葛根总黄酮缓释制剂研究

1、根中总黄酮缓释制剂的研究概括针对根黄酮溶解性差、生物利用度低的问题，本研究利用根黄酮的生物黏附材料制备了胃滞留缓释制剂，以提高根黄酮的生物利用度。同时，在根黄酮类生物黏附性保胃剂的基础上，还研究了添加浮选剂的浮选与生物黏附的协同保胃体系。本研究分别以羟丙基甲基纤维素（ HPMC ）和卡波姆（ CP ）为骨架粘合材料，乳糖为致孔剂，硬脂酸镁为润滑剂。采用直接粉末压制法制备了根总黄酮缓释骨架胶片。溶出度试验采用桨法测定。以根为试验对象，考察了HPMC用量、 CP用量和乳糖用量对总黄酮缓释骨架胶片释放率的影响。 ，并且在该实验中还检查了压力的影响。此外，本研究在总根黄酮缓释骨架胶片缓释制剂的基础上，

2、加入适当比例的柠檬酸和碳酸氢钠，采用上述两种压片方法，制备了一种浮动生物粘附增效制剂。 , 并检查其释放效果。作为缓释制剂的制备材料， HPMC和CP均能延缓根黄酮类药物的释放， CP具有更强的缓释作用。缓释效果更好。本研究中，当根黄酮、HPMC 、 CP和乳糖的比例分别为100:90:21.3:73.7和100:60:45:73.7时，药物在12小时内能达到较好的缓释效果。效果和高累积释放（高达88.9% ） 。研究发现，在制备黄酮类化合物时，乳糖作为致孔剂可以促进主药的释放，压片时的压力也会影响释放程度。泡腾漂浮物的加入有效地促进了药物的浮力，使药物达到更好的缓释效果。关键词根总黄酮 缓释

3、制剂胃潴留系统 体外溶出试验目录 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc201542375 第1章前言 PAGEREF _Toc201542376 h 1 HYPERLINK l _Toc201542376 1.1根黄酮的 PAGEREF _Toc201542376 h 理化性质和药理作用1 HYPERLINK l _Toc201542377 1.1.1总黄酮理化性质 PAGEREF _Toc201542377 h 1 HYPERLINK l _Toc201542378 1.1.2根的药理作用研究 PAGEREF _Toc201542378 h 1 HYPERLINK

4、 l _Toc201542379 1.2目前已开发的根黄酮类产品 PAGEREF _Toc201542379 h 2 HYPERLINK l _Toc201542380 1.3根黄酮的临床研究 PAGEREF _Toc201542380 h 3 HYPERLINK l _Toc201542381 1.4目前缓控释制剂的主要研究 PAGEREF _Toc201542381 h 3 HYPERLINK l _Toc201542382 1.4.1缓控释制剂的定义和类型 PAGEREF _Toc201542382 h 3 HYPERLINK l _Toc201542383 1.4.2胃潴留给药系统 P

5、AGEREF _Toc201542383 h 4 HYPERLINK l _Toc201542384 1.5黄酮类缓释制剂产品 PAGEREF _Toc201542384 h 研究现状7 HYPERLINK l _Toc201542385 1.5.1根元素的固体分散体 PAGEREF _Toc201542385 h 7 HYPERLINK l _Toc201542386 1.5.2口服类黄酮制剂 PAGEREF _Toc201542386 h 7 HYPERLINK l _Toc201542387 1.5.3总黄酮生物粘附片 PAGEREF _Toc201542387 h 7 HYPERLIN

6、K l _Toc201542388 1.5.4黄酮类缓释胶囊 PAGEREF _Toc201542388 h 8 HYPERLINK l _Toc201542389 1.5.5总黄酮骨架缓释片 PAGEREF _Toc201542389 h 8 HYPERLINK l _Toc201542390 1.5.6根黄酮EC-PEG给药系统 PAGEREF _Toc201542390 h 8 HYPERLINK l _Toc201542391 1.6结语9 HYPERLINK l _Toc201542392 第2章实验第 PAGEREF _Toc201542393 h 10节 HYPERLINK l

7、_Toc201542393 2.1前言 PAGEREF _Toc201542393 h 10 HYPERLINK l _Toc201542394 2.2仪器和试剂 PAGEREF _Toc201542394 h 10 HYPERLINK l _Toc201542395 2.2.1文书 PAGEREF _Toc201542395 h 10 HYPERLINK l _Toc201542396 2.2.2药物和试剂 PAGEREF _Toc201542396 h 10 HYPERLINK l _Toc201542397 2.3实验方法 PAGEREF _Toc201542397 h 11 HYPER

