益母草中益母草碱的HPLC检测

1、益母草中益母草碱的HPLC检测【关键词】益母草；益母草碱；高效液相色谱法益母草为唇形科植物益母草(LenurusheterphyllusSeet)的枯燥地上局部，以花蕾期的地上局部的干品或鲜品入药，性味苦、辛、微寒，归肝、心包经，具有活血调经、化瘀生新、收缩子宫之成效，主治月经不调、胎漏难产、行经腹痛及产后淤阻等证，素有“血家圣药、“经产良药之称。益母草中主要含有生物碱类、二萜类、甾醇、黄酮类、有机酸、脂肪酸类等成分。益母草中生物碱以益母草碱和水苏碱为主1。药理作用研究证明，益母草中的主要有效成分益母草碱(lenurine)具有显著的直接扩张外周血管、增加血流量、抗血小板聚集活性等作用2，可有

2、效的降低血液黏度和进步红细胞的变形才能，还可调经止血，保护心肌缺血再灌注损伤。在?中国药典?3及各级别标准中，益母草药材和益母草制剂的质量控制均是以总生物碱为指标，文献4，5那么采用雷氏盐剩余比色法测定益母草中盐酸水苏碱。而对于益母草碱的含量却没有要求，这样不能保证益母草及其制剂的平安、有效。以益母草为原料的多种制剂，如益母草胶囊、益母草冲剂、益母草口服液、益母草浸膏、益母草片等都是临床上的常用品,除个别品种在?中国药典?2022年版增加了含量测定工程外,多数品种无统一标准,有的品种那么无含量测定要求,使市售的产品质量得不到保证。所以建立一个以益母草碱为指标直接检测益母草药材及其制剂的统一的质

3、量标准是很有意义的。本文尝试建立益母草碱的高效液相色谱直接检测方法。1仪器与材料高效液相色谱仪LabAlliane，LabAlliane紫外检测器del5000，Phenenex18柱(4.6250，5),Anastar色谱工作站；紫外分光光度计，SHIADZU公司，UV2401P。甲醇为一级色谱纯；益母草碱对照品购于安徽省新星药物开发有限责任公司，纯度为99；益母草购于天津市南开区协和药店，经我校中药学院中药鉴定教研室张丽娟副教授鉴定。2方法与结果2.1紫外光谱最大吸收测定在200400n之间进展全波长扫描，扫描图如图1所示，益母草碱在215n和277n处均有吸收峰，最大吸收277n，应选用

4、277n作为高效液相测定的波长。图1全波长扫描图略Fig.1avelengthsanningftherrtalkalids图2对照品HPL分析图略Fig.2HPLhratgrafreferenesubstane2.4样品溶液的制备精细称取益母草提取物粗品2.2g，溶于10L流动相中，摇匀即得。2.5样品溶液的测定取样品溶液用微孔滤膜滤过后，按“2.2.1项下的色谱条件进样测定，测得溶液的峰面积为1099398，计算质量分数为10.82，在原药材中的质量分数为0.015。转贴于论文联盟.ll.2.6精细度试验取同一样品溶液，按“2.2.1项色谱条件下重复进样6次，测得峰面积分别为1106469、

5、1110843、1099260、1106190、1103044、1112296，平均峰面积为1106350.3，计算得RSD=0.98%。说明仪器精细度符合要求。2.7稳定性试验取同一样品溶液于室温下在配制后的0、2、4、6、8、10、12h，按“2.2.1项下的色谱条件进样测定，测得峰面积分别为1108469、1099351、1120020、1123215、1110362、1109472、1137277，平均峰面积为1115452.3，结果RSD1.11，可见供试品溶液在室温条件下12h内稳定。2.9加样回收率试验取益母草碱粗制品3.6g,用流动相溶解后，精细参加益母草碱对照品0.4g，溶液

6、适量，置于25L容量瓶中，以流动相定容至刻度，摇匀。再按样品测定方法操作测定，测得6次的峰面积分别为790165、786492、807343、810706、799324、813338，平均峰面积为801228，结果计算回收率为100.08，RSD1.54。3讨论3.1波长确实定在200400n之间进展全波长扫描，发现有两个吸收峰，215n和277n，但是215n有可能受到甲醇吸收的影响，而且在277n处没有其他成分的干扰，所以选择最大吸收波长277n作为检测波长。3.3本文是在完成了别离益母草碱和水苏碱的根底上实现了益母草碱的高效液相色谱的直接检测方法，为益母草药材的质量控制及其他益母草制剂的质量控制提供了根据。该方法简便易行，结果准确可靠。【参考文献】1郑虎占,董泽宏,佘靖.中药现代研究与应用.北京:学苑出版社,1998:3803.2丁伯平，熊莺，徐朝阳，等.益母草碱对急性血瘀证大鼠血液流变学的影响J.中国中医药科技,2022，11(1):36.3国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部S.北京：化学工业出版社，2022：203