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文档简介
1、文档编码 : CZ3H10X8U3Q9 HN10I5W5L5N2 ZA10X3D5W2I10教学预备 1. 教学目标 学问与技能:明白有关培育基的基础学问;把握培育基的分类,成分及用途,无菌 技术等基本操作技术; 过程与方法:分析试验思路的确定和形成的缘由,分析试验流程,对比前面的试验 设计,归纳共性,分析差异,增加印象; 情感,态度与价值观: 2. 教学重点 /难点 形成勇于实践,严谨求实的科学态度和科学精神; 教学重点:培育基的分类,成分及用途及无菌技术的操作 教学难点:无菌技术的操作 3. 教学用具 多媒体,板书 4. 标签 教学过程 引入新课 在传统发酵技术的应用中,都利用了微生物的发
2、酵作用,其中的微生物来自于制作过 程中的自然感染;而在工业化生产中,为了提高发酵的质量,需要获得优良菌种,并保持 发酵菌种的纯度;这就要涉及到微生物的培育,分别,鉴别等基本技术;现在我们开头学 习微生物的培育和应用专题; 课题背景 到目前为止,几十项 Nobel 生理学和医学奖,化学奖都与微生物学有关; 微生物基础学问:微生物的分类见课件; 进行新课 1微生物基础学问 微生物包括五类:病毒,细菌,放线菌,真菌,原生动物 第 1 页,共 9 页特点:结构都相当简洁 ,个体多数特殊微小 .通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到, 有的甚至没有细胞结构 .且体内一般不含有叶绿素 1.培育基 .不能进
3、行光合作用 . 培育基(培育液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁衍使用的混合养分液; 培育基的类型和用途 ( 1)按物理状态来分:培育基可分为固体培育基和液体培育基;其中固体培育基用于 菌种分别,鉴定菌落等; ( 2)按功能来分,可分为挑选培育基和鉴别培育基; ( 3)按成分来分,可分为自然培育基和合成培育基; 按物理状态来分 1.液体培育基:增菌 2.固体培育基:菌落,菌苔 纯化,增菌 3.半固体培育基:半固体培育基:动力检测,保种 可用于观看微生物的运动,储存菌种 摸索:琼脂的来自哪种生物?从红藻中提取的 化学成分是什么?多糖 在配制培育基中有什么用途?用作为凝固剂 按功能来分 1
4、.挑选培育基:回答以下培育基可以分别获得哪种微生物或细胞? 加入青霉素的培育基 :分别酵母菌,霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培育基 :分别金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培育基 : 分别固氮菌 不加含碳有机物的无碳培育基 :分别自养型微生物 第 2 页,共 9 页加入青霉素等抗生素的培育基 : 分别导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤,次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培育基 :分别杂交瘤细胞 2. 鉴别培育基:回答以下培育基可以鉴别哪种微生物? 加入伊红美蓝的培育基 :鉴别大肠杆菌 加入尿素酚红的培育基 :鉴别尿素分解菌 3.用途: 挑选培育基 :挑选并挑选培育某种微生物 鉴别培育基 : 用来鉴别某种微
5、生物的存在 按成分来分 1.合成培育基 :依据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的; 合成培育基主要成分是氨基酸,维生素,碳水化合物,无机盐和其它一些帮忙物质; 2.自然培育基:自然培育基有血清,血浆,和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液); 3.人工合成培育基只能爱护细胞生存,要想使细胞生长和繁衍,仍需补充确定量的天 然培育基(如血清); 血清中含有:多种蛋白质(白蛋白,球蛋白,铁蛋白等)多种金属离子; 激素;促贴附物质,如纤粘蛋白,冷析球蛋白,胶原等; 各种生长因子转移蛋白不明成分 培育基分类归纳总结 培育基的类型及其应用: 第 3 页,共 9 页典例精析 例 1. 连线题: 例
6、2. 以下选项中,不是使用挑选培育基培育微生物的目的的是 A 除去其他微生物 B使需要的微生物大量繁衍 C通过表现特殊性状,与其他微生物相区分 D可以增加要培育的微生物的浓度 答案: C解析 鉴别培育基的作用是通过微生物表现特殊性状,与其他微生物相区分 ; 老师引导同学摸索:摸索:微生物 “吃 ”什么? 从细胞的化学元素组成来看,培育基中为什么都含有这些养分成分? C,H ,O,N , P, S 是构成细胞原生质的基本元素,约占原生质总量的 97以上; 培育基的成分 第 4 页,共 9 页一 .培育基:微生物生存的环境和养分物质 1.基本成分: ( 1)碳源:分无机碳源: CO2, CO32-