8、LINK l _Toc201542398 2.3.1总黄酮缓释片的制备 PAGEREF _Toc201542398 h 11 HYPERLINK l _Toc201542399 2.4标准曲线 PAGEREF _Toc201542399 h 11 HYPERLINK l _Toc201542400 2.4.1根元素最大吸收波长的测定 PAGEREF _Toc201542400 h 11 HYPERLINK l _Toc201542401 2.4.2标准样品的制备 PAGEREF _Toc201542401 h 12 HYPERLINK l _Toc201542402 2.5桨法测定溶出度的操作

9、方法 PAGEREF _Toc201542402 h 13 HYPERLINK l _Toc201542392 第三章结果与讨论 PAGEREF _Toc201542393 h 10 HYPERLINK l _Toc201542403 3.1药物溶出过程 PAGEREF _Toc201542403 h 15 HYPERLINK l _Toc201542404 3.2 HPMC用量对释放率的影响 PAGEREF _Toc201542404 h 15 HYPERLINK l _Toc201542405 3.3 CP剂量对释放率的影响 PAGEREF _Toc201542405 h 17 HYPER

10、LINK l _Toc201542406 3.4乳糖剂量对释放率的影响 PAGEREF _Toc201542406 h 18 HYPERLINK l _Toc201542407 3.5压力对释放程度的影响 PAGEREF _Toc201542407 h 20 HYPERLINK l _Toc201542408 3.6粉末压片和湿法制粒压片对药物释放的影响比较 PAGEREF _Toc201542408 h 21 HYPERLINK l _Toc201542409 3.7漂浮剂对药物释放的影响 PAGEREF _Toc201542409 h 23 HYPERLINK l _Toc20154241

11、0 第 4 章 结论 PAGEREF _Toc201542410 h 25 HYPERLINK l _Toc201542411 参考文献 PAGEREF _Toc201542411 h 26 HYPERLINK l _Toc201542412 至 PAGEREF _Toc201542412 h 28第一章 前言1.1 根黄酮的理化性质和药理作用根是豆科野生或干藤的干根，干藤也可称为粉。根为常用中药，最早记载于神农本草，列为中品。我国为属分布中心，集中在西南、中南至东南。其属中野及散，又名甘，可入药。具有舒筋活络、解毒生津等作用，对心血管系统、免疫系统等疾病有很好的治疗作用 1-2 。1.1.1

12、总根黄酮的理化性质豆科植物葛根 (Willd.) Ohwi的根，呈棕黄色至淡黄色粉末，无臭。其主要成分为黄豆苷元、黄豆苷、葛根素、葛根素-7-木糖苷等。由于它主要是类黄酮，它具有类黄酮的特性：黄酮类化合物由于分子中存在酚羟基而呈酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺和二甲基甲酰胺。黄酮类化合物由于分子中7-吡喃环上的1位氧原子和未共享的电子对而呈弱碱性，可与浓硫酸、盐酸等强无机酸形成盐，但该盐为极不稳定，加水后分解。黄酮类化合物溶于浓硫酸中的盐类，常呈现特殊的颜色，可用于鉴别。部分甲氧基黄酮溶于浓盐酸中呈深黄色，与生物碱沉淀剂可形成沉淀。总根黄酮含量低。例如，根黄酮在水中的溶解度仅为1.110

13、-2 molL -1 。根黄酮在体内吸收不完全， 50%以上的原药从粪便中排出。利用程度低，一般2-3wk甚至2-3mo后见效，给患者用药带来不便。1.1.2根药理研究近年来，对根的药理作用进行了大量的研究工作，主要有以下几个方面：对平滑肌的作用、抗癌和诱导癌细胞分化、抗氧化作用、降血糖作用、对冠状动脉的作用。 , 对心律失常 对心脏功能和心肌生成的影响，对血压和外周血管的影响，抑制血小板聚集，对记忆的影响，对免疫功能的影响，解热作用和解痉作用。影响。临床上，根黄酮主要用于解筋退热、生津、透疹、壮阳止泻。临床上主要用于治疗酗酒、视网膜、动静脉阻塞、突发性耳聋、心肌梗塞、冠心病、心绞痛、高血压、

14、高血脂等疾病。 3-6研究表明，根含有多种营养物质和活性物质（异黄酮、黄豆苷元等），具有多种药用功效，是一种极具开发利用价值的资源。根可用于开发各种药用产品，还可用于制造营养保健食品。1.2已开发的根黄酮产品目前，在根药的开发中，最重要的是根元素。属于近几年新开发的高端产品，效果好，应用广，价值高。如解筋退热、生津、透疹、升阳止泻等功效与主治。用于外感发热，头痛，颈背强痛，口渴，消渴，麻疹不通，热痢，泄泻；根提取物粉末用于高血压和强烈的颈部疼痛，剂型包括颗粒和粉末。还有根状的注射剂、胶囊剂和片剂。如8 - - 2 - D - 2-吡喃葡萄糖2472-二羟基异黄酮是从根中提取分离得到的。首乌可扩

