某某医院核酸检测实验室污染原因及处理方案

1、某某医院核酸检测实验室污染原因及处理方案目前国内所有二级以上综合医院都具备了核酸检测能力，大部分医院也设立ypcR实验室，高强度的核酸检测任务已然成为了我们检验人的工作常态，但是，如果一旦出现实验室污染，可能会造成假阳性结果，导致结果不可信，甚至可能会危及实验室工作人员安全。应对核酸检测实验室污染的最好办法就是防范于未然避免和减少污染的产生以及处理污染。一、污染的产生在新冠病毒核酸检测过程中，常见以下几种污染类型：扩增片段的污染（产物污染）；天然基因组DNA的污染、试剂污染（贮存液或工作液）以及样本间交叉污染。核酸检测实验室污染的主要来源是扩增产物的污染。实验室应通过以下途径及时发现污染：1、

2、采用每次检测过程至少3个阴性对照随机置于临床样本中间参与提取全过程。2、每天对实验室内空气进行采样监测。空气监测范围至少应包括样本制备区和扩增产物分析区。3、定期对实验室台面、门把手、仪器设备表面进行取样监测。4、阳性样本采用另外一到两种更为灵敏且扩增不同区域的核酸检测试剂对原始样本进行复核检测。二、污染的防控01严格实验室功能分区原则上新冠病毒核酸检测实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、样本制备区、扩增和产物分析区。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。各区域在物理空间上应当是完全相互独立的。传递窗满足密封性要求，不能有空气的直接相通。各项检测工作应严格按相应规定在各自的区域内进行，严禁

3、在样本制备区配制试剂。各区的功能是：1、试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的制备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。2、样本制备区：转运箱的开启，样本的灭活（适用时），核酸提取及其加入至扩增反应管等。3、扩增和产物分析区：核酸扩增和产物分析。02确保实验室人、物及空气单向流动核酸检测实验室的人、物及空气流向按照试剂储存和准备区一样本制备区f扩增和产物分析区，防止扩增产物随人流、物流及空气进入扩增前的区域。空气流向应按照从试剂储存和准备区一样本制备区f扩增区f扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。03实验室检测安全管理（1）基本要求核酸检测应当在生物安全二级实验

4、室进行，并应在生物安全风险评估的基础上，采取适当的个体防护措施，包括手套、口罩和隔离衣等。开展新冠病毒核酸检测的实验室应当制定实验室生物安全相关程序文件及实验室生物安全操作失误或意外的处理操作程序，并有记录。（2）实验室前安全要求应使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行桌面、台面及地面消毒。消毒液需每天新鲜配制，不超过24小时。转运至实验室的标本转运桶应在生物安全柜内开启。转运桶开启后，使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精对转运桶内壁和标本采集密封袋进行喷洒消毒。取出标本采集管后，应首先检查标本管外壁是否有破损、管口是否泄露或是否有管壁残留物。确认无渗漏后，推荐用0.2%含氯消毒剂喷洒、擦拭消毒

5、样品管外表面（此处不建议使用75%酒精，以免破坏标本标识）。如发现渗漏应立即用吸水纸覆盖，并喷洒有效氯含量为0.55%的含氯消毒剂进行消毒处理，不得对标本继续检测操作，做好标本不合格记录后需立即进行密封打包，压力蒸汽灭菌处理后销毁。如为采样管为非灭活管，实验室操作人员在进行标本热灭活时，温浴前需旋紧标本采集管管盖，必要时可用封口膜密闭管盖；温浴过程中可每隔10分钟将标本轻柔摇匀1次，以保证标本均匀灭活；温浴后标本需静置至室温至少10分钟使气溶胶沉降，随后再开盖进行后续核酸提取。（3）核酸提取和检测安全要求标本进行核酸提取和检测时应尽可能在生物安全柜内进行操作。如为打开标本管盖或其他有可能产生气

6、溶胶的操作，则必须在生物安全柜内进行。(4)实验室结束后清洁要求。需要对实验室环境进行清洁，消除可能的核酸污染。实验室空气清洁。实验室每次检测完毕后，可采用房间固定和/或可移动紫外灯进行紫外照射2小时以上。必要时可采用核酸清除剂等试剂清除实验室残留核酸。工作台面清洁。每天实验后，使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行台面、地面清洁。生物安全柜消毒。实验使用后的耗材废弃物放入医疗废物垃圾袋中，包扎后使用0.2%含有效氯消毒液或75%酒精喷洒消毒其外表面。手消毒后将垃圾袋带出生物安全柜放入实验室废弃物转运袋中。试管架、实验台面、移液器等使用75%酒精进行擦拭。随后关闭生物安全柜，紫外灯照射30分钟

