制盐水:清水和盐的比例为 ,盐水 时 后备用; ( 2)装坛:蔬菜装至 加入香辛料,装至 时加盐水,盐水 要 ,盖好坛盖; 坛盖边沿水槽中 ,保证坛内 环 境; 和 ( 3)腌制过程种要留意把握腌制的 10%, , 过短,简洁造 ; ;温度过高,食盐
6、用量不足 成 , ; 4测亚硝酸盐含量的原理是 将显色反应后的样品与已知浓度的 出泡菜中亚硝酸盐的含量; 测定步骤:配定溶液 进行比较,可以大致 制备样品处理液 学习必备 精品学问点 专题学问归纳 果酒和果醋的制作原理 传 果酒和果醋的制作 果酒和果醋的设计制作装置 统 发 果酒和果醋的制作过程 酵 技 腐乳的制作 腐乳的制作原理 术 的 腐乳制作过程的把握条件 应 用 泡菜制作原理 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量 泡菜发酵条件 亚硝酸盐含量的测定 专题二 微生物的培育与应用 课题 1 微生物的试验室培育 ; 四类养分物 的要求; 1依据培育基的物理性质可将培育基可以分为 和 2培育基一般都含有
7、质, , , , 另外仍需要中意微生物生长对 以及 3获得纯洁培育物的关键是 ; 4消毒是指 灭菌是指 5日常生活中常用的消毒方法是 ,此外, 人们也常使用化学药剂进行消毒, 如用 , 等;常用的灭菌方法有 , , ,此 外,试验室里仍用 或 进行消毒; 6制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的方法步骤是 , , , , ; 7微生物接种的方法中最常用的是 和 ;平板划线法 是指 ; 稀释涂布平板法是指 ; 8菌种的保藏: ( 1)暂时保藏: 将菌种接种到试管的 ,在合适的温度下培育, 长 成后,放入 冰箱中保藏,以后每 3 6 个月,转移一次新的培育基; 缺点是:储存时间 ,菌种简洁被 或产生变异;
8、(2)长期储存方法: 法,放在 冷冻箱中储存; 课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数 1尿素只有被 解尿 分解成 之后,才能被植物吸取利用;选择分 素细菌的培育基特点: 惟一氮源,按物理性质归类为 培育基; 2 PCR( )是一种在体外将 ;此项 技术的自动化,要求使用耐高温的 DNA 聚合酶; 3 试验室中微生物的选择应用的原理是:人为供应有利于 生长的条件(包 括 等),同时抑制或阻挡其他微生物生长; 第 3 页,共 17 页学习必备 精品学问点 4选择培育基是指 5常用来统计样品中活菌数目的方法是 时,培育 基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的 ; ;即当样品的稀释度足够高
9、;通过统计平板上的菌 落数,就能估量出样品中大约含有多少活菌;为了保证结果精确,一般选择菌落数在 的平板进行计数, 计数公式是 ;利用稀释涂布平板法胜利统计 菌落数目的关键是 ;另外, 也是测定微生物数量的常用方法; 6一般来说,统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ;这是由于 ;因此,统计结果一般用 7设置对比试验的主要目的是 信度;对比试验是 而不是活菌数来表示; ,提高试验结果的可 ;中意该条件的称 为 ,未中意该条件的称为 , , ; 和 ,详细 8试验设计包括的内容有: 的试验步骤以准时间支配等的综合考虑和支配; 9不同种类的微生物,往往需要不同的培育 和培育 ;在 试验过程中,一般每隔
10、 24 小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳固时的记录作为结果, 这样可以 ; ”之称,同其10土壤有 他生物环境相比,土 “ 壤中微生物 , ; 11土壤中的微生物约 是细菌,细菌相宜在酸碱度接近 潮湿土 壤中生长; 土壤中微生物的数量不同, 分别不同微生物接受的 的稀释度不同; 12一般来说, 在确定的培育条件下,同种微生物表现出稳固的菌落特点; 这些特点包 括菌落的 , , 和 等方面; 13在进行多组试验过程中,应留意做好标记,其目的是 ; 14对所需的微生物进行初步选择, 只是分别纯化菌种的第一步, 要对分别的菌种进行 一步的鉴定,仍需要借助 的方法; 15在细菌分解尿素的化学反应中