15、张冠状动脉，降低血压，减慢心率，降低心肌耗氧指数，无明显负性肌力作用，还可降低胆固醇和血液粘度，改善血液微循环，保护心肌，用于心肌梗塞、冠心病疾病，心绞痛，视网膜动静脉阻塞，突发性耳聋。御风宁心片：从根部加工后提取制成的片剂。功能与主治：缓解痉挛和疼痛，增强脑和冠状动脉血流量。用于高血压、头晕、头痛、颈痛、冠心病、心绞痛、神经性头痛、早期突发性耳聋等症。心血宁片：主要成分：根、山楂。功能与主治：促进血液循环，降低血压。用于冠心病、心绞痛、高脂血症和高血压引起的颈痛等症。根岑莲片：主料：根、黄芩、黄连、甘草。功能与主治： 散筋、清热、止泻、止痢。用于下痢，痢疾，热烦烦渴，下身臭臭。1.3根黄酮的

16、临床研究根在水中的溶解度仅为1.110 -2 molL -1 ，根黄酮在体内吸收不完全， 50%以上的原药从粪便中排出，生物利用度低。一般2-3wk甚至2-3mo后生效。病人吃药不方便。为了提高其生物利用度，减少给药次数，增加患者依从性，增加血药浓度的稳定性，为了改善上述不利因素，相继开发了新的根黄酮类产品。植物黄酮药理活性强、疗效显着、临床应用广泛，是一类很有前景的药物。利用前药和软药的原理对其结构进行修饰，提高其水溶性和脂溶性，改变其在体内的脂水分配系数，提高其生物利用度和选择性，最终增强其药理活性。将成为未来植物类黄酮研究的重点。例如，临床注射液中应添加助溶剂以提高溶解度。目前临床上根根

17、注射剂的配方中，只有加入较高浓度的丙二醇作为增溶溶剂，才能达到注射剂所需要的药物浓度，不仅增加了制剂的成本，而且增加了药效。药物溶液的粘度。制剂生产中过滤困难。研究发现，赖氨酸、精氨酸、组氨酸、烟酰胺、聚乙烯吡咯烷酮（ PVP ）可使根在水中的溶解度提高12倍，在根注射剂的处方中可作为助溶剂。同时，目前生产中仍难以获得高纯度的根茎原料。用于临床的根成分含有5% 至 10%的甲氧配基。有人测量了甲氧配基和根根的溶解度。 ，分别为1. 7710 - 1 molL -1和1. 1110 - 1 molL -1 。研究发现，随着甲氧配基含量的增加，根的溶解度显着增加，且两种化合物的溶解度大于两种化合物

18、之和，说明结构相似的两种化合物具有互溶性。因此，有必要寻求一种提高根根溶解度的方法，以扩大其临床应用。1.4目前缓控释制剂的主要研究1.4.1缓控释制剂的定义和类型缓释制剂（sustained-release system），有时也称为长效制剂或缓效制剂，是指通过适当的方法，延缓药物在体内的释放、吸收、替代和排泄的过程，从而延长药物的作用时间或减少其毒副作用的给药系统，其动力学是一级药物释放。主要类型有：不溶性基质制剂、生物可溶性基质制剂、亲水凝胶基质制剂和缓释包衣制剂。常用剂型有片剂、胶囊剂、颗粒剂等 7 ，如阿司匹林缓释胶囊、硫酸吗啡缓释片等。控释制剂（控释系统）可以控制药物的释放速率以满

19、足药代动力学的需要，使药物的治疗浓度长期保持恒定，避免出现峰谷现象。近零级速率）在作用器官等特定吸收部位释放或控释，动力学为零级或近零级药物释放。主要类型有：固定速率释放制剂，如基质型、薄膜包衣型、渗透泵型、离子交换树脂型、包合物型、微球（胶囊）型等 8 缓控释制剂等.;制剂，如胃滞留漂浮制剂、结肠释放制剂；定时释放制剂，如通过调节高分子材料的侵蚀程度使药物在预定时间释放，或利用生理反馈原理和计算机调节技术达到定时释放目的的脉冲药物释放制剂、膜控剂等。控释不仅包括缓释作用，而且药物的释放被控制在一定值，其动力学比缓释制剂更具有可预测性和重现性。有时靶向药物递送系统、透皮药物递送系统、粘膜药物递