7、,HCO3- 主要用来培育自养微生物 有机碳源:牛肉膏,蛋白胨等,主要用来培育异养微生物 ( 2)氮源:分无机氮源: NH4 , NO3- (为硝化细菌供应 N 源和能源) 有机氮源:牛肉膏,蛋白胨,酵母膏,尿素等 老师强调:含 C, H, O, N 的有机物是异养型微生物的碳源,氮源,能源; 2.特殊养分:维生素,碱基等(生长因子)(牛肉膏,酵母膏,蛋白胨中含有) ,氧气的需求: 摸索:不同的微生物培育时所需要的培育基成分相同吗? 不同的微生物往往需要接受不同的培育基配方 参考教材附录 3 内容 老师总结:不管哪种培育基,一般都含有水,碳源,和氮源, 无机盐等养分物质,另 外仍需要中意微生物
8、生长对 pH,特殊养分物质 ,例如 :生长因子 即细菌生长必需,而自身不 能合成的化合物 ,如维生素,某些氨基酸,嘌呤,嘧啶 要求; 以及氧气,二氧化碳,渗透压等的 牛肉膏蛋白胨培育基是一种应用最广泛和最一般的细菌基础培育基; 1000ml 牛肉膏蛋白胨培育基的配方; 同学自主分析其养分构成? 摸索探究: 1.牛肉膏和蛋白胨主要为微生物供应哪些养分物质? 第 5 页,共 9 页糖 ,维生素 和 有机氮 等养分物质; 2.培育乳酸杆菌时培育基需要特殊添加什么物质? 维生素 3.培育霉菌时需要如何调剂培育基的 4.培育细菌时需要如何调剂培育基的 二 . 配制原就 pH?将培育基 pH 调剂为 酸性
9、 pH?将 pH 调剂为 中性或微碱性 ; 目的要明确:依据培育的微生物种类,培育的目的等确定培育基的类型和配制量; 养分要和谐:培育基中各种养分物质的浓度和比例要相宜;例如:碳氮比 4 1 时, 谷氨酸棒状杆菌大量繁衍而产生谷氨酸少;碳氮比为 成量大增; 3 1 时,菌体繁衍受抑制而谷氨酸合 pH 要相宜:细菌培育基 pH 中性或偏碱性,霉菌培育基呈酸性; 典例精析 例 3.牛肉膏与蛋白胨中的牛肉膏能为细菌供应的养分成分是( ) A. 无机盐 B. 供应碳源,氮源等 C.不能为微生物供应生长因子 D. 只是碳源 答案: B ; 解析 牛肉膏与蛋白胨培育基是一种应用特殊广泛的自然培育基 ,其中
10、的牛肉膏为微生 物供应碳源,磷酸盐和维生素 ,蛋白胨主要供应氮源和维生素 ,仍可以供应生长因子 . 2.无菌技术 探究新知:同学阅读课本 消毒方法: “无菌技术 ”,争论回答以下问题: ( 1)日常生活常常用到的是 煮沸 消毒法; ( 2)对一些不耐高温的液体,就使用 巴氏 消毒法(作简要介绍); ( 3)对接种室,接种箱或超净工作台第一喷洒 果,然后使用 紫外线 进行物理消毒; 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒效 ( 4)试验操作者的双手使用 酒精 进行消毒; ( 5)饮水水源用氯气 进行消毒; 灭菌方法: ( 1)接种环,接种针,试管口等使用 灼烧 灭菌法; ( 2)玻璃器皿,金属用具等使
11、用 干热 灭菌法,所用器械是 干热灭菌箱 ; ( 3)培育基,无菌水等使用 高压蒸汽 灭菌法,所用器械是 高压蒸汽灭菌锅 ; ( 4)表面灭菌和空气灭菌等使用 紫外线 灭菌法,所用器械是 紫外灯 ; 2.1.消毒与灭菌:获得纯洁培育物的关键是 防止外来杂菌的入侵; 老师总结:课件出现消毒与灭菌的器材和区分;补充芽孢和孢子(课件出现) 芽孢:有些细菌在确定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢;芽 孢的壁很厚,对干旱,低温,高温等恶劣的环境有很强的抗击力;例如,有的细菌的芽孢, 煮沸 3 小时以后才死亡;芽孢又小又轻,可以随风飘散;当环境相宜(如温度,水分相宜) 的时候,芽孢又可以萌
12、发,形成一个细菌; 孢子:细菌,原生动物,真菌和植物等产生的一种有繁衍作用的生殖细胞;能直接发 育成新个体; 摸索:请你判定以下材料或用具是否需要消毒或灭菌;假如需要,请挑选合适的方法; ( 1) 培育细菌用的培育基与培育皿 高压蒸汽灭菌 ( 2) 玻璃棒,试管,烧瓶和吸管 高压蒸汽灭菌或灼烧灭菌 ( 3) 试验操作者的双手 酒精消毒 典例精析 例 4.灭菌的标准是( ); A. 杀死全部的病原微生物 B. 杀死全部的微生物 C. 杀死全部微生物的细胞,芽孢和孢子 D. 使病原菌不生长 答案: C 解析 灭菌是指使用猛烈的理化因素,杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子; 2.2. 无菌技术
13、的范畴: 1.无菌技术包括: ( 1)对试验操作空间,操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ; ( 2)将培育器皿,接种用具和培育基等器具进行 灭菌 ; ( 3)为防止四周微生物污染,试验操作应在 酒精灯火焰邻近 旁进行; ( 4)防止已灭菌处理的材料用具与 四周物品 相接触; 2.无菌范畴:试验操作空间消毒,操作者的手,衣着消毒 试验用具灭菌,试验操作过程,酒精灯旁操作 摸索:无菌技术除了防止培育物被污染外,仍具有的目的是? 防止感染试验操作者 ; 典例精析 例 5.将配制好的培育基进行灭菌应用 A 灼烧灭菌 B 高压蒸汽灭菌 C干热灭菌 D 煮沸灭菌 答案: B 第 8 页,共 9 页解析 培育基要用来培育微生物;,所以要严格无菌,包括芽孢和孢子,即灭菌; 课堂小结 本节课可以结合前面果酒果醋制作等实际生产实例导
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