药物分析实验指导

1、药物分析实验指导怀化学院化学化工系药学教研室二O二年十二月目录实验一氯化钠的杂质检査实验二匍萄糖注射液的质量分析实验三苯甲酸钠的含量测定实验四阿司匹林片的分析实验五异烟聃片的含量测定实验六片剂的刖解度和脆碎度的检测实验七附录3蒸饰水的杂质检查药品检验操作标准原料药检验报告书成品检验报告书标准液配制及标左记录实验一氯化钠的杂质检查目的了解药物杂质检査的意义。掌握杂质检査的原理和方法。掌握杂质限量的计算方法。二、实验内容酸碱度取本品5. Og,加水50ml溶解后，加浪麝香草酚蓝指示液2滴。如显黄色，加氢氧化钠 液（0.02mol/L） 0. 10ml ,应变为蓝色：如显蓝色或绿色，加盐酸液（0.0

2、2mol/L）0. 2ml ,应变为黄色。溶液的澄淸度取本品5. 0g,加水25ml溶解后，溶液应澄淸。碘化物取本品的细粉5. 0g,置瓷蒸发皿内，滴加新配制的淀粉混合液取可溶性淀粉0.25g, 加水2ml ,搅匀，再加沸水至25ml,随加随搅拌，放冷，加硫酸液（0. 025mol/L） 2ml , 亚硝酸钠试液3滴与水25ml ,混匀适量使晶粉湿润，曹日光下（或日光灯下）观察， 5分钟内晶粒不得显蓝色痕迹。浪化物取本品2. 0g,加水10ml使溶解，加盐酸3滴与氯仿1ml ,边振摇边滴加2%氯胺T 溶液（临用新制）3滴，氯仿层如显色，与标准浪化钾溶液（精密称取在105C燥至恒 重的浪化钾0.

3、 1485g,加水使溶解成100ml ,摇匀）1.0ml用同一方法制成的对照液比 较，不得更深。硫酸盐取本品5. 0g,加水溶解成约40ml （溶液如显碱性，可滴加盐酸使成中性），溶液如不 澄淸，应滤过，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml ,摇匀，即得供试溶液。另取标准硫 酸钾溶液1.0ml置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml ,加稀盐酸2ml摇匀，即得对 照溶液。于供试溶液与对照溶溶中，分别加入25%氯化顿溶液oml,用水稀释使成50ml , 充分摇匀，放置10分钟，同星黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较、供试品管浊度不得更浓。领盐取本品4. 0g,加水20ml ,溶解后,滤过

4、，滤液分为两等份，1份中加稀硫酸2nd,另 一份中加水2ml ,静置15分钟，两液应同样澄淸。钙盐取本品2. 0g,加水10ml使溶解，加氨试液lml ,摇匀，加草酸钱试液lml, 5分钟内 不得发生浑浊。镁盐取本品l.Og,加水20ml使溶解，加氢氧化钠试液2. 5ml与0. 05%太坦黄溶液0. 5ml ,摇匀，产生的颜色与标准镁溶液（精密称取在800C炽灼至恒重的氧化镁16. 58mg,加盐酸2.5ml与水适量使溶解成1000ml,摇匀）1.0ml ,用同一方法制成的对 照液比较，不得更深。钾盐取本品5. 0g,加水20ml溶解后，加稀醋酸2滴，加四苯硼钠溶液（取四苯硼钠1.5g,置乳钵

5、中，加水10ml研磨后，再加水40ml ,研匀，用质密的滤纸滤过，即得） 2ml,加水使成50ml ,如湿浑浊，与标准硫酸钾溶液12.3ml用同一方法制成的对照液比较， 不得更浓。干燥失重取供试品，混合均匀（如为较大的结晶，应先迅速捣碎，使成2mm以下的小粒）。分取 约lg，平铺在130CT-燥至恒重的扁形称瓶中，厚度不超过5mm，精密称立。将瓶盖取下， 置称瓶旁，或将瓶盖半开，置烘箱内于130C r燥约23小时后，将称瓶盖好，取出，置燥器中放置40分钟后，精密称定重量。再按上述方法自“将瓶盖取下”起，继续I：燥（规左不12小时，依法操作，至恒重为止。从减失重量和取样量计算供试品的干燥失重 得