20、送系统和植入药物递送系统也包括在广泛的控释制剂类别中。Seong Hoon Jeong 9使用水胶体分散的乙基纤维素和聚醋酸乙烯酯共聚物作为流化床包衣，配制了一种缓释速崩片剂，可以增加药物的表面积进行树脂复配，从而提高释放速度。田中伸之10等人使用蜂蜡和含有崩解剂的固体分散颗粒制备DCMT)，通过实验证明可以维持难溶性药物的吸收并达到缓释的效果，并证实所制备的制剂可以消除胃肠道的影响。Claudia Reitz 11采用固体脂质挤出法和熔融技术制备的缓释制剂也有较好的应用。1.4.2胃潴留给药系统胃滞留药物递送系统是指延长胃停留时间的一类制剂。一般而言，胃漂浮滞留给药系统是根据流体动力学平衡原

21、理设计的。口服给药后，系统可在胃中长时间漂浮，不受胃排空率的影响。为了达到浮选的目的，制剂的密度一般必须低于胃液的密度。但浮选动力学研究表明，配方的体积密度并不是描述浮选特性的最权威参数，因为浮选力的大小随时间而变化，食品对配方的潜在影响不容忽视。胃潴留制剂作为一种新型缓控释制剂，不仅可以促进药物的吸收，还可以起到靶向胃的作用。其制剂按剂型可大致分为：漂浮片剂、漂浮胶囊剂、微球剂和微丸剂。使用的主要技术包括：漂浮系统、充气系统、生物粘附系统和其他延迟胃排空的装置。马尼南12等。采用离子凝胶法制备多单元漂浮海藻酸钠微球，以碳酸钙为气体形成剂，提高药物包封率，并在凝胶介质中加入壳聚糖。通过包衣包裹

22、，药物可以在胃肠道中达到良好的漂浮性能。该方法可用于制备胃漂浮片。 Srisagul Sungthongjeen 13 等人在多股浮动给药系统的基础上形成的气体技术延长了胃停留时间，可以提高整体生物利用度。王海刚14制备壳聚糖包覆的根部脂质体，通过反相蒸发制备根部脂质体，并在其包覆壳聚糖，以延长药物在吸收部位的停留时间，提高药物的生物学特性。利用率。 1.4.2.1浮动胃保留系统漂浮式胃潴留系统主要是指根据流体力学平衡原理设计的系统，可以在胃液中保持漂浮状态。一般认为，该系统的体积密度小于胃液的密度，使其保持漂浮在胃中，以减少或消除胃排空的作用，提高胃滞留时间。但是随着泡腾系统的出现，制剂的堆

23、积密度不再需要小于胃内容物的堆积密度。根据浮选机理，该系统可分为非泡腾浮选系统和泡腾浮选胃滞留系统。 1.4.2.2生物粘附性胃滞留系统生物黏附胃潴留系统是利用某些高分子材料对生物黏膜的特殊黏附力黏附黏膜上皮，从而延长药物在关键部位的滞留和释放时间，促进药物的吸收，提高生物利用。生物粘附的主要机制有：（1）电荷学说：材料与黏膜表面物质之间的电子扩散，导致表面形成双电层而产生粘附； (2)吸附理论：物质和黏膜表面物质通过德化。 (3)润湿理论：物质溶液在黏膜表面扩散，润湿黏膜产生粘连。该理论可以解释表面活性物质粘附在黏膜上； (4)扩散纠缠理论：材料与黏膜表面物质的相互扩散导致分子间相互纠缠产生

24、粘附； (5)细胞粘附理论：它基于受体配体。它是通过体内亲和力实现的，具有特异性和针对性。不同材料与生物黏膜的粘附机制可以用一种或几种理论来解释，其中最广为接受的一种是扩散纠缠理论。多年来，海藻酸盐、纤维素衍生物、葡聚糖、明胶、果胶、聚葡糖胺和聚丙烯酸等多种物质的生物粘附性已经被测定，认为生物粘附性比较大。大多数性能强的物质本质上都是聚合物，而聚合物的粘附性与其分子结构、分子量、浓度、水分和粘附部位的pH值有关。通常阴离子聚合物与粘液或黏膜层的相互作用最强，在阴离子聚合物中，聚丙烯酸具有良好的粘附性。在所有的粘附材料中，只有凝集素等带有糖基的物质才能特异性粘附细胞，但凝集素仅在中性或碱性条件下

25、具有良好的粘附性，因此其用途受到限制。 .陶1 5 等。使用聚甲基丙烯酸树脂（PMMA）将凝集素与凝集素连接，然后与亲和素共价结合，成功制备生物粘附制剂。 1.4.2.3浮动和生物粘附协同胃滞留系统简单的浮动或生物粘附胃潴留系统有其自身的缺点。两者结合形成协同系统，可以达到更好的留存效果。以甲基丙烯酸和丙烯酸交联的生物粘附性聚合物制备硝酸异山梨醇漂浮片，然后用含有生物粘附性聚合物的卡波姆悬浮液或卡波姆凝胶溶液包衣。 ，具有生物粘附性聚合物的包衣片剂在 pH 1.0 时具有更好的粘附性并且具有较低的密度。 Umamaheshwari 16 等人制备了浮动粘附型消胆胺（colestyramine）