11、,细菌合成的 将尿素分解成了 ;氨会 使培育基的碱性 ,PH ;因此,我们可以通过检测培育基 变化来判定该 化学反应是否发生; 在以 为唯独氮源的培育基中加入 指示剂; 培育某种细 菌后,假如 PH 上升,指示剂将变 ,说明该细菌能够 ; 课题 3 分解纤维素的微生物的分别 1纤维素是 类物质, 是自然界中纤维素含量最高的自然产物, 此外,木材,作物秸秆等也富含纤维素; 2纤维素酶是一种 酶,一般认为它至少包括三种组分,即 , 和 ,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖, 第三种酶将纤维二糖分解成 ; 正是在这三种酶的协同作用下, 纤维素最终被水解成葡萄糖, 为微生物的生长供应养分, 同 样,也可以
12、为人类所利用; 3选择纤维素分解菌可以用 法,这种方法能够通过 直接对 微生物进行选择; 可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ,但并不 和水解后的 和 发生这种反应; 纤维素分解菌能产生 分解纤维 素,从而使菌落四周形成 ; 4分别分解纤维素的微生物的试验流程图如下: 梯度稀 释 ; 5为确定得到的菌是否是纤维素分解菌, 仍学进行 的试验; 纤维素 酶的发酵方法有 发酵和 发酵;测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤 维素后所产生的 进行定量测定; 第 4 页,共 17 页学习必备 精品学问点 专题学问归纳 培育基 培育基的类型 培育基的养分物质 防止杂菌污染的方法 无菌技术 试验室常用的消毒方法
13、 试验室常用的灭菌方法 微 制备牛肉膏蛋白 运算 生 称量 物 溶化 的 胨固体培育基 灭菌 纯化大肠杆菌 倒平板 实 平板划线法 验 称释涂布法 室 结果分析与评判 培 养 课题延长 微 生 土壤 选择菌株 PCR 技术 试验室中选择微生物的原理 物 选择培育基 中分 统计菌落数目 稀释涂布平板法 的 显微镜直接计数法 解尿 设置对比 设置对比的目的 培 对比试验的概念 养 素的 试验设计 土壤取样 样品的稀释 微生物的培与 细菌 育与观 察无菌操作 应 的分 操作提示 做好标记 规划时间 用 离与 结果分析与评判 纤维素酶的组成成分 计数 课题延长 纤维素与纤维素酶 纤维素酶分解纤维素的试
14、验 刚果红染料 选择纤维素分解 纤维素分解菌的选择 分解菌的依据 纤维素 试验设计 土壤取样 选择培育 的微生 刚果红染色法 操作提示 复习微生物技术 选物的 择培育的操作方法 分别 结果分析与评判 课题延长 专题三 植物的组织培育技术 第 5 页,共 17 页学习必备 精品学问点 专题学问归纳 课题 1 月季的花药培育 1有某种生物全套 的任何一个活细胞, 都具有发育成 的才能, 即每个 生物细胞都具有 条;但在生物体的生长发育过程中并不表现出来,这是由于在 件下,通过基因的 ,构成不同组织和器官; 2. 植物组织培育技术的应用有: 实现优良品种的 ;培育 作物;制作 种 子;培育作物 以及
15、细胞产物的 等; 3. 细胞分化:个体发育中细胞在 上显现 差异的过程; 4. 愈伤组织是通过 形成的,其细胞排列 ,高度 呈 状态的 细胞; 5. 植物组织培育的过程可简洁表示为: (脱分化)愈)伤组织 ( ) (生长) 新个体 6. 材料:植物的种类,材料的 和 等都会影响试验结果;菊花组织培育一般 选择 作材料; 7. 养分:常用的培育基是 培育基,其中含有的大量元素是 ,微量元 素是 ,有机物有甘氨酸,烟酸,肌醇,维生素,蔗糖等; 8. 激素:在培育基中需要添加 , 和 等植物激素, 其 , 等都影响结果; 9. 环境条件: PH, , 等环境条件; 菊花组培所需 PH,温度为 , ,
