广东版生物高中总复习专题24微生物的应用（试题练）教学讲练

1、高中生物总复习PAGE PAGE 24成功的大门为你而开。第十单元生物技术实践专题24微生物的应用【考情探究】课标解读考情分析备考策略考点考向1微生物的实验室培养培养基与微生物的纯化本专题内容一直是高考的命题热点,考查内容集中在微生物的实验室培养、特定微生物数量的测定方法、培养基对微生物的选择作用等;题目情境贴近生活或科技进展,但试题答案通常落脚于教材主干知识复习时应注意对各种技术的系统理解和横向对比,可将果酒、果醋与泡菜的制作、特定微生物的分离纯化等实践操作构建过程模型,以加深对相关技术的记忆和理解2微生物的分离与计数微生物的分离与计数【真题探秘】基础篇【基础集训】考点一微生物的实验室培养1

2、.下表是某同学列出的分离土壤中微生物的培养基配方,据此回答下列问题:KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O尿素葡萄糖琼脂14 g2.1 g0.2 g10 g10.0 g15.0 g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL。(1)从作用上看,该培养基属于培养基,提供氮源的物质是,细菌能利用该氮源是由于体内能合成酶。(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入指示剂,若指示剂变,说明有目的菌株存在。(3)为了测定微生物的数量,接种时应采用法,某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106 的土壤样液0.1 mL,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则每

3、升原土壤样液中上述微生物的数量为个,测定的活菌数比实际活菌数(填“低”“高”或“基本一致”)。答案(1)选择尿素脲(2)酚红红(3)稀释涂布平板1.61012低2.为了调查银川市自来水水源地的水质情况,某研究小组对该地自来水水样中的大肠杆菌进行了测定,请回答下列问题:(1)该小组采用平板划线法分离提纯水样中的细菌,划线时在培养基上共画了4个区域,则需要次灼烧接种环。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是 。(2)在纯化菌种时,所用的培养基都需要在接种前用法进行灭菌。将1 mL水样稀释1 000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液,经适宜条件下培养后,3个

4、平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。(3)菌种需临时保藏时,要先将菌种接种到试管的培养基上,在合适的温度下培养。当菌落长成后,将试管放入冰箱中保藏。但此方法存在的缺点是。 (4)在培养时,需将培养皿倒置并放在中。实验结束时,使用过的培养基应该进行处理后才能丢弃。答案(1)5将聚集的菌种逐步稀释以便获得单个菌种(2)高压蒸汽灭菌5.0108等量的无菌水(3)固体斜面4 保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异(4)恒温培养箱 灭菌3.日前微博传言手机细菌比马桶多。如图,央视和北京卫视通过实验展示

5、调查结果。回答下列相关问题。(1)该实验需制备培养基,培养基一般都含有水、碳源、氮源、,培养基一般放入中进行灭菌。(2)据图,两电视台均采用法接种,该方法需要 。(多选)A.接种环B.酒精灯C.移液管D.涂布器E.无菌水(3)通过观察菌落的,可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为原因是。(4)按图操作取样面积,实验员测定某手机屏幕的细菌数量,将10 mL菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1 mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏幕的细菌数为个/平方厘米。该实验对照组该

6、如何设置? 。答案(1)无机盐高压蒸汽灭菌锅(2)稀释涂布平板BCDE(3)形态、大小(也可填“颜色”或其他合理答案) 手机的取样和马桶的取样都不相同 (答出“取样不同”即可)(4)2104取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养考点二微生物的分离与计数1.为更好地解决冬季污水处理厂氨氮去除率低的问题,某研究小组尝试从海水中筛选在低温下能高效去除氨氮的硝化细菌。将采集到的海水样本加入液体培养基A(其氮源为氨态氮),放在24 的培养箱中培养5天,然后取少量培养液在固体培养基上涂布,得到三种形态、颜色均不相同的单菌落。回答下列问题:(1)液体培养基A应选用的灭菌方法是(填“高压蒸汽灭菌法”或“干热灭

7、菌法”),不选另外一种的原因是 。(2)在配制培养基A时,对碳源的要求是(填“提供有机碳源”或“不提供碳源”),理由是。(3)最后分离得到的单菌落有三种,其形态、颜色各不相同,表明硝化细菌。(4)该研究小组在上述实验的基础上,已经获得了高效去除氨氮的硝化细菌,则需要经过处理,才能筛选出符合要求的能高效去除氨氮的硝化细菌。答案(1)高压蒸汽灭菌法干热灭菌法针对耐高温需要保持干燥的物品,若选干热灭菌法会使培养基中的水分蒸发(2)不提供碳源硝化细菌能进行化能合成作用,为自养生物 (3)存在不同的种类(4)低温2.有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物,广泛应用于农业生产中,有时会造成瓜果蔬菜等

