脑伤宁对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

1、脑伤宁对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用【摘要】目的观察脑伤宁对大鼠脑缺血再灌注脑损伤的保护作用。方法凝闭大鼠双侧椎动脉45h后，夹闭颈总动脉30in，再灌注90in，造成大鼠脑缺血再灌注损伤模型，观察脑伤宁对脑组织中生化指标及脑电图的影响。结果缺血再灌注造成脑组织严重损伤，脑组织中水、Na+、a2+含量及丙二醛(DA)含量较对照组明显增高，而超氧化物歧化酶(SD)活力较对照组降低，并伴有脑电图异常和脑组织构造病理性改变。夹闭颈总动脉前30in腹腔注射脑伤宁能降低脑组织中水、Na+、a2+含量及DA含量，并进步SD活力，对组织学检查及脑电图也有所改善。结论脑伤宁对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。【

2、关键词】脑伤宁；脑缺血；再灌注损伤；a2+超载Abstrat:bjetiveTstudytheprtetiveeffetsfNashangningreipenbraininjuryinrats.ethdsThebilateralvertebralarteriesfratsereluded,and45hlater,theartidarteriesfratsinthensiusnditinereludedfr30inflledbyreperfusinfr90in.TheeffetsfNashangningreipenthententsfater,Na+,anda2+inrtex,alndialde

3、hyde(DA)ntentandsuperxidedisutase(SD)ativityinbrainheispheres,asellastheEEGativitieserebserved.Results30inisheiaand90inafterreperfusin,thententsfater,Na+,a2+,andDAereinreased,andtheSDativityasreduedithabnralEEGativityandisheiinjuryinthebraintissues.Nashangningreipedereasedtheelevatedater,Na+,a2+,and

4、DAntents,inreasedtheSDativity,reduedtheisheiinjuryfbraintissue,andprtedthereveryfEEGativities.nlusinNashangninghasprtetiveeffetsnerebralisheia-reperfusininjuryinrats.Keyrds:Nashangningreipe;erebralisheia;reperfusininjury;a2+verlading脑伤宁是武汉大学人民医院神经科王安国教授之经历方，由川芎、当归、白芍、琥珀、钩藤、远志、茯苓、夜交藤等中药组成，具有活血化瘀、宁心安神

5、、平肝熄风、健脾除湿之成效。早期药理学研究1说明脑伤宁可使高血黏模型大鼠的全血黏度、血浆黏度及红细胞压积明显降低，为其临床应用提供初步理论根据，本实验进一步研究脑伤宁对急性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用，并讨论其作用机制。1材料和仪器1.1药材实验所需中药材均购自湖北省中药材公司,由武汉大学人民医院药学部质检科鉴定。1.2药物与试剂丁咯地尔注射液，批号01754，法国施维雅药厂消费。超氧化物歧化酶(SD)试剂盒，批号20221004；丙二醛(DA)试剂盒，批号20220811，均购自南京建成生物制剂研究所。1.4仪器AA-670原子分光光度计日本岛津公司，R-6200型多道生理记录仪日本岛津公

6、司。2实验方法2.1脑伤宁汤剂的制备参照文献1的方法制备。2.2模型的建立与给药大鼠50只，随机分为5组，每组10只：即假手术sha组及单纯缺血再灌注(IR)组，脑伤宁2个剂量组及丁咯地尔组。四血管结扎全脑缺血模型的制备参考文献2。大鼠腹腔注射水合氯醛400gkg-1后，固定于立体定位仪，电烧灼凝闭两侧椎动脉，然后别离双侧颈总动脉并置套扣待用。置电极于大鼠额顶，描记脑电图(EEG)。手术后45h，待大鼠完全清醒后，试验动物分别腹腔注射25、100gkg-1脑伤宁，或5gkg-1丁咯地尔注射液，30in后扣闭两侧颈总动脉达30in，松扣后再灌注90in。sha组同样手术，但不阻断动脉。转贴于论文