16、 光照条件为 为 ; 10. 配制各种母液: 将各种成分按配方比例配制成的浓缩液; 使用时依据母液的 运算用量,并加 稀释; 11. 配制培育基:应加入的物质有琼脂, 的母液,并用 ,大量元素,微量元素,有机物和植物激素 定容到 毫升;在菊花组织培育中,可以不添加 ,缘由是 菊花茎段组织培育比较简洁; 12. 灭菌:实行的灭菌方法是 ; 13发酵操作 13.1 前期预备:用 消毒工作台,点燃酒精灯;留意全部接种工作都必需在 酒精灯旁进行,器械使用前后都要用火焰灼烧 ; 接种操作:接种过程中插入外植体时 个外植 朝上,每个锥形瓶接种 体;外植体接种与细菌接种相像之处是 ; 第 6 页,共 17
17、页13.3 培育过程应当放在 学习必备 精品学问点 和 ; 中进行, 并定期进行消毒, 保持相宜的 移栽前应先打开培育瓶的 养 基;然后将幼苗移植到 行壮 苗;最终进行露天栽培; ,让其在培育间生长几日,然后用流水清洗根部培 等环境中生活一段时间, 进 离体细胞,组织,器官 (又叫 外植体 ) (脱分化)愈)伤组织 (再分化) 胚状体 (生长) 新个体 课题 2 月季的花药培育 1. 2. 3. 小孢子母细胞( 2n) ( )个精子 n ( )分裂 ( )分裂 ( )时期( n) ( )细胞( n) ( )细胞( n) 单核( )期( n) ( )细胞核( n) ( )细胞核( n) 单核(
18、)期( n) ( )分裂 双核期 育被子植物花粉的发育要经受 , 和 等阶段; 花粉是由花粉 母细胞经过 而形成的,因此花粉是 ; 在正常情形下,一个小孢子母细胞可以产生 个精子;在一枚花药中可以产生 个花粉; 4. 5. 产生花粉植物的两种途径 花药中的花粉 脱分化 ( ) 丛芽 诱导 生根 移栽 花药中的花粉 脱分化 ( ) 丛芽 诱导花粉植株能否胜利及诱导胜利率的高低,受多种因素影响,其中影主要因素是: 和 等; 6. 材料的选择: 从花药来看,应当选择(初花期,盛花期,晚花期)的花药; 从花粉来看,应当选择(四分体期,单核期,双核期,萌发期)的花粉; 从花蕾来看,应当选择(完全未开放,
19、略微开放,完全盛开)的花蕾; 7. 选择花药时一般通过 确定花粉发育时期, 此时需要对花粉细胞核进行染色, 最常 用的染色剂是 8. 和 ,它们分别可以将细胞核染成 色和 色; 在使用焙花青铬钒溶液时,需要第一将花药用 处理 20min;该试剂的配 制方法是将 按体积比为 的比例混合匀称; 9. 消毒后的花蕾,要在 条件下除去花萼,花瓣;剥取花药时,一是留意不要损耗花 第 7 页,共 17 页药 , 原 因 是 学习必备 精品学问点 ; 二 是 要 彻 底 除 去 花 丝 , 原 因 是 ; 个花药;花药培育利用 10. 剥取的花药要马上接种到 上;每个培育瓶接种 的培育基是 培育基, pH,
20、温度为 为 光照;在花药培育基中,用量最高的激素是 , 幼苗形成之前(需要,不需要) ;在诱导丛芽或胚状体培育基中, 用量最高的激素是 ;在诱导生根的培育基中, 用量最高的激素是 ; 11. 培育 20 30d 后,花药开裂,长出 上进行分化培育成再生植株;后者要尽快 织形成的植株,经常会显现 或释放出胚状体;前者仍要转移到 并转移到新的培育基上;通过愈伤组 的变化,因而需要鉴定和选择; 概念: 植 菊 原理:细胞的全能性 基础: 条件: 脱分化 再分化 植物组织培育的基本过程: 外植体 愈伤组织 胚状体 幼苗 花 外植体的选择 的 影响植物组织培育的因素: 养分,环境等 组 织 植物激素的用
21、法 培 养 温度, pH,光照等 物 月 试验操作: 制 备 MS 培育基 外植体消毒 接种 培育 移栽 栽培 组 织 被子植物花粉的发育: 花粉母细胞减数分裂小孢子母细胞四分体时期 培 单核期双核期精子 养 产生花粉植株的两种途径: 季 花药中的花粉 脱分化 胚状体 分化 丛芽 诱导 生根 移栽 的 花 花药中的花粉 脱分化 愈伤组织 再分化 药 丛芽 培 主要因素:材料的选择与培育基的组成 养 影响花药培育的因素: 重要因素:选择合适的花粉发育时期 影响因素: 亲本植株的生长条件, 低温处理和 接种密度等 材料的选取:确定花粉发育时期的方法 试验操作: 材料的消毒: 接种和培育: 鉴定和选