8、食品农药残留超标,不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不及时医治就会危及生命。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题:(1)为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种,可在被有机磷农药污染的土壤中取样,并在含有碳源、氮源及等的选择培养基上添加适量的进行选择培养。(2)在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是。若培养基需要调节pH,则应在灭菌之(填“前”或“后”)调节。(3)该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是。(4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可在显微镜下用直接计数,也可选用法统计活菌数目。(5)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、

9、丙分别接种在1 L含20 mg有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时,则应选择微生物(填“甲”“乙”或“丙”)作为菌种进行后续培养,理由是。答案(1)水和无机盐有机磷农药(2)琼脂前(3)检测培养基平板灭菌是否合格(4)血细胞计数板稀释涂布平板(5)丙微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强3.如图是纯化纤维素分解菌并生产乙醇的基本工作流程,请回答下列问题:(1)图中过程选取富含纤维素的土壤,在鉴定和筛选所需微生物时需用对纤维素进行染色并制成选择培养基。最后还要在平板培养基上分离纯

10、化目的菌。为避免杂菌污染培养物和环境,接种时要在操作。(2)图中环节获得的酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,分别为C1酶、CX酶和。前两种酶使纤维素分解成,第三种酶将其进一步分解成葡萄糖。环节常用的菌种是。(3)用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中纤维素分解菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2 mL稀释液涂布,得到以下统计结果:涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246;请计算每毫升原液中的菌体数是。用这种方法测得的菌体数可能比实际活菌数量。答案(1)刚果红酒精灯火焰旁(2)葡萄糖苷酶纤维二糖酵母菌(3)1.16109少应用篇【应用集训】应用海水养殖废水沉积物中

11、硝化细菌的分离及修复无机氮污染的研究养殖池中存在的亚硝酸盐等能被硝化细菌吸收利用。图一表示研究人员从养殖池沉积物中分离得到硝化细菌的流程。图二是选择培养时使用的培养基配方。取样(步骤一)选择培养(步骤二)分离纯化(步骤三)鉴定(步骤四)图一选择培养基NaNO21.0 gNa2CO31.0 gCaCO31.0 gK2HPO43H2O8.0 gMgSO47H2O0.1 g微量元素液1 mL将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL图二(1)图一中选择培养(步骤二)的作用是。在培养过程对培养瓶进行振荡的目的:。分离纯化(步骤三)时,常采用的接种方法是。(2)制备培养液时,应先调节pH再进行灭菌

12、,原因是。制备用于分离纯化(步骤三)的培养基时,图二所示的配方中还应含有适量。(3)要临时保藏菌种时,可将菌种接种到上,在合适的温度下培养。待菌落长成后,将试管放入温度为的冰箱中保藏。(4)研究发现硝化细菌吸收利用亚硝酸盐的效果与环境中亚硝酸盐含量有关,若要探究两者的关系,请简要写出实验思路: 。答案(1)筛选出硝化细菌, 并增加硝化细菌的浓度使细胞与培养液充分接触以利于充分吸收营养物质,增加溶解氧平板划线法和稀释涂布平板法(2)防止其他微生物污染琼脂(3)固体斜面培养基(或斜面培养基)4 (4)将等量的硝化细菌分别接种到等体积的含不同浓度梯度的亚硝酸盐的培养液中,在适宜条件下培养相同时间后,

13、检测并比较亚硝酸盐的剩余量(答题要点:“等量”或“等体积”答出任一即可,“不同浓度梯度的亚硝酸盐的培养液中”“在适宜条件下培养相同时间”“检测并比较亚硝酸盐的剩余量”)【五年高考】考点一微生物的实验室培养1.(2019课标全国,37,15分)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(15 g/L)。号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(45 g

14、/L)。回答下列问题。(1)在号培养基中,为微生物提供氮源的是。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是。(2)若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会,其原因是。(3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是。(4)假设从号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供和。答案(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法(4)能量合成其他物质的原料2.(2019课标全国,37