6、超过0.5% ）。（规左不铁盐取本品5. Og,加水溶解成25ml ,置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸钱 50mg, 用水稀释成35ml后，加30%硫亂酸鞍溶液3ml ,再加水适量稀释成50ml,摇匀。如显色， 立即与标准铁溶液1.5ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。重金属取本品5. 0g,加水20ml溶解后，置25ml纳氏比色管中，加醋酸盐缓冲液（pH3.5） 2ml与水适量使成2oml ,加硫代乙酰胺试液（临用前取5. 0ml混合液，加4%硫代乙酰胺 溶液lml,水浴加热20秒，冷却，立即使用）2ml ,摇匀，放置2分钟，置白纸上，自上 向下透视。如显色，立即与标准铅

7、溶液1.0ml用同一方法的对照液比较，不得更深。碑盐仪器装置：如图1，A为100ml标准磨口锥形瓶，B为中空的标准磨口塞，上连导气管 C （外径8. 0mm.内径6. 0mm）,全长约180mm. D为具孔的有机玻璃旋塞，其上部为圆形平 而，中央有一圆孔，孔径与导气管C的内径一致，其下部孔径与导气管C的外径相适应。将 导气管C的顶端导入旋塞下部孔内，并使管壁与旋塞的圆孔恰相吻合，粘合固定，E为中 央具有圆孔（孔径6. 0mm）的有机玻璃旋塞盖，与D紧密吻合。测试时，于导气管C中装入醋酸铅棉花60mg （装管高度约6080mm）,再于旋塞D的顶 端平而上放一片渙化汞试纸（试纸大小以能覆盖孔径而不

8、露出平而外为宜），盖上旋塞E 并旋紧， 即得。标准0申斑的制备：精密量取标准0申溶液2ml ,置A瓶中，加盐酸5ml与水21ml,再加碘化 钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g,立即照上法装妥 的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置2540C水浴中，反应45分钟后，取出渙化汞试 纸，即得。i-sB-条件，严格遵守平行原则。 下进行反应与比较。即应尽 同一光源、同衬底上，以相 试药种类、用量、加入顺序检査法，取本品5. 0g.置A瓶中，加水23ml溶解后，加盐酸5ml ,照标准碑斑的制备，自 “加碘化钾试液5ml”起，依法操作，将生成的碑斑与标准側斑比较，不得更深。i

9、-sB-条件，严格遵守平行原则。 下进行反应与比较。即应尽 同一光源、同衬底上，以相 试药种类、用量、加入顺序三、说明药物杂质检査必须注意按规定 的检査平行原则是指样品与标准必须在同一 条件量选择容积、口径和色泽相同的比色 管，在同的方式（一般是自上而下）观 察，所加入的和反应时间等也应一致。四、思考题杂质检査的意义是什么？药物中杂质来源主要有哪些途径？什么是一般杂质？什么是特殊杂质？药物杂质检查应严格遵循什么原则实验二葡萄糖注射液的质量分析一、目的掌握匍萄糖注射液杂质检查的原理和方法。掌握杂质限量的计算方法。二、实验内容本品为匍萄糖或无水匍萄糖的灭菌水溶液。含匍萄糖（C6H1206.H20）

10、应为标示量的95. 0 %105. 0 %。、性状本品为无色或几乎无色的澄明液体；味甜。、鉴別取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。、检查pH值应为3.25. 5 （附录VI H）。5-疑甲基糠醛精密量取本品适量（约相当于匍萄糖l.Og ），置100ml量瓶中，加水稀 释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录IV A）,在284nm的波长处测定，吸收度不得大于 0. 32。重金属取本品适量（约相当于衙萄糖3g）,必要时，蒸发至约20ml ,放冷，加醋酸 盐缓冲液（pH3.5） 2ml与水适量使成25ml,依法检查（附录Vffl H第一法），按简萄糖含量 计算，含重金属不

11、得过百万分之五。不溶性微粒取装量为100ml或100ml以上的本品1瓶，依法检查（附录IX C），应 符合规定。细菌内毒素取本品，依法检查（附录XI E）,每1ml中含内毒素量应小于0. 5EU。其 他应符合注射剂项下有关的各项规定（附录I B）。4、含量测定精密量取本品适量（约相当于匍萄糖75mg）,置碘量瓶中，加水稀释至 ml ,加含碳酸钠14.3%及碘化钾4.0%的缓冲液25ml,再精密加入0. 05mol/L碘滴立液 25ml ,密塞，在20C下 暗处准确放置30min后，加2mol/L盐酸35ml ,并立即用0. lmol/L硫代硫酸钠滴定液 进行滴定，至终点时，加淀粉指示剂，继续滴