22、择: 第 8 页,共 17 页专题四 酶的争辩与应用 学习必备 精品学问点 课题 1 果胶酶在果汁生产中的作用 1果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一, 它是由 聚合而成的一 种高分子化合物,不溶于水;在果汁加工中,果胶不仅会影响出汁率,仍会使果汁浑浊;果 胶酶能够分解 ,瓦解植物细胞的 及 ,使榨取果汁更简洁, 而果胶分 解成可溶性的 ,也使得浑浊的果汁变得澄清; 果胶酶并不特指某一种酶, 而是分 解果胶的一类酶的总称,包括 , 和 等; 果胶酶的来源: , , 和 均能产生果 胶酶;由于 广泛的应用于 发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用量最大的酶制剂之一,被 果汁加工业; 2酶的活
23、性是指 的才能; 酶活性的高低可以用在确定条件下, 酶所催化 的某一化学反应的 来表示; 在科学争辩与工业生产中, 酶反应速度用单位时间内, 单位体积中 或 来表示; 3 , 和 等条件会影响酶的活性; 4.探究温度和 pH 对酶活性的影响: 在一恒定温度下, 通过设置 来确定酶 催化反应的最适 pH,在一恒定的 pH 下,通过设置 来确定没催化反应 的最适温度;在争辩温度和 pH 对唾液淀粉酶活性的影响时,通过用 检测 反应后溶液是否变蓝来判定酶是否有活性,本课题要求跟进一步,需要 测 定果胶酶的活性; 在测定果胶酶的活性时, 可通过测定 来判定果胶酶活性的 高低,获得的苹果汁越多,说明果胶
24、酶的活性越 ; 5. 探究果胶酶用量:生产果汁时,为了使果胶酶得到充分的 ,节省成本,需 要把握好酶的 ;该试验是在探究果胶酶的 和 之后进行的,试验 的变量不再是 或 ,而是 ;在这个试验中,除了酶的用量外,影响果汁产 量的因素仍有 , , , ; 课题 2 探讨加酶洗衣粉的洗剂成效 1 加 酶 洗 衣 粉 是 指 含 有 的 洗 衣 粉 , 目 前 常 用 的 酶 制 剂 有 四 类: , , 和 ;其 中,应用最广泛广泛,成效最明显的是 和 ; 2碱性蛋白酶能将血渍, 奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的 或小分子的 , 使污迹从衣物上脱落;脂肪酶,淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的
25、, 和 水解为小分子物质,使洗衣粉具有更 的去污才能; 3加酶洗衣粉的洗涤成效: ( 1)影响因素:使用加酶洗衣粉时, 影响酶活性的因素有 , 和 等,为此科学家通过 生产出了能够 , 和 的 酶,并制成酶制剂,使其与洗衣粉的其他成分隔离; ( 2)留意事项:衣物的洗涤,不仅要考 虑洗涤成效,仍要考虑衣物的 , 等因素; 4.试验设计:试验设计遵循的原就是 和 ;( 1)探究普 通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤成效的区分时,要把握 为自变量, 第 9 页,共 17 页学习必备 精品学问点 其他条件一样,同时一般洗衣粉处理污渍物与加酶洗衣粉处理污渍物形成 实 验;( 2)在探究加酶洗衣粉的最
26、适温度时, 是自变量,不同试验组之间 形成 ;( 3)在探究不同种类的加酶洗衣粉的洗涤成效时,变量 时 ,污渍应是完全相同的; 课题 3 酵母细胞的固定化 1高果糖浆的生产需要使用 ,它能将葡萄糖转化成果糖; 这种酶的 好, 可以连续发挥作用; 但是, 酶溶解于葡萄糖溶液后, 就无法从糖浆中回收, 造成很大的铺张; 2使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种 上,再将这些酶颗 粒装到一个 内,柱子底端装上分布着很多小孔的 ;酶颗粒无法通过筛 板的小孔,而反应溶液却可以自由出入;生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入, 使葡萄糖溶液流过反应柱,与 接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出; 反应柱能
