中文cba实验步骤

1、CBATM(多重液相蛋白定量技术)操作流程以Th1/Th2/Th17 细胞因子检测试剂盒(货号:560484)为例试剂盒组分试验流程总览配套试剂除 BD CBA 人 Th1/Th2/Th17 细胞因子检测试剂盒提供的试剂外，还需要以下 CBATM(多重液相蛋白定量技术)操作流程以Th1/Th2/Th17 细胞因子检测试剂盒(货号:560484)为例试剂盒组分试验流程总览配套试剂除 BD CBA 人 Th1/Th2/Th17 细胞因子检测试剂盒提供的试剂外，还需要以下 步描所需时1Th1/Th2/Th17 细胞因子标15分2混合 Th1/Th2/Th17 细胞因子捕10分3捕获微球、样本、检测抗

2、体混合后共3小4明详见15分5捕获微球/样本/检测抗体复合15分630s/样7数据分析（FCAP 10分标试容1瓶0.81瓶0.81瓶0.8 1瓶0.8HumanTNFCapture1瓶0.81瓶0.81瓶0.8BHuman Th1/Th2/Th17 PE Detection 1瓶4.0C标准Human Th1/Th2/Th17 Cytokine 2 瓶, 0.2 mL 冻D仪器调校微Cytometer Setup 1瓶1.5itiveControl1管0.51管0.5F洗Wash1G稀释Assay1H增强Serum Enhancement 1及大于 680 nm 发射光的流式细胞仪。下表列举

3、了部分可用于 CBA 检测的流式1275 mm BD FalconTM流式上样管或同类产15 及大于 680 nm 发射光的流式细胞仪。下表列举了部分可用于 CBA 检测的流式1275 mm BD FalconTM流式上样管或同类产15 ml：FCAP (PC机版本：641488 / MacBD CalibriteTM 3色微球（BD CalibriteTM APC 微球（货号：340487）（双激光BD FACSCalibur 机器使用实验操作细胞因子标准将一瓶冻干的细胞因子标准品小球转移至15ml锥形离心管中， 标记为最高浓度标准品（5000pg/ml；用2ml Assay Diluent

4、 稀释标准品，室温平衡至少15分钟取9支12x75mm流式管，分别标记梯度稀释倍数每管加入300l Assay 从最高浓度标准品开始逐个加入300l倍比稀释液，梯度稀释标准品，如下图所示：（从最高度标准品管取300l溶液至1：2管，吹打混匀，随后从1：2管取300l溶液至1：4管吹打混仪器型参分群参BDFACSVerseflowCBABDAccuriC6flowBD FACSArrayTM BDFACSCantoIIflowBDLSRFortessaflowBDFACSAriaIIIcellBD FACSCalibur flow cytometer（单激光BD FACSCalibur flow

5、 cytometer（双激光此类推，直至1：256管最后取1支12x75mm流式上样管中加入300l Assay Diluent指控管（0pg此类推，直至1：256管最后取1支12x75mm流式上样管中加入300l Assay Diluent指控管（0pg/ml2. 混合细胞因子捕获混合微确定实验样本数（含所有标准品对照，共计18管对照及检测样本，如8个待测样本，9个标准品，1混合前每种捕获微球需vertex充分涡旋5-15秒（足，建议每吸取一种微球之前充分混匀此微球溶液按照10l/样本吸取适量的捕获微球，如样本数为18，则每种细胞因子捕获微球的量为将所有微球混合于一支流式管中，标记为“混合微

6、球”充分涡旋混匀重悬微或血浆，必须做此步骤。其他类型样本，此步骤可选将混合好的捕获微球室温200g，离心5分钟吸取上清，加入与步骤1）中“混合微球”相同增强液，涡旋混匀室温避光孵育30分钟（随后直接作为“混合微球”与样本共孵育3. 样本孵充分涡旋重悬好的“混合微球”，每个实验管加入标准品管中每管加入50l样本管中每管加入50l待测样所有实验管中加入50l PE室温避光孵育3小时4. 上机检每管加入1ml3. 样本孵充分涡旋重悬好的“混合微球”，每个实验管加入标准品管中每管加入50l样本管中每管加入50l待测样所有实验管中加入50l PE室温避光孵育3小时4. 上机检每管加入1ml 吸去或轻柔倒掉上清液，每管加入300