15、,15分)回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH,其原因是。硝化细菌在没有碳源的培养基上(填“能够”或“不能”)生长,原因是。(2)用平板培养细菌时一般需要将平板(填“倒置”或“正置”)。(3)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是。(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。答案(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可

16、以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌3.(2018课标全国,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制的生长,加入了链霉素的培养基属于培养基。(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有(答出两点即可)。(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并

17、培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是 。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是 。答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2

18、个相差悬殊,结果的重复性差4.(2018课标全国,37,15分)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是 。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能。在照射前,适量喷洒,可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是。

19、答案(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽 5.(2018课标全国,37,15分)回答下列与酵母菌有关的问题:(1)分离培养酵母菌通常使用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是。(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引

20、起面包松软的原因是。答案(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软6.(2016课标全国,39,15分)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下:配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);制作无菌平板;设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;将各组平板置于37 恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题:(1)该培养基中微生物所需的氮来源于。若要完成步

21、骤,该培养基中的成分X通常是。(2)步骤中,实验组的操作是。(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法(填“正确”或“不正确”)。答案(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间(3)污染不正确7.(2016课标全国,39,15分)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题:(1)分离纯化

22、乳酸菌时,首先需要用对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是 。(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有和。分离纯化时应挑选出的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在-20 长期保存时,菌液中常需要加入一定量的(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。答案(1)无菌水(2分)泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落(3分)(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透明圈(2分)(3)甘油(2分)8.(2015课标全国,39,15分)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题:(1)显微观察时,微生物A菌体中

23、的油脂通常可用染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用直接计数;若要测定其活菌数量,可选用法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35 、40 、45 温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中,条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕设计后续实验。答案(1)苏丹(

24、或苏丹)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血细胞计数板稀释涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)考点二微生物的分离与计数9.(2019课标全国,37,15分)物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分离目标菌,所用选择培养基中的氮源应该是。(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌,应该选择菌落进一步纯化,选择的依据是。(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为

25、氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、预期结果和结论,即 。(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异,该小组拟进行如下实验,请完善相关内容。在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液,C处滴加,三处滴加量相同。一段时间后,测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明;若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明。答案(1)W(2)乙乙菌落周围出现透明圈,说明乙菌能降解W(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上,若细菌能生长

26、,则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源(4)缓冲液缓冲液不能降解W酶E与天然酶降解W的能力相近10.(2017课标全国,37,15分)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可)。(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是。(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na

27、2HPO4,其作用有(答出两点即可)。答案(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定11.(2017江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳

28、源的有。(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐,以达到富集酚降解菌的目的。若如图平板中菌落过于密集,应进一步,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加。(3)如图为连续划线法示意图,在图中(填图中序号)区域更易获得单菌落。(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为。管号123456苯酚浓度(mg/L)1如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释(填序号:51020)倍后,再进行比色。答案(7分)(1)蛋白胨、苯

29、酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8教师专用题组1.(2018江苏单科,31,8分)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的,及时对培养基进行分装,并进行灭菌。(2)取步骤中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤中将温度约(在25 、50 或80 中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置

30、培养。(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤所示进行划线。下列叙述合理的有。a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株(4)步骤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1 000 倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用2516型血细胞计数板计数5 个中格中的细胞数,理论上色细胞的个数应不少于,才能达到每毫升3109个活细胞的预期密度。答案(8分)(1)pH高压蒸汽(湿热

31、)(2)50 (3)a、b、d(4)氧气无302.(2014课标全国,39,15分)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将分解成。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+-+培养基乙+-+注:“+”表示有,“-”表示无。据表判

32、断,培养基甲(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ;培养基乙(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 。答案(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌3.(2014课标全国,39,15分)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是;然后,将1 mL水样

33、稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是。(3)示意图A和B中,表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高的利用率。答案(15

34、分)(1)检测培养基平板灭菌是否合格3.8107(每空2分,共4分)(2)灼烧(2分)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3分)(3)B(2分)(4)溶解氧营养物质(每空2分,共4分)4.(2013课标全国,39,15分)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用法或法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用法接种于固体培养基表面,在37 培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。(3)为

35、了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的。(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素。答案(15分)(1)划线稀释涂布(或涂布)(每空2分,共4分)(2)涂布(1分)(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(每空2分,共8分)(4)