27、连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量; 3固定化酶和固定化细胞是利用 或 方法将酶或细胞固定在 确定空间内的技术,包括 , 和 法;一般来说,酶 更适合接受 和 法固定, 而细胞多接受 法固定化; 这是 由于细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被 或 ,而个小的酶 简洁从 中漏出; 4 包 埋 法 法 固 定 化 细 胞 即 将 微 生 物 细 胞 包 埋 在 不 溶 于 水 的 中 ; 常 用 的 载 体 有 , , , 和 等; 5.配制海藻酸钠溶液时要边加热边搅拌;加热时要用 ,或者 加 热,反复几次, 直到海藻酸钠融解为止; 将融解好的海藻酸钠溶液先冷却至 ,再 与
28、缓 混合;混合时要充分 ,使其混合匀称, 再转移到 中, 慢的 到支配好的 溶液中,观看是否有 形成; 6.将凝胶珠加入用于发酵的葡萄糖溶液后,发觉 产生,同时又 味 散发; 专题学问结构 . .D. | . 1.o. . . . 1.o. 1.-. .D. . | .| 2 .D.| . . .:. .pH;. . . .1.o. . . o.D. . .; . ;. : . ;. .D1. . . :. . . . .1 . . .| .y :.1. 2 . .1. . 1 . . .: .;. . o. ;. .1 . . .第 10 页,共 17 页专题 5学习必备 精品学问点 DNA
29、和蛋白质技术 课题 1DNA 的粗提取与鉴定 导学诱思 1提取 DNA 的方法 提取生物大分子的基本思路是 , 等在物理和化学性质 ; 对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用 方面的差异,提取 DNA ,去除其他成分; 1)DNA 的溶解性 DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同, 利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 以达到分别目的; 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反, 图 5 1 是 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线,请依据曲线图, 摸索: 在什么浓度下, DNA 的溶解度最小? DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度是如何变化的? 如何通过把握 NaCl 溶液的浓度使
30、 DNA 在盐溶液中溶解或析出? 此外, DNA 不溶于 溶液, 但是细胞中的某些蛋白质就溶于酒精; 利用这一原 理,可以将 DNA 与蛋白质进一步的分别; 2) DNA 对酶,高温存洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 在 ,但是对 没 有影响;大多数蛋白质不能忍耐 60 80oC 的高温,而 DNA 以上才会变性;洗 涤剂能够瓦解 ,但对 DNA 没有影响; 会被染成 色, 3) DNA 的鉴定 在 条件下, DNA 遇 因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂; 2试验设计 1 ) 实 验 材 料 的 选 取 凡 是 含 有 的 生 物 材 料 都 可 以 考 虑 , 但 是 使 用 的生物组织,
31、胜利的可能性更大;在下面的生物材料中选取适合的试验材料: 鱼卵,猪肝,菜花(花椰菜) 菠菜,在液体培育基的大肠杆菌 摸索: 哺乳动物的红细胞的特点? ,香蕉,鸡血,哺乳动物的红细胞,猕猴桃,洋葱,豌豆, 2)破裂细胞,猎取含 DNA的滤液 动物细胞的破裂比较简洁 , 以鸡血细胞为例,在 鸡血细胞液中加入确定量的 ,同时用 搅拌, 过滤后收集滤液即可; 假如试验材 料是植物细胞,需要先用 溶解细胞膜;例如,提取洋葱的 DNA 时,在切碎的洋葱 中加入确定的 和 ,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液; 摸索: 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂? 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么? 第 11 页