12、定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。 每lml碘滴定液（0. 05mol/L ）相当于9. 008mg的无水匍萄糖（C6H12O6）或相当于9. 909mg的 匍萄糖（C6H12O6出0）.实验三苯甲酸钠的含量测定目的掌握双相滴怎法测怎苯甲酸钠含量的原理和操作二操作取本品l.og,精密称定，置分液漏斗中，加水约25ml ,乙瞇50ml与甲基橙指示液 2滴，用盐酸滴定液(0. omol/L)滴立，随滴随振摇，至水层显持续橙红色，分取水层，曹具 塞锥形瓶中，乙瞇层用水oml洗涤，洗涤液并入锥形瓶中，加乙瞇20ml ,继续用盐酸滴立 液(0. omol/L)滴定，随滴随振摇，至水层显持续橙红色

13、，即得，每1ml的盐酸滴定液 (0. 5mol/L)相当于 72. 06mg 的 UHsChNa。本品按干燥品计算,含C?H5O2Na不得少于99. 0%说明1.苯甲酸钠为有机酸的碱金属盐，显碱性,可用盐酸标准液滴定。CCOH NaCl1.苯甲酸钠为有机酸的碱金属盐，显碱性,可用盐酸标准液滴定。CCOH NaCl在水溶液中滴怎时，由于碱性较弱(Pkb二980)突跃不明显，故加入与水不相溶混的溶剂在水溶液中滴怎时，由于碱性较弱乙碰提除反应生成物苯甲酸，使反应左量完成，同时也避免了苯甲酸在瓶中析岀影响终点的观 察。滴左时应充分振摇，使生成的苯甲酸转入乙駆层。在振摇和分取水层时，应避免样品的损失，滴

14、宦前，应用乙瞇检查分液漏斗是否严四、思考题乙碰为?为什乙碰为?为什什么要分两次加入？第一次滴定至水层显持续橙红色时，是否已达终点么？分取水层后乙瞇层用5ml水洗涤的目的是什么？实验四阿司匹林片的分析一、目的掌握片剂分析的特点及赋形剂的扰与排除方法。掌握阿司匹林片鉴别、检查、含量测立的原理及方法。二、操作（一）鉴別1取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0. lg）,加水10ml煮沸，放冷，加三氯化 铁试液1滴，即显紫堇色。2.取本品的细粉（约相当于阿司匹林0. 5g）,加碳酸钠试液10ml,振摇后，放置5分 钟，滤过，滤液煮沸2分钟，放冷，加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。（二）检

15、查1、游离水杨酸取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0. lg）,加无水氯仿3ml,不断搅拌2分钟， 用无水氯仿湿润的滤纸滤过，滤渣用无水氯仿洗涤2次，每次1ml ,合并滤液与洗液，在室 温下通风挥发至干：残渣用无水乙醇4ml溶解后，移至100ml量瓶中，用少量5%乙醇洗 涤容器、洗液并入量瓶中，加5%乙醇稀释至刻度，摇匀，分取50ml,立即加新制的稀硫酸 铁钱溶液取盐酸液（lmol/L） lml ,加硫酸铁钱指示液2ml后，再加水适量使成 100ml lml ,摇匀：30秒钟内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0. lg，置1000ml 瓶中，加冰醋酸lml,摇匀，再加水适量至刻度，摇匀，精密疑

16、取1.5ml ,加无水乙醇2ml 与5%乙醇使成50ml,再加上述新制的稀硫酸铁钱溶液lml,摇匀）比较，不得更深。2、溶出度取本品1片，照溶出度测定法第一法（2000年药典二部附录）,以稀盐酸24ml加水 至1000ml为溶剂，转蓝转速为每分钟100土5转，依法操作，经30分钟时，取溶液10ml滤 过，精密量取续滤液3ml置50ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠液5ml,置水浴中煮沸5 分钟，放冷，加硫酸液2. 5ml :并加水稀释至刻度，摇匀。照分光光度法，在303nm的波 长处测定吸收度，按CvHeOs的吸收系数E严丿为265计算，再乘以1.304 ,计算 出每片的溶出量：不得少于标示量的8

17、0%。英他应符合片剂项下有关的各项规定（2000 年中国药典二 部）。（三）含量测定取本品10片，精密称左，研细，精密称出适量（约相当于阿司匹林0. 3g）,置锥形瓶中， 加中性乙醇（对酚瞰指示液显中性）20ml ,振摇，使阿司匹林溶解，加酚瞰指示液 3滴， 滴加氢氧化钠滴定液（0. lmol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴左液（0. lmol/L）40ml ,置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，有硫酸滴定液(005mol/L) 滴定，并将滴定的结果用空白试脸校正。每1ml氢氧化钠滴定液(0. lmol/L)相当于18. 02mg 的 C9Hs0 io本品含阿司匹林(C9H