26、微胶囊。包衣材料醋酸丁酸纤维素（CAB）具有黏膜粘附性，浮选机理为碳酸盐，遇酸生成二氧化碳。结果表明消胆胺微胶囊分布在整个胃中，并表现出更长的胃滞留时间。研究发现，影响泡腾生物粘附体系的主要因素有：泡腾剂的用量、聚合物的粘度和用量、溶出介质的pH值、体系的密度和体积等。以HPMC和卡波姆为主要原料制备增效体系时，添加卡波姆可能会影响体系的浮选性能和药物释放性能 17 。然而，协同系统比单一的浮选或生物粘附胃滞留系统更可靠。 1.5黄酮类缓释制剂研究现状1.5.1根元素的固体分散采用固体分散技术，提高根元素的体外溶出率。以聚乙二醇6000 、泊洛沙姆、聚乙二醇6000和聚氧乙烯(40)硬脂酸酯(

27、也称S240 )熔融(1:3)为载体，采用熔融法制备固体分散体的根素。口服给药后，自身微乳遇到体液在胃肠道的蠕动下，会自发分散成粒径为10 - 100 nm O/W型的微乳，克服了大分子药物通过上皮细胞的障碍。胃肠道膜，可用于胃肠道。通道内分布快速均匀，提高了药物的溶出度和渗透性。也可被淋巴吸收，减少胃肠道黏膜的清除和首过效应，在一定程度上阻止药物被酶水解，也减少个体吸收差异。适用于口服吸收差、生物利用度低的药物。1.5.2根黄酮口服微丸配方药物在水和油中的溶解度较低，但在吐温280中的溶解度较大。制成自微乳制剂后，增加了根元素的溶解度。于爱华 18 等人研制的根元素固体自微乳液。稳定性好，分

28、散后形成的乳液液滴粒径小，分布均匀，自微乳液效率高。将根黄酮开发成口服微丸制剂，以提高根黄酮的生物利用度，克服静脉注射后连续滴注和频繁服用片剂的不便。颗粒制剂 19 以其生物利用度高、局部刺激性小、对消化道输液节律影响小等优点，在中药制剂中越来越受到重视。1.5.3根总黄酮生物黏附片向大雄 20 等。以羟丙基甲基纤维素（ HPMC ）和卡波姆（ CP ）为生物黏附材料制备总根黄酮生物黏附片，分析了HPMC用量、 CP用量、致孔剂种类等影响片剂体外释放的因素。研究了乳糖的用量、片剂的粒径、培养基的pH值等，并根据适当的因素和条件制备了总根黄酮生物粘附片，有效提高了其生物利用度。 ，延长其身体动作

29、时间。该方法制备的总根黄酮生物粘附片不仅可以延长药物在胃肠道的停留时间，而且可以增加药物通过黏膜吸收的接触面积，改变细胞膜的流动性，增加药物在小肠上皮细胞中的渗透。渗透。因此，总黄酮骨架缓释片给药系统具有促进药物吸收、提高生物利用度的特点。1.5.4根黄酮缓释胶囊冯焕、田景珍 21 等以乳油为骨架材料， HPMC为致孔剂，糊精为填充材料，采用固体分散技术研制长效根黄酮缓释胶囊。在该方法中，固体分散体一方面可以提高药物的分散性，提高其溶出度，达到突释效果。另一方面，由于药物在载体赋形剂中高度分散，特别是在这种不溶于水的赋形剂中，赋形剂将药物紧紧包裹在其中，减缓了药物的溶解，使药物可以缓慢释放以满

30、足持续释放的要求。1.5.5根总黄酮基质缓释片海龙 22 等人将HPMC和卡波姆（ CP ）联合作为阻滞剂，可以达到每12小时一次的缓释效果，提高其生物利用度。减少给药次数，增加患者依从性，增加血浆浓度的稳定性。1.5.6根黄酮EC-PEG给药系统郭建平、齐荣23等以乙基纤维素（ EC ）和聚乙二醇（ PEG）为载药体系，制备了根黄酮类EC - PEG载药体系。三根黄酮、乙基纤维素的消耗量、聚乙二醇载药体系的粒径、制备温度均对根黄酮的释放有影响。当载体EC - PEG :药物=5 : 0.4 : 1时，根黄酮的给药系统可以达到30分钟65.51%和10分钟95.57%的预期药物释放，达到预期的