32、,共 17 页学习必备 精品学问点 假如研磨不充分,会对试验结果产生怎样的影响 .此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分? 3)去除滤液中的杂质 阅读课本的三个方案, 摸索: 为什么反复地溶解与析出 DNA ,能够去除杂质? 方案二与方案三的原理有什么不同? 的 4) DNA 的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤 , 加入与滤液体积 ,冷却 ,这就是粗提取的 DNA ;用玻璃棒 ,静置 ,溶液中会显现 搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分; 取两支 20ml 的试管, 各加入物质的量浓度为 的 NaCl 溶液 5ml ,将丝状物放 入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解;然后,向两支试管
33、中各加入 4ml 的 ;混合匀称后,将试管置于 中加热 5min,待试管冷却后,比较两支 试管溶液颜色的变化,看看溶解有 DNA 的溶液是否变 ; 3操作提示 以血液为试验材料时,每 100ml 血液中需要加入 3g ,防止 ; 加入洗涤剂后, 动作要 , ,否就简洁产生大量的泡沫, 不利于后续步 骤地操作;加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要 ,以免 ,导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀; 二苯胺试剂要 ,否就会影响鉴定的成效; 4结果分析与评判 课题 2多聚酶链式反应扩增 DNA片段 导学诱思 1 PCR 原理 填写以下表格 参加的组分 在 DNA 复制中的作用 解旋酶 DNA 母链 合成子链
34、的原料 DNA 聚合酶 引物 DNA 的两条链是反向平行的,通常将 DNA 的羟基末端称为 ,而磷酸基团的末 端称为 ; DNA 聚合酶不能 开头合成 DNA ,而只能 ,因此, DNA 复制需要引物; DNA 的合成方向总是 ; 在 DNA 的复制过程中,复制的前提是 ;在体外可通 过把握 来实现;在 的温度范畴内, DNA 的双螺旋结构将解体,双链分 第 12 页,共 17 页开,这个过程称为 学习必备 精品学问点 原理,通过把握温度来控 ; PCR 利用了 DNA 的 制双链的解聚与结合; 由于 PCR 过程的温度高, 导致 DNA 聚合酶失活, 后来 的 DNA 聚合酶的发觉和应用,大
35、大增加了 PCR 的效率; PCR 反应需要在确定的缓冲溶液中供应: , , , ,同时通过把握温度使 DNA 复制在体外反复 进行; 2 PCR 的反应过程 PCR 一般要经受 循环,每次循环可以分为 , 和 三步; 从其次轮循环开头, 上一次循环的产物也作为模板参加反应, 并且由 延长而成 的 DNA 单链会与 结合,进行 DNA 的延长,这样, DNA 聚合酶只能 ,使这段固定长度的序列成指数扩增; 3试验操作 在试验室中,做 PCR 通常使用 量移液器, 按 PCR 反应体系的配方在 计好 PCR 仪的循环程序即可; 4操作提示 ,它是一种薄壁塑料管;详细操作时,用微 中依次加入各组分
36、, ,再参照下表的设置设 为防止外源 DNA 等因素的污染, PCR 试验中使用的 , , 以 及蒸馏水等在使用前必需进行 ; PCR 所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在 储存;使用前,将所需试剂从冰箱拿出,放在冰块上缓慢融解; 在微量离心管中添加 反应成分时,移液管上的枪头要 ; 课题 3 血红蛋白的提取和分别 【导学诱思】 1凝胶色谱法 凝胶色谱法也称做 ,是依据 分别蛋白质的有效方法; 凝胶实际上是一些由 构成的多孔球体, 在小球体内部有很多贯穿的通道, 相 对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同,相对分子质量较小的蛋白质 进 入凝胶内部的通道,路程 ,移动速度 ;而相对分子质量