36、A(2分)5.(2009全国,33,10分)利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆,具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。(1)实验步骤:配制(固体、半固体、液体)培养基,该培养基的碳源应为。将接入已灭菌的培养基平板上。立即用适当剂量的紫外照射,其目的是。菌落形成后,加入碘液,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小,周围出现现象的菌落即为初选菌落。经分离、纯化后即可达到实验目的。(2)若已得到二株变异菌株和,其淀粉转化率较高。经测定菌株淀粉酶的催化活性高,菌株的淀粉酶蛋白含量高。经进一步研究发现,突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区,可推

37、测出菌株的突变发生在区,菌株的突变发生在区。答案(1)固体玉米淀粉野生菌株对野生菌株进行诱变浅色范围大(2)编码非编码【三年模拟】时间:70分钟分值:90分非选择题(共90分)1.(2020届广东惠州一调,37)(15分)不同品牌的酸奶具有不同的口味。某研究小组利用含碳酸钙的固体培养基探究甲、乙两品牌酸奶中乳酸菌的类型是否相同(乳酸能够溶解碳酸钙,使培养基变得透明)。请回答下列问题:(1)将甲、乙两品牌酸奶中的乳酸菌纯化,分别接种在含碳酸钙的固体培养基中培养,根据菌落周围透明圈的大小,可确定酸奶中乳酸菌的类型。不同乳酸菌菌落透明圈大小不同的原因是 。(2)家庭制作酸奶时,在纯牛奶中加入少量酸奶

38、相当于微生物培养技术中的操作,纯牛奶变成酸奶,改变了口味,含有的能量减少,原因是。(3)为长期保存纯化的优质菌,可将菌液与充分混匀,置于-20 的冷冻箱中保存。(4)该研究小组进一步探究甲品牌酸奶中乳酸菌数量,实验操作如下图。接种微生物的方法有很多,图中过程所示的方法为。用该方法统计样本菌落数后,所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位个M),这里的n=。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个平板,目的是。如果平板菌落数超过300,一般还需进一步 。答案(1)(在相同时间内)不同类型的乳酸菌产生乳酸的量不同,不同量的乳酸能够溶解碳酸钙的量不同,形成的透明圈大小不同(2)

39、接种乳酸菌在发酵时使牛奶中的营养成分发生改变,乳酸菌细胞呼吸消耗部分有机物,从而使能量减少(3)灭菌的甘油(4)稀释涂布平板法6设置重复组,取平均值,使实验结果更加准确可靠稀释2.(2020届广东惠州二调,37)(15分)尿素作为主要的化肥种类之一,也是一种重要的化工原料。目前处理含尿素废水的方法有 3 种 :化学热力学水解法、微生物水解法及脲酶水解法。某研究小组欲从土壤中筛选能高效分解尿素的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)给农作物施用尿素,主要是为了给植物提供元素,过量施用随水土流失后易造成水体污染,这种现象叫水体富营养化。为了筛选能分解尿素的细菌,在配制培养基时需要添加KH2PO4 和

40、Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)。(2)要从土壤中分离目标菌,关键的实验思路是。理由是 。(3)为对分离得到的菌种做进一步的鉴定,常在固体培养基中加入酚红试剂,若菌落周围出现,可以初步鉴定该种细菌为目标菌,其原理是 。(4)运用固定化脲酶技术处理含尿素废水时应采用法对脲酶进行固定化,理由是 。答案(1)氮为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂维持细胞生长过程中pH的相对稳定(2)用尿素为唯一氮源的培养基选择培养不能合成脲酶的微生物无法分解尿素获取氮源,生长受到抑制(3)红色环目标菌产生的脲酶催化尿素分解生成氨,使pH上升,酚红试剂在碱性条件下会由无色变红,出现红色环(4)化学结合(或物理吸

41、附)酶分子很小,容易被吸附或结合3.(2020届湖北天门、仙桃、潜江联考,34)(15分)联苯(C12H10)是一种难以降解的环境污染物,研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化联苯降解的关键酶。为了从富含联苯的环境中分离出联苯降解菌,某同学设计了甲、乙两种培养基,成分如下表:维生素NH4NO3MgCl2联苯水琼脂培养基甲+培养基乙+-(注:“+”表示添加该物质,“-”表示没有添加该物质)(1)甲培养基中加入联苯作为用于培养联苯降解菌,该培养基属于(填“选择”或“鉴定”)培养基,接种前需采用法进行灭菌。(2)为了便于测定培养基乙中联苯降解菌的数量,可以从培养基乙中取培养液1 mL加入到中稀释100倍之后进行显微计数,由此计算得到的培