维生素类药物分析(3)课件

1、关于维生素类药物的分析 (3)第一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月维生素Frederick Gowland Hopkin Christiaan Eijkman 1929 Nobel PrizeGeorge Wald 1967 Nobel Prize第二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月教学目标掌握维生素A与维生素B1的结构、性质及鉴别试验；熟悉紫外三点校正法测定维生素A含量的原理及计算；第三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月分类 VitA、D2、D3、 E、K1 等 脂溶性水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。按溶解

2、度分第四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月维生素A结构-H 维生素A醇-COCH3 维生素A醋酸酯-COC15H31 维生素A棕榈酸酯R :第五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构VitA2VitA3第六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构鲸醇第七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质溶解性紫外吸收不稳定性与三氯化锑反应325328nm第八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质 或有金属离子存在时氧化共轭多烯侧链：易被氧化第九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月环氧化物VitA醛VitA酸结构与性质第十张，P

3、PT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验三氯化锑反应 (Carr-Price反应)条件：无水无醇CHCl3紫红蓝色3SbClVitA第十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验第十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验维生素A ChP（2010）鉴别 取本品1滴，加三氯甲烷10ml振摇使溶解；取2滴，加三氯甲烷2ml与25%三氯化锑的三氯甲烷溶液0.5ml，即显蓝色，渐变成紫红色。三氯化锑反应第十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验（BP（2000）UV法max为326nm一个吸收峰max为350390nm三个吸收峰第十四张，PPT

4、共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验第十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值BP 对照品法 显色剂 三氯化锑TLC法第十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定立体异构体氧化降解产物合成中间体UV法(三点校正法)维生素A2维生素A3环氧化物维生素A醛维生素A酸第十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定 维生素A的含量用生物效价即国际单位（IU/g）来表示。规定：效价1 IU=0.344g 全反式维生素A醋酸酯1 IU=0.300g 全反式维生素A醇每1g全反式维生素A醋酸酯/醇相当于多少国

5、际单位？第十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定换算因子意义：单位E 数值所相当的效价。%1cm第十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定第二十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定第二十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定三点校正法（法定方法）1. 原理：（1）杂质的吸收在310-340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。第二十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定2. 波长的选择：（1） 1 VitA的max（328nm或325nm）（2） 2 3 分

6、别在1的两侧各选一点第二十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定测定对象：VitA醋酸酯= 12nm测定对象：VitA醇1=325nm, 2=310nm, 3=334nm第一法:等波长差法第二法:等吸收比法第二十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定测定法（1）基本步骤:第一步 A的选择选择依据：所选A值中杂质的干扰已基本消除。第二十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定第二步 求注意： C为混合样品的浓度 第二十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第三步 求效价含量测定第四步：求标示量第二十七张，PPT共一百八十一页，创作于2

7、022年6月含量测定 方法：（2） 第一法维生素A醋酸酯第二十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定 判断 是否在326329nm之间在326329nm之间改用第二法是否 求算 并与规定值比较第二十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定 规定值 差值第三十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月 判断差值是否超过规定值的有一个以上超过无超过 计算 A328（校正） 用A328计算含量测定第三十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定第三十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月03%15%3%第二法第二法含量测定第三十三张，PP

8、T共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定适用于维生素A醇（等吸收比法） 第一法无法消除杂质干扰时用此法 皂化法、6/7A法 （3）第二法第三十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定水溶性脂溶性第三十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定 判断max是否在323327nm之间取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定 计算是否第三十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定 判断 A300 /A325 是否大于0.73是否取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定 计算A325(校正)第三十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定第三十八张

9、，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定03%3%第三十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定 VitAD胶丸中VitA的含量测定 精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下（平均装量0.07985g/丸）的内容物 0.1287g 至10ml烧杯中，加环己烷溶解并定量转移至50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一50 ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为第四十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定A300 ：0.374A316 ：0

10、.592A328 ：0.663A340 ：0.553A360 ：0.228A300 /A328 ：0.564A316/A328 ：0.893A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.834A360/A328 ：0.344 求本品中维生素A占标示量的百分含量？第四十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月A300 /A328 ：0.564A316/A328 ：0.893A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.834A360/A328 ：0.344 0.555 0.907 1.000 0.811 0.299 + 0.010.01 0 + 0.02 + 0.

11、04 =A328(校正) = 3.52 ( 2A328 - A316 - A340 ) =3.52 ( 20.663 0.592 0.553 ) =0.637含量测定第四十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月A328(校正) A328(实测)A328(实测)100 =0.637 0.6630.663100= -3.92E1%1cm( 328nm ) =A328(校正)100ms/D=0.6371000.1287/1250= 61.87含量测定第四十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月供试品中维生素A效价= E1%1cm( 328nm )1900= 61.87 1900