37、的蛋白质 无法进入凝胶内部的通道,只能在 移动,路程 ,移动速度 ; 相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分别; 2缓冲溶液 缓冲溶液的作用是 溶解于水中配制而成的; 生物体内进行的各种生物化学 ; 缓冲溶液通常由 反应都是在确定的 pH 下进行的,例如:血浆的 pH 是 ,要在试验条件下精确 模拟生物体内的过程,必需保持体外的 3电泳 pH 与体内的基本一样; 电泳是指 ;很多重要的生物大分子, 如多肽,核酸等都具有可解离的基团,在确定的 pH 下,这些基团会带上 ;在 电场的作用下, 这些带电分子会向着与其所带电荷 的电极移动; 电泳利用了待分别 样品中各分子 以及分子本身的 , 的不同,
38、 使带电分子产生 不同的 ,从而实现样品中各种分子的分别; 两种常用的电泳方法是 和 ,在测定蛋白质分子 量时通常使用 ;蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移 率取决于 以及 等因素; 第 13 页,共 17 页学习必备 精品学问点 4蛋白质的提取和分别 蛋白质的提取和分别一般分为四步: , , 和 ; 5样品处理 血液由 和 组成,其中红细胞最多;红细胞具有 的特点;红细胞中有一种特别重要的蛋白质 ,其作用是 ,血红蛋白有 个肽链组成, 包括 ,其中每条肽 链围绕一个 ,磁基团可携带 ;血红蛋白因含有 显现红 色; 红细胞的洗涤 洗涤红细胞的目的是 ,采 集的血样要准时接受 分别红细胞, 然后用胶
39、头吸管吸出上层透亮的 , 将下层暗红色的 倒入烧杯, 再加入 ,缓慢搅拌 ,低速短时 间离心,如此重复洗涤三次,直至 ,说明红细胞已洗涤洁净; 血红蛋白的释放 在 和 作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白; 分别血红蛋白溶液 将搅拌好的混合溶液离心后, 试管中的溶液分为 4 层;第一层为 无色透亮的 ,第 2 层为白色薄层固体,是 ,第 3 层是红色透亮液体, 这是 ,第 4 层是其他杂质的暗红色沉淀物;将试管中的液体用滤纸过滤,除 去之溶性沉淀层,于分液漏斗中静置片刻后,分出下层的红色透亮液体; 透析 取 1mL 的血红蛋白溶液装入 中,将透析袋放入盛有 300mL 的物质的 量的浓度为 20m
40、mol/L 的 中,透析 12h;透析可以去除样品中 的杂 质,或用于更换样品的 ; 6凝胶色谱操作 第一步要制作 ,其次步要 ,由于 ,所以装 柱前需要依据色谱柱的内体积运算所需要的凝胶量; 在装填凝胶柱时, 不得有 存在; ,降低分别成效;第三步是 由于气泡会 ; 第 14 页,共 17 页学习必备 精品学问点 专题学问归纳 基础学问:提取 DNA 的方法 试验材料的选取 试验设计 破裂细胞,猎取含 DNA 的滤液 去除滤液中的杂质 DNA 和蛋白质技术 DNA 的粗提取 操作提示 DNA 的析出与鉴定 与鉴定 以血液为材料要防止血液凝固 加入洗涤剂后,动作要轻缓;加入酒精 和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓 二苯胺试剂要现配现用 结果分析与评判 课题延长 PCR 原理 多聚酶链式反 基础学问 PCR 的反应过程 试验操作 应扩增 DNA 操作提示 片段 结果分析与评判 课题延长 凝胶色谱法 血红蛋白的提 基础学问 缓冲溶液 取和分别 电泳 样品处理 试验操作 凝胶色谱操作 SDS聚丙烯酰凝胶电泳 红细胞的洗涤 试验操作 色谱主填料的处理 凝胶色谱柱的装填 蛋白质的分别 结果分析与评判 课题延长 第 15 页,共 17 页学习必备 精品学问点 专题六 植物有效成分的提取 课题 1
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