青蒿叶片愈伤组织的诱导和植株再生

1、青蒿叶片愈伤组织的诱导和植株再生【关键词】青蒿；植物激素；愈伤；再生Keyrds：ArteisiaannuaL；Planthrnes；allus；Regeneratin青蒿(Arteisiaannua)L，又名黄花蒿，是菊科一年生药用草本植物。提取物青蒿素对脑疟疾和氯喹疟疾具有高效低毒的抗疟性能，H已经认定复方青蒿素成药为目前最平安有效的抗疟药。如今世界上已经有51个国家和地区在H推荐下将其列为抗疟指定用药。这使得全球对青蒿素原料的需求猛涨，从2022年开场已出现了从原料到成品药各个环节的严重供货短缺1。目前该药物虽然能人工合成，但本钱很高，未能实际消费2，工业上主要从青蒿植株中提龋目前青蒿因

2、长期处于野生状态，未能选育出高含量的品种，青蒿素含量极低，而且其含量还受土壤营养、地理环境、气候等多种因素影响34，大大增加了该药的消费本钱。为此，高青蒿素含量的青蒿品种选育工作重要性日益凸显，而组织培养正是现代育种技术的一个重要组成局部，本实验初步讨论了青蒿叶片的愈伤组织诱导和植株再生技术，为进一步的育种研究打下基矗1材料与方法1.1材料酉阳本地消费用种，由重庆市中药研究院生药栽培室提供。1.2方法1.2.1培养基配制根本培养基为培养基，附加蔗糖30g/L,琼脂15g/L，pH调节至5.8。附加激素如下：12IAA0.1g/L+NAA1.0g/L1.2.2外植体处理剪取20高青蒿苗上的幼嫩叶

3、片，剪成0.52的小块，无菌水中浸泡3h，75%乙醇漂洗1in，于5%次氯酸钠溶液中浸泡3in，无菌水漂洗4次，接种。培养条件为25，2000Lx光照、14h/d。2结果与分析观察发现，不同激素组合对青蒿的愈伤诱导、植株再生和生根均有显著影响。2.1愈伤组织诱导接种后的叶片呈灰绿色水浸状，貌似死亡，培养基2和5上的叶片，在接种后第5天叶片边缘开场出现鲜绿色的颗粒，直径约0.51.0左右，呈致密状态，10d后，愈伤生长到达顶峰，在多处叶片边缘出现。培养基5上的愈伤在接种后15d开场分化出绿色丛生芽点，但只停留在这一阶段，不能进一步分化成苗。培养基2上的愈伤一直保持致密颗粒状。培养基1346上的叶

4、片没有愈伤出现，只是叶片边缘有少局部返绿，返绿局部取下接种于分化培养基上渐渐褐化死亡。不同培养基愈伤组织诱导率见表1。表1愈伤组织诱导率略转贴于论文联盟.ll.2.2芽的分化将培养基2和5上的愈伤分别转入分化培养基789，5d后，8和9上的愈伤均分化出苗，10d后达顶峰时期。8上的苗生长较正常，9上的苗丛生密度过大，苗型细弱，生长缓慢，7上的愈伤只能保持在丛生芽点状态，30d后即渐渐褐化死亡。培养基5中产生的愈伤组织分化率明显大于培养基2中产生的愈伤组织。3种分化培养基中幼苗分化率结果见表2。表2培养基2和5上的愈伤组织幼苗分化率略2.3根的分化小苗约12高时转入生根培养基，3d后即可在小苗基

5、部见到白色新根，不同培养基根分化率如表3。表3幼苗根分化率略可见，随着NAA浓度增高，根分化率反而降低，以培养基10较适宜。从叶片接种到小苗出瓶移栽，整个周期约1个月左右。此外，在实验期间还用培养了约2个月的青蒿无菌苗叶片接种培养基2和5，叶片在培养基上皱缩，边缘褐化，最后死亡，始终无愈伤出现。2.4试管苗移栽试管苗揭去瓶盖，在室内炼苗3d，4h/d；3d后，置于室外弱光荫蔽处炼苗2d，4h/d；2d后，移栽已高压灭菌的珍珠岩，浇透定根水，每天叶面喷水保湿12次，约15d后，见苗基部长出乳白色新根，心叶开场生长，即说明成活，带土移栽大田。移栽成活率93%以上。3小结无菌苗叶片接种诱导培养基，无愈伤出现，初步推测，可能是缺乏消毒过程的刺激，不能产生具有补偿外界伤害作用的愈伤组织，其详细原因有待进一步研究。【参考文献】1中国中医药信息杂志通讯员.世界卫生组织呼吁中国增加青蒿素产量J.中国中医药信息杂志,2022,12(8)：110.2许杏样青蒿素及其一类物构造和合成的研究J.有机化学，1982,6：447.3韦霄，李锋,许成琼，等.不同栽培措施对黄花蒿产量和青蒿素含量的影