12、=117553（IU/g ）标示量% =VA效价(IU/g) 每丸内容物平均装量(g/丸)标示量( IU/丸)100%=1175530.0798510000100%= 93.9%含量测定第四十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定三氯化锑比色法：优点：简便、快速max 618nm620nm标准曲线法缺点呈色不稳定 （510s内）水分干扰与标准曲线温差1专属性差三氯化锑有腐蚀性蓝色+3SbClVitA第四十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月氨基嘧啶环CH2噻唑环(季铵碱)HClCl-结构维生素B1（硫胺）12345615432第四十六张，PPT共一百八十一页，创作

13、于2022年6月结构与性质溶解性紫外吸收硫色素反应氯化物、硫元素max = 246nm与生物碱沉淀剂反应第四十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验维生素B1 ChP（2010）鉴别 (1)取本品约5mg，加氢氧化钠试液2.5ml溶解后，加铁氰化钾试液0.5ml与正丁醇5ml，强力振摇2分钟，放置使分层，上面的醇层显强烈的蓝色荧光；加酸使成酸性，荧光即消失；再加碱使成碱性，荧光又显出。硫色素荧光反应第四十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第四十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月硫色素O环合- 2H第五十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月

14、鉴别试验生物碱沉淀剂反应Vit B1K2HgI4黄色I2-KI红色硅钨酸白色苦酮酸白色扇形第五十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验氯化物反应(Chp2010)硫元素反应第五十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定电位滴定法（一）非水减量法第五十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月反应摩尔比为1：2含量测定第五十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月（二）UV含量测定第五十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定片剂、注射剂= 421（每片）相当于标示量的%=A = ECL规格g/片gChP2010WEA%cmD100

15、11%100标示量平均片重第五十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定（每ml）相当于标示量的%=规格g/mlml%VEA%cm100110011标示量稀释倍数第五十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定原理荧光硫色素异丁醇铁氰化钾1VitBNaOH（三）硫色素荧光法 USP第五十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定方法（三）硫色素荧光法 USP配氧化试剂、对照品、供试品溶液测定对照品供试品空白计算第五十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月特点（1）灵敏度高，线性范围宽（2）代谢产物不干扰，适用于 体液分析含量测定第六十张，P

16、PT共一百八十一页，创作于2022年6月结构L抗坏血酸维生素C第六十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质1、易溶于水2、水溶液呈酸性溶解性第六十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质C3OH的pKa = 4.17C2OH的pKa = 11.57一元酸酸性第六十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质二烯醇结构二酮基结构二烯醇结构还原性第六十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质有活性有活性无活性第六十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质糖类的显色反应50结构与糖类相似具有糖的性质第六十六张，P

17、PT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质L(+)抗坏血酸活性最强手性C（C4、C5）*光学活性第六十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质与碱反应水解性第六十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构与性质第六十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验去氢抗坏血酸OVitC与氧化剂的反应第七十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验1、与AgNO3反应2、与2，6 - 二氯靛酚反应(ChP2010)氧化型玫瑰红色还原型蓝色OH(ChP2010)第七十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月（玫瑰色）（无色）鉴别试验第

18、七十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月3.其他氧化剂的反应：亚甲蓝或高锰酸钾 试剂褪色碱性酒石酸铜 砖红色沉淀磷钼酸 钼蓝鉴别试验第七十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月或盐酸50吡咯USP鉴别试验糖类的反应第七十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验第七十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月（蓝色）(糠醛)（戊糖）50(吡咯)第七十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月BP0.01mol/L HCl鉴别试验UV薄层色谱法Chp 2010 Vit C制剂第七十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月 1.溶液的澄清度与

19、颜色：有色杂质 分光光度法2.铁、铜离子：原子吸收分光光度法 3.草酸：比浊杂质检查第七十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定指示剂 淀粉指示液碘量法原理第七十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定H+第八十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定 取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。方法第八十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含

20、量测定（1）酸性环境（2）新沸冷H2O减慢VitC被O2氧化速度（3）立即滴定 赶走水中O2减少O2的干扰方法第八十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月（4）附加剂干扰的排除片剂 滑石粉 过滤注射剂 抗氧剂 丙酮甲醛Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5 含量测定第八十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月CHHOOaS3aSO+H2NHON2252HONHCOS3a含量测定第八十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月USPJP酚亚胺二氯靛酚，-62VitC含量测定2,6-二氯靛酚钠滴定法原理第八十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年

21、6月自身指示终点法含量测定方法第八十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月（2）快速滴定 2min内 （1）酸性环境 HPO3-HAc 稳定VitC防止其他还原性物质干扰（3）剩余比色测定 （定量过量）（测剩余染料）含量测定讨论第八十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月（4）缺点 需经常标定贮存一周不稳定干扰多 氧化力较强含量测定第八十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月苯并二氢吡喃醇结构维生素E12345678第八十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月名 称R1R2相对活性-生育酚-生育酚 -生育酚 -生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.0

22、0.50.20.1*结构第九十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月dl生育酚醋酸酯结构第九十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链1、UV2、乙酰化的酚羟基 易水解O醌型化合物生育酚-+or OHHVitE杂质，需检查结构与性质第九十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验O生育红硝酸反应橙红色7515HNO3VitE生育酚第九十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月（橙红色）生育红生育酚HNO3鉴别试验强氧化剂第九十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验三氯化铁联吡啶反应第九十五张，PPT共一百