31、药物释放效果。1.6结论尚未充分开发利用的天然野生植物资源。随着对根的药理、药物化学、临床应用、活性成分提取、分离和检测技术及其药理功能、保健作用和应用价值等方面研究的不断深入。将越来越受到人们的关注。值得强调的是，根对严重威胁人类生命健康的心脑血管疾病具有重要的药理和治疗作用。在心脑血管疾病高发的今天，根将更加明显。根资源丰富、价格低廉、无毒副作用，继续研究根在保健品中的应用将具有重要的社会意义和经济价值。第二章实验部分 2.1前言缓释制剂是最近被研究的一种给药系统，可以延长药物在胃肠道的停留时间，促进难溶性药物的吸收，从而提高生物利用度24 。根黄酮在体内的吸收不完全，肠道对根黄酮的吸收呈

32、现一级吸收动力学过程，其吸收机制为被动扩散25 。 50%以上的原型药仍从粪便中排出，生物利用度低。一般2wk3wk甚至2mo 3mo后生效。为了提高其生物利用度，以羟丙基甲基纤维素（ HPMC ）和卡波姆（ CP ）为生物缓释材料，制备了总根黄酮骨架胶片，以及影响片剂体外释放的因素，如作为HPMC的用量，对CP的用量、乳糖的用量和压力进行了研究。为黄酮缓释片的处方设计和筛选提供依据。 2.2仪器和试剂2.2.1仪器TDF单冲片机（超益制药机械设备）AL104电子天平 (Mettler - Toledo Instruments,)RC806溶出度测试仪（城市天达天发科技）80目钢筛（上虞五彩仪

33、器厂）HANGPINGJA3003电子天平（天平仪器厂）SY2200 T医用超声波清洗机（生物源超声波设备）UV-2501PC紫外分光光度计（岛津）Wfz UV-2000 紫外-可见分光光度计 (Unico Instruments,)2.2.2药物和试剂80%根黄酮（天益生物）交联聚丙烯酸树脂（卡波姆，PVP 934P ）（易高化工）羟丙基甲基纤维素K 15M(Helister Chemical)聚乙烯吡咯烷酮K30 （沁阳诚达商贸）根对照品（纯度99.0% ，仲景中药研制）乙醇（分析纯，市第三化学试剂厂）盐酸（分析纯，莱阳双双化工） 2.3实验方法2.3.1根总黄酮缓释片的制备 2.3.1.

34、1 5% PVP乙醇溶液的制备首先，计算定量PVP934P所需的95%乙醇的体积（密度约为791g mL ），定量称量PVP放入干净的烧杯中，用量筒量出所需的95%乙醇量，倒入烧杯 充分混合后，用保鲜膜密封保存以备后用。 2.3.1.2总黄酮贴片的制备方法先将根总黄酮、 HPMC 、 CP 、乳糖过80目筛，然后用电子天平按一定比例称量根总黄酮、 HPMC 、 CP 、乳糖，混合通过80过筛，喷5 %PVP乙醇溶液 制备软质材料，过16目筛造粒，烘箱干燥，造粒后与占总量0.5%的硬脂酸镁混合，压制成片剂。 2.3.1.3总黄酮粉直接压片将根总黄酮、 HPMC 、 CP 、乳糖分别过80目筛，然

35、后用电子天平按比例称重，过80目筛，直接混成片剂。 2.4标准曲线2.4.1确定根元素的最大吸收波长使用紫外分光光度扫描仪对根标准进行波长扫描，以确定出现最大吸光度的波长。选择人工胃液作为基础溶液，配制10.08 g/ mL的根元素标准溶液，用紫外双通道分光光度计扫描仪进行波长扫描。扫描结果如下图所示：图2-1根元素的紫外吸收测量图图2-1 葛根素的紫外光谱由上图可知，最大吸光度0.799处的吸收波长为250.10 nm ，确定各溶液在250 nm处测定吸光度。2.4.2标准样品的制备用电子天平准确称取根元素0.0072g，置于100 mL容量瓶中，用人工胃液溶解并稀释至刻度，20恒温水中超声

36、20 min ，用移液管吸取标准将溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0 mL分别置于50 mL容量瓶中，用人工胃液稀释至刻度，得到不同浓度的标准溶液。见下表2-1 ，以人工胃液为空白，用紫外分光光度计在250nm波长处测定各浓度的吸光度值，见表2-1和图2-1表 2-1根标准曲线表2-1 葛根素标准曲线浓度（微克/毫升）吸光度1吸光度2吸光度3平均吸光度1.440.1070.1070.1040.1062.880.2150.2140.2130.2144.320.3250.3210.3200.32 25.760.4360.4370.4340.4367.200.5560