7、。转运容器消毒。转运及存放标本的容器使用前后需使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行擦拭或喷洒消毒。塑料或有机玻璃材质物品清洁：使用0.2%含氯消毒剂或过氧乙酸或过氧化氢擦拭或喷洒。(5)转运容器消毒转运及存放样本的容器使用前后需使用有效氯含量为0.2%的消毒剂或75%酒精进行擦拭或喷洒消毒。04强化实验室检测过程控制实验室接到样本后，应当在生物安全柜内对样本进行清点核对。按照标准操作程序进行试剂准备、样本前处理、核酸提取、核酸扩增、结果分析及报告。实验室应当建立可疑样本和阳性样本复检的流程。(1)试剂准备应当选择国家药品监督管理部门批准的试剂，并在选择样本采样管和核酸提取试剂时，使用试剂盒说

8、明书上建议的配套样本采样管和提取试剂。(2)样本灭活已经使用含肌盐的灭活型样本采样管的实验室，这一环节无需进行灭活处理，直接进行核酸提取。使用非灭活型样本采样管的实验室，可采用56C孵育30分钟热灭活的处理方式。(3)核酸提取将灭活后的样本取出，在生物安全柜内打开样本采样管加样。核酸提取完成后，立即将提取物进行封盖处理。在生物安全柜内将提取核酸力口至PCR扩增反应体系中。(4)核酸扩增将扩增体系放入扩增仪，核对扩增程序是否与试剂说明书相符，启动扩增程序。扩增后的反应管不要开盖，直接放于垃圾袋中，封好袋口，按一般医疗废物转移出实验室处理。三、污染的消除实验室一旦发生污染，检测工作应立即停止，直到

9、确认消除污染后才能重新开始检测。首先，要查找污染源和明确污染范围。然后，根据污染源和污染范围采取有效的去污染措施，结合各种不同方法以达到最佳效果。实验室污染的处理：.标本污染生物安全柜的操作台造成局限污染时：立即用吸水纸覆盖，并使用0.55%含氯消毒剂进行喷洒消毒。消毒液需要现用现配，24小时内使用。.标本倾覆造成实验室污染时:保持实验室空间密闭，避免污染物扩散。立即使用润湿有0.55%含氯消毒剂的毛巾覆盖污染区。必要时(如大量溢撒时)可用过氧乙酸加热熏蒸实验室，剂量为2g/m3,熏蒸过夜；或20g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾，用量8山1/山3,作用1-2小时；必要时或用高镒酸钾-甲醛

10、熏蒸：高镒酸钾88/山3,放入耐热耐腐蚀容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）,熏蒸4小时以上。熏蒸时室内湿度60%-80%。.清理污染物时：严格遵循活病毒生物安全操作要求，采用压力蒸汽灭菌处理，并进行实验室换气等，防止次生危害。医院核酸检测应急处置模拟演练方案为检验医院院内发现新冠确诊患者的应急处置能力，进一步完善各项应急预案和制度，提高医务人员和职能部门应急处置能力，特制定本方案一、演练时间：202x年*月*日上午9时二、演练地点：*医院病区三、参加人员：此次演练由*医院院长*总指挥，副院长*、*副总指挥，医务部、护理部、感染控制科、医学工程部、总务科等职能部门负责人和呼吸一科医务人

11、员、安保人员共*余人参加。四、具体方案9时39分，急诊科*主任接到区疾控中心电话通知：你院患者张*新冠核酸检测阳性。*主任立即报告医务部、感染控制科。.领导小组会议医务部接到通知后立即报告分管院长和院长，院长指示:立即启动*医院院内发现新冠核酸阳性患者应急预案，同时封闭该病区，通知新冠疫情防控领导小组成员开会。会上医务部*部长简要报告患者的基本病情和核酸检测阳性结果，提出处置建议，小组成员发表意见。*院作工作部署：(1)立即封闭呼吸一科病区，停止收出病员(转出隔离除外)，由*副院长负责，总务科配合。(2)*副院长负责整个病区的流行病学史调查，由护理部和感染控制科配合。(3)*副院长负责病区患者

12、的救治工作，医务部予以配合。(4)医务部负责总体协调，落实好与区卫健局、疾控中心的对接，负责该病人后续的治疗及转运工作。(5)医学工程部与人力资源部负责急救人员及物资的调配。会议结束后各部门负责人紧急投入到防控工作中。.病区封闭和患者隔离9时40分，*主任接到患者张*新冠核酸检测阳性报告后，立即召集科室在岗人员，分配安排工作。(1)要求2名护士、1名医生立即穿戴防护服，关闭该楼层所有通道，转移阳性患者和陪护至病区最东侧的单间病房，同时把同室的病友和陪护也转至东侧的单间病房。(2)通知其他患者和陪护待在所在病房，禁止串门和走动，主管医生做好患者的情绪安抚工作。病区医务人员全部换成二级防护，配戴N95口罩。(3)与总务科确认，关闭空调或新风系统及相关电梯并选派保安守住楼层电梯出入口。(4)立即统计上报科室患者在位情况，在外检查患者上报医务部，由医务部协调返回病区。（5）安排工作人员对本楼层进行消毒灭菌。3.病区医护人员、患者和陪护流行病调查10时3分，院感科*按照新冠流行病史调