23、八十一页，创作于2022年6月生育酚对-生育醌O弱氧化剂鉴别试验第九十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月血红色鉴别试验第九十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月 = 41.045.5max = 284nmmin = 254nm0.01%无水乙醇中UV鉴别试验第九十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月薄层板 硅胶G展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1）显色剂 硫酸（105 5） VitE Rf = 0.7-生育酚 Rf = 0.5-生育醌 Rf = 0.9鉴别试验薄层色谱法第九十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月游离生育酚 原理酸度 以NaOH滴定

24、液（0.1mol/L）体积控制。杂质检查第一百张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月（M生育酚= 430.8） 取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过 1.0ml。例杂质检查第一百零一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月2.15限量杂质检查第一百零二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月GC法（法定方法）GC特点选择性好灵敏度高速度快分离效能好挥发性低、不稳定、极性强衍生化易受样品蒸气压限制含量测定第一百零三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月载气N2固定液硅

25、酮（OV-17）担体硅藻土或高分子多孔小球柱温265检测器氢火焰离子化检测器(FID)内标正三十二烷 n 500 R2内标法加校正因子色谱条件含量测定第一百零四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月内标法供试液（样品+内标）内标物对照液（对照+内标）是样品中不存在的物质与被测组分峰靠近能与各组分完全分离与被测组分的量接近含量测定第一百零五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月HPLC法 外标法 此外，还有铈量法、比色法和荧光法含量测定第一百零六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月维生素D2(麦角骨化醇)结构维生素D123456789101112131415161718

26、19202122232425262728第一百零七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月结构维生素D维生素D3（骨化醇）123456789101112131415161718192021222324252627第一百零八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月开环的甾体：具有甾类化合物的显色反应，可用于鉴别。手性碳原子：具有旋光性，可用于鉴别。多烯：不稳定性、紫外吸收。结构与性质第一百零九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月显色反应醋酐-硫酸反应 D2 黄 红 紫 绿 D3 黄 红 紫、蓝绿 绿 三氯化锑反应 橙红色渐变粉红三氯化铁反应 橙黄色二氯丙醇和乙酰氯反应 绿色

27、鉴别试验第一百一十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月比旋度鉴别维生素D2维生素D3溶 剂 浓 度 比旋度值无水乙醇无水乙醇40mg/ml5mg/ml+102.5+107.5+105+112注意事项：应于容器开启30分钟内取样， 在溶液配制后30分钟内测定。鉴别试验第一百一十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月如何区别Vit D2 和Vit D3鉴别试验96%乙醇溶液乙醇、85%硫酸红色 max570nm黄色 max495nmVit D2Vit D3第一百一十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验鉴别(1)取本品约0.5mg，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋

28、酐0.3ml与硫酸0.1ml，振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后成绿色。 (2)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集452图）一致。维生素D2 ChP (2010)第一百一十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月鉴别试验鉴别(1)取本品约0.5mg，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫酸0.1ml，振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色、蓝绿色，最后成绿色。 (2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集453图）一致。 (3)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品

29、溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。维生素D3 ChP (2010)第一百一十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月杂质检查维生素D2中麦角甾醇的检查：加洋地黄皂苷溶液，混合，放置18h不得发生浑浊或沉淀。前维生素D的光照产物第一百一十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月含量测定 中国药典（2010年版）采用正相高效液相色谱法测定维生素D的含量，定量方法为内标法，内标物为邻苯二甲酸二甲酯，该法分为三个方法。第一百一十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月 需要检查麦角甾醇杂质的药物是A. Vit AB. Vit EC. Vit D2D. Vit

30、CE. Vit B1D练习第一百一十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月 维生素B1注射液含量测定的方法是A. 非水溶液滴定法B. 异烟肼比色法C. 紫外分光光度法D. Kober反应比色法E. 碘量法D练习第一百一十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月练习A.亚硝基铁氰化钠反应 B.硫色素反应 C.硝酸反应 D.三氯化锑反应 E.硝酸银试液的反应 1. 维生素C 2. 维生素E 3. 维生素B1 4. 维生素AECBD第一百一十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月练习A.氨基嘧啶环与噻唑环 B.共轭多烯侧链 C.烯二醇和内酯环 D.环状酰脲 E.苯并二氢吡

31、喃 1. 抗坏血酸 2. 维生素E 3. 维生素B1 4. 维生素ACEAB第一百二十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月练习A.非水溶液滴定法 B.GC C.HPLC D.碘量法 E.三点校正法 1. 抗坏血酸注射液 2. 维生素E 3. 维生素B1原料药 4. 维生素ADBAE第一百二十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百二十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百二十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百二十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百二十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百二十六张，P

32、PT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百二十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百二十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百二十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十六张，PPT共一百八十一页，创

33、作于2022年6月第一百三十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百三十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十一张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十二张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十三张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十四张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十五张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十六张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十七张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十八张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百四十九张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百五十张，PPT共一百八十一页，创作于2022年6月第一百五十一张