18、s0i)应为标示量的95.0-105.0%。三、说明1 杨酸与三氯化铁试液显紫堇色。+ Fe3+ Fe3-32检查溶岀度是利用在碱性条件下，加热，使阿司匹林水解，测宦水解产物水杨酸的吸收度，按为265计算水杨酸的含量，故用阿司匹林的含量表示溶出度时应乘以换算因 数。换算因数二M asp/ M sa =1. 304为消除阿司匹林水解产物水杨酸，醋酸及稳左剂枸椽酸、酒石酸对含量测左的影响故采 用两步滴定法。第一次滴NaOH第二次滴四、思考题NaOHH20CH sCOOH + NaOH-CH3C00N&+ H2Oh第一次滴NaOH第二次滴四、思考题NaOHH20CH sCOOH + NaOH-CH3

19、C00N&+ H2Oh2o1 简述鉴别试脸的原理。2.检查游离的水杨酸时，为防止阿司匹林水解，操作中应注总哪些问题？计算供试品中 阿司匹林的限量。含量测左时，为什么要作空白试脸？空白试脸的操作3.含量测左时，为什么要作空白试脸？空白试脸的操作如何进行？为什么加中性乙醇溶 解供试品？如何制备中性乙醇？4.哪些问题才可以获得准确的结果4.哪些问题才可以获得准确的结果你认为含量测左时，应注意9实验五异烟腓片的含量测定一、目的掌握氧化还原滴左法的原理及方法。掌握渓酸钾法测定异烟脐片含量的方法。二、实验内容性状本品为白色片。鉴別取本品的细粉适量（约相当于异烟腓0. lg ）,加水10ml,振摇，滤过，滤

20、液照 异烟腓项下的鉴别（2）项试验，显相同的反应。检查溶岀度取本品，照溶出度测定法（附录XC第一法）,以水1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，依法操作，经30分钟时，取溶液5ml滤过，精密量取续滤液适量， 用水宦量稀释制成每1ml中含1020 Pg的溶液，照分光光度法（附录IV A）,在263nm 的波长处测定吸收度，按C6H7N3O的吸收系数（E 1% lcm）为307计算出每片的溶出 量，限度为标示量的60%,应符合规定。其他应符合片剂项下有关的各项规定（附录I A）。含量测定取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于异烟腓0. 2g ）,置100ml量瓶中，加水适量，振摇

21、使异烟月井溶解并稀释至刻度，摇匀，用V燥滤纸 滤过，精密量取续滤液25ml,照异烟腓项下的方法，自“加水50ml、盐酸20ml与甲基橙指 示剂1滴，用滉酸钾滴定液缓缓滴定，至粉红色消失。平行滴定3次。每1ml浪酸钾滴定液 （0.016 67mol/L） 相当于 3. 429mg 的 C6H7N30.三、思考题1.写出滉酸钾法测左异烟腓含量的反应式和滴左度计算过程。实验六 片剂的崩解时限及脆碎度检查一、目的1.片剂的削解时限及脆碎度检查的原理和方法。二、实验内容（-）削解时限检查法削解系指固体制剂在检查时限内全部削解溶散或成碎粒，除不溶性包 衣材料或破碎的胶囊壳外，应通过筛网。本法系用于检查固体

22、制剂在规左条件下的削解情况。凡规左检查溶出度、释放度或融变时 限的制剂，不再进行崩解时限检查。仪器装置采用升降式削解仪，主要结构为一能升降的金属支架与下端镶有筛网的吊篮， 并附有挡板。升降的金属支架上下移动距离为55mm2mm,往返频率为每分钟3032次。吊篮玻璃管6根，管长77. 5mm 2.5mm：内径21.5mm,壁厚2mm：透明塑料板2 块，直径90mm,厚6mm,板而有6个孔，孔径26mm：不锈钢板1块（放在上而一块塑料 板上），直径90mm,厚1mm,板面有6个孔，孔径22mm：不锈钢终筛网1张（放在下 而一块塑料板下），直径90mm,筛孔内径2.0mm：以及不锈钢轴1根（固定在上