7、联盟.ll.2.3检测指标再灌注完毕时迅速断头取出脑组织，去脑干和小脑，将脑组织划“+分为4个局部，3份立即低温(-20)保存用于DA含量、SD活性和病理组织学检查，1份用于测定脑组织水、Na+、a2+含量。其中脑水分用干湿重法，Na+、a2+含量用火焰原子吸收分光光度法3,邻苯三酚改进法4测定SD活性，硫代巴比妥酸法5测定DA含量。2.4统计学处理实验数据以s表示，对EEG的影响采用Ridit分析，其它采用组间t检验进展统计学分析，P0.05为差异有显著性。3结果3.1对脑缺血再灌注动物死亡率及EEG的影响在整个缺血及再灌注期间，IR组、脑伤宁25gkg-1组及丁咯地尔组分别有3、1、1只动

8、物因缺血损伤引起动物死亡。四血管结扎后大鼠EEG电压波幅变小，脑电很快抑制变平，按EEG变化程度分为5级6，即到达缺血前波幅100%属1级，75%以上为2级，75%25%为3级，25%以下为4级，几乎呈等电位的为5级。sha组在整个缺血及再灌注期间，EEG变化均以级为主。而缺血再灌注组缺血期EEG变化级有3只，级有3只；再灌注期EEG变化级有2只，级有4只，经Ridit分析，与sha组比拟差异显著，P0.05。脑伤宁组EEG改变以级及级为主，经Ridit分析，与IR组比拟差异显著，P0.05或P0.01，说明脑伤宁可显著改善EEG的恢复程度(见表1)。表1对大鼠脑缺血再灌注后EEG幅度变化的影

9、响略Tab.1EffetnEEGinratsinduedbyerebralisheiareperfusin与假手术组比拟：*P0.05；与缺血再灌注组比拟：#P0.05，#P0.013.2对脑组织水、Na+、a2+、DA含量及SD活性的影响再灌注后IR组脑组织水、Na+、a2+以及DA含量均明显高于sha组(P0.05或P0.01)。脑伤宁组脑组织水、Na+、a2+，以及DA含量明显低于IR组(P0.05或P0.01)。而IR组脑组织SD活性低于sha组(P0.01)，脑伤宁组脑组织SD活性明显高于IR组(P0.01)，与sha组接近(见表2)。3.3对脑组织形态学改变的影响缺血再灌注造成神经

10、元锥体细胞肿胀、变形，乃至核固缩，核溶解，细胞坏死，间质也变得疏松。脑伤宁能显著减轻这种损伤性改变，使坏死细胞数目减少，可见到较为完好的锥体细胞，间质也比拟致密。4讨论脑缺血再灌注损伤的发活力理涉及诸多方面，a2+超载与氧自由基的大量产生在其中扮演着重要的角色。本实验观察到脑缺血再灌注损伤后大脑皮层a2+累积，DA含量增加，与文献3报道的结果一致，脑伤宁能明显降低缺血再灌注后脑组织的a2+和DA含量，增强SD活性，显示出抗a2+超载及抗氧自由基作用。表2对大鼠脑缺血再灌注后生化指标变化的影响略Tab.2Effetnbiheialindexinduedbyerebralisheiareperfusininrat与假手术组比拟：*P0.05，*P0.01；与缺血再灌注组比拟：#P0.05，#P0.01【参考文献】1王芳，周珂，余恩欣.脑伤宁治疗脑外伤后综合征的药效学研究J.广东药学院学报，2022，19(3)：249-252.2彭新琦，可君.三重莨菪类药物在大鼠急性前脑缺血及再灌注损伤中的作用J.中国药理学报，1992，13(4)：357-361.3赵卫国，张天锡，施爱芳，等.脑缺血脑水肿的实验研究-钙在脑缺血损伤中的作用J.中华神经精神科杂志，1991，24(1)：27-30.4静天玉，赵晓瑜.用终止剂改进超氧化物歧化