37、.5460.5480.5508.640.6530.6470.6480.64910.080.7560.7540.7550.75511.520.8680.8700.8660.868图 2-2 根标准曲线图2-2 葛根素标准曲线对上述标准曲线进行线性归一化后，方程为：Y=13.238*X+0.0264 R 2 =0.9998 n=8 2.5桨法测定溶出度的操作方法测量前，调整仪器装置，使桨的底部为25mm 2mm。分别量取900mL人工胃液（溶出介质），放入各溶出杯中，加热。当溶出介质温度恒定在37时，按0.5药典规定将电机转速调至100r/h 。将片剂分别放入6个溶出杯中，时间为根黄酮片接触人工胃

38、液后的时间；在规定的取样时间，抽取溶出液5 mL （取样位置应在桨叶顶部与液面的中点，距溶出杯壁的距离）。 10mL )，立即用合适的微孔膜过滤，从取样到过滤应在 30 秒内完成。取澄清滤液1mL ，稀释至第三章结果与讨论 3.1药物溶出过程药物在人工胃液中的溶出释放过程如下图所示：图 3-1 药物溶出过程图3-1 ，上图为挤出的根黄酮缓释片，下图为药物6小时后的照片。可以看出，药物在溶出过程中主要是通过基于基质的扩散来溶解的。3。 2 HPMC用量对释放率的影响保持根黄酮、 CP 、乳糖的量不变，通过改变HPMC的量，四种黄酮CP 、乳糖、 HPMC分别为100:21.3:73.7:60、1

39、00:21.3:73.7:90、100:21.3 ：73.7:135 ，称重，过80目筛，喷5%PVP乙醇溶液，过16目筛制粒，烘箱干燥6050分钟，制粒后加入硬脂酸镁。混合，然后按上述方法压片，用电子天平称量片剂，求质量差，用桨法测定溶出度，用紫外分光光度计测定吸光度，用标准曲线计算其对应浓度根元素的方程。 ，然后计算其累积释放量，见下表：表3-1 HPMC用量对药物累积释放量的影响表3-1 HPMC用量对药物释放的影响释放时间/小时不同比例的根黄酮：CP：乳糖：HPMC100 ： 21.3：73.7 ： 60100:21.3:73.7:90100:21.3:73.7:13500000.50

40、.11560.178850.1740210.217630.225440.1994320.383290.380990.280740.61910.568090.3762660.846930.703620.4730980.841710.771490.53143100.854970.851990.60669120.864570.886450.66867100:21.3:73.7:60 100:21.3:73.7:90100:21.3:73.7:135图3-2 HPMC用量对药物累积释放的影响曲线图3-2 HPMC用量对药物释放的影响曲线从上表可以看出，随着HPMC用量的增加，药物的释放速度降低，但2小

41、时后效果不明显。这是因为缓释片刚接触介质时亲水凝胶的水合速度较慢，尚未释放。凝胶层形成，药物释放主要以表面药物脱落和溶出为主；随着时间的延长， HPMC的加入对释放度的影响逐渐明显，凝胶层已经形成。形成的凝胶层较厚，药物难以渗透，因此药物释放速度较慢。同时从图表中可以看出，当主药： CP ：乳糖：HPMC为100：21.3：73.7：90时， 6小时内可达到70.36%的累积释放率，缓释12小时即可见效，累计释放率可达88.6%。 3.3 CP用量对释放率的影响保持根黄酮、 HPMC和乳糖的量不变，通过改变CP的量，根黄酮、乳糖、 HPMC和CP分别为100:73.7:60:21.3、100:

42、73.7:60:45、100:73.7 :60按:90 称重，过80目筛，混匀，加入5%PVP乙醇溶液，过16目筛造粒，烘箱干燥6050分钟，加入硬脂酸镁全部混合造粒后，按上述方法压片，按上述方法称重，用桨法进行溶出度试验，计算平均累积释放量，如下表和图所示：表3-2 CP 用量对药物累积释放量的影响表3-2 CP用量对药物释放的影响释放时间/小时不同比例的根黄酮：乳糖：HPMC：CP100:73.7 : 60 : 21.3100:73.7:60:45100:73.7:60:9000000.50.11560.12220.1532510.217630.170530.180820.383290.2

43、4910.2539840.61910.533310.3928260.846930.746850.5096980.841710.830130.5995100.854970.880040.66904120.864570.888690.78838100:73.7:60:21.3 100:73.7:60:45100:73.7:60:90图3-3 CP用量对药物累积释放的影响曲线图3-3 CP用量对药物释放的影响曲线从表和图中可以看出，与HPMC的作用类似，药物中的CP也在人工胃液中形成凝胶层，阻碍药物的溶出，达到缓释的效果。从表中可以看出， CP形成的凝胶层比等量HPMC形成的凝胶层更厚，延缓药物溶出