23、而一块塑 料板与不锈钢板上），长80mm。将上述玻璃管6根垂直于2块塑料板的孔中，并用3只 螺丝将不锈钢板、塑料板和不锈钢丝筛网固定，即得。挡板为一平整光滑的透明塑料块，相对密度 1. 181.20 ,直径20. 7mm0. 15mm,厚9. 5mm 0. 15mm：挡板共有5个孔，孔径2mm,中央1个孔，其余4个孔距中心6mm,各 孔间距相等：挡板侧边有4个等距离的V形槽，V形槽上端宽9.5mm,深2. 55mm,底部开口 处的宽与深度均为1. 6mm。检查法将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml烧杯中，并调节吊 篮位置使英下降时筛网距烧杯底部25mm,烧杯内盛有温度为3

24、7C1C的水，调节水位高度 使吊篮上升时筛网在水而下15mm处。除另有规定外，取药片6片，分别置上述吊篮的玻璃管中，启动削解仪进行检查，各片 均应在15分钟内全部崩解。如有1片削解不完全，应另取6片，按上述方法复试，均应符 合规定。薄膜衣片，按上述装置与方法检查，并可改在盐酸溶液（9 一 1000）中进行检查，应在30 分钟内全部削解。如有1片不能完全削解，应另取6片，按上述方法复试，均应符合规定。糖衣片，按上述装置与方法检查，应在1小时内全部削解。如有1片不能完全削解，应 另取6片，按上述方法复试，均应符合规定。肠溶衣片，按上述装置与方法，先在盐酸溶液（9 一 1000）中检查2小时，每片均

25、不得 有裂缝、削解或软化现象；继将吊篮取出，用少量水洗涤后，每管各加入挡板1块，再按上述方法在磷酸盐缓冲液（PH6.8）中进行检查，1小时内应全部崩解。如有1片不能完全崩 解，应另取6片，按上述方法复试，均应符合规定。泡腾片，取1片，置250ml烧杯中，烧杯内盛有200ml水，水温为1525C,有许多 气泡放出，当片剂或碎片周围的气体停止逸出时，片剂应崩解、溶解或分散在水中，无聚集 的颗粒剩留。除另有规定外，按上述方法检查6片，各片均应在5分钟内削解。（-）片剂脆碎度检查法本法用于检查非包衣片的脆碎情况及其他物理强度，如压碎强度等。装置内径约为286mm，深度为39mm,内壁抛光，一边可打开的

26、透明耐磨塑料圆筒，筒 内有一自中心向外壁延伸的弧形隔片（内径为80mm 1mm,）使圆筒转动时，片剂产生 滚动（见图）。圆筒直立固定于水平转轴上，转轴与电动机相连，转速为每分钟25转 土 1转。每转动 一圈，片剂滚动或滑动至筒壁或其他片剂上。检查法片重为0. 65g或以下者取若干片，使其总重约为6.5g :片重大于0. 65g者取 10片。用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，置圆筒中，转动100次。取出，同法除去粉 末，精密称重，减失重量不得过1%,且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。本试脸一般仅作1 次。如减失重量超过1 %时，可复检2次，3次的平均减失重量不得过1%,并不得检出 断裂、龟裂及粉碎

27、的片。如供试品的形状或大小使片剂在圆筒中形成不规则滚动时，可调节圆的底座，使与桌而 成约10。的角，试验时片剂不再聚集，能顺利下落。对泡腾片及口嚼片等易吸水的制剂，操作时应注总防止吸湿（通常控制相对湿度小于 40%） o实验七、蒸憎水的杂质检查一、目的了解药物杂质检查的意义。掌握杂质检查的原理和方法。掌握杂质限量的计算方法。、实验内容酸碱度取本品10ml,加甲基红指不液2滴，不得显红色；另取10ml, 加澳麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。氯化物、硫酸盐与钙盐取本品，分置3支试管中，每管各50mlo第一管中，加硝酸5 滴与硝酸银试液lml；第二管中，加氯化顿试液2ml,第三管中，加 草酸鞍试液2nd,均不得发生浑浊。硝酸盐与亚硝酸盐取本品15ml,加醋酸液(6mol/L)18ml ,对氨基苯磺酸- a -茶胺 试液2ml,锌粉O.Olg,摇匀，放置15分钟，不得显粉红色。氨取本品50ml,加碱性碘化汞钾试液2ml,放置15分钟；如显 色，与氯化鞍溶液(取氯化鞍31.5mg,加无氨蒸憎水适量使溶解并稀 释成1000ml) 2. 0ml,加无氨蒸憎水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制 成的对照液比较，不得更深。二氧化碳取本品25ml,置50ml具塞量筒中，加氢氧化钙试液25ml,密塞 振摇，放置，1小时内不得发生浑浊。易氧化物取本品100ml,加稀硫酸10ml,煮沸后，加咼孟