44、的能力更强。同时，当主药： HPMC：乳糖：CP为100 ： 60 ： 73.7：45时，6小时内药物累积释放率可达74.7%， 12小时内可达到良好的缓释效果，累计释放率可达88.9% 。 3.4乳糖剂量对释放速率的影响保持根黄酮、 CP 、 HPMC用量不变，通过改变乳糖量，根黄酮、 HPMC、CP 、乳糖分别为100 ： 60：21.3：73.7、100：60：21.3：73.7、100： 60：21.3：73.7 ，混合过80目样品筛，加入5%PVP乙醇溶液制成软料，过16目样品筛造粒，60烘箱干燥50分钟，造粒后加入镁硬脂酸盐混匀，然后按上述方法压片，按上述方法称重，用桨法测定累积释

45、放率，见下表和图：表3-3乳糖用量对药物累积释放的影响表3-3 乳糖量对药物释放的影响释放时间/小时不同比例的根黄酮：HPMC：CP：乳糖100:60:21.3:30100:60:21.3:73.7100:60:21.3:9000000.50.091730.109490.0924210.144660.178880.1924120.398940.361060.4053340.703640.565620.6647360.818280.676250.8404380.850110.758280.89502100.867140.806460.88262120.873470.837610.88889100

46、:60:21.3:30 100:60:21.3:73.7 100:60:21.3:90图3-4乳糖用量对药物累积释放的影响曲线图3-4 乳糖用量对药物释放的影响曲线从表和图中可以看出，随着乳糖用量的增加，药物的累积释放量变化不大，这可能是由于乳糖作为致孔剂和填充剂对药物溶出影响不大，可能是由于HPMC和CP对药物溶出的影响。对药物释放影响较大的原因。 3.5压力对释放程度的影响根黄酮配比： HPMC：CP：乳糖100：60：21.3：73.7不变，分别称重，过80目筛，加入5%PVP乙醇液制成软料，过16目筛造粒，干燥烘箱6050分钟，造粒后加入0.5%硬脂酸镁，在高压、中压、低压三种不同压力

47、下压片机压片。 .并按上述方法称重，并用桨法测定，计算累积释放量。见下表：表 3-4 压力对累积药物释放的影响表3-4 预期对药物释放的影响释放时间/小时不同压力下的释放度巨大的压力中压压力小00000.50.103310.081730.1027110.124460.124080.3901420.225180.445580.8115440.547830.864530.8192860.777530.879630.8278680.887970.880350.84594100.903590.892050.85259120.904780.89210.85587高压 中压 小压力图3-5 压力对药物累积

48、释放的影响曲线图3 - 5预期对药物释放的影响曲线从表中可以看出：在设定压力范围内，随着压力的增加，药物的释放速度变慢。这是由于药物处于压力作用下，压力的增加使药物分子之间的空间缩小，溶出度增加。在我们的实验中， HPMC和CP形成的凝胶层更稳定，从而更好地防止了药物的溶解。从上表可以看出，在所使用的压力范围内，压力越大，越有利于根黄酮缓释制剂的缓释。这主要是因为压力很小，而且药物比较蓬松，容易造成药物松动。 3.6粉末压片和湿法制粒压片对药物释放的影响比较固定根总黄酮、 HPMC、CP、乳糖100:135:21.3:73.7不变。用电子天平准确称量并通过80目钢筛混合，然后将样品分成两部分：

49、一份加入5 %PVP乙醇溶液制成软料，过16目钢筛造粒，烘箱干燥50分钟，过6016目钢筛造粒，加入0.5%镁硬脂酸盐进行完全混合。 ，通过压片机。另一部分在通过80目钢筛后直接在压片机中压制。采用桨法对两种片剂进行溶出度测试，计算累积释放量，如下图所示：表 3-5不同压片方式对释放率的影响表3-5 不同生产方式对药物释放的影响释放时间/小时不同压片方式下的释放度制粒和压片粉剂0000.50.174020.0999610.199430.123320.279730.2447340.374040.4211160.471350.5380580.527610.63332100.600270.66017

50、120.659340.67312造粒压片 粉末压片图 3-6 不同制备方法的释放曲线图3-6 不同生产方式对药物释放的影响曲线从上图可以看出，粉末压片可以加速药物的溶出，这主要是压片前粉末蓬松造成的。一般不使用直接压缩方法。 3.7浮选剂对药物释放的影响根黄酮的比例： HPMC：CP：乳糖在100:60:21.3:73.7不变。在此基础上加入柠檬酸和碳酸氢钠，以改善药物的漂浮性能。研究表明，当浮剂用量占总量的比例为1 ： 0.76时，浮粘协同系统能达到最佳的胃潴留效果。压片时，先称取根黄酮： HPMC：CP：乳糖的比例为100 ： 60 ： 21.3：73.7，过80目样品筛混匀，加入5% P

51、VP乙醇溶液制成软料，过一个16目样品筛。通过样品筛造粒，在烘箱中干燥6050分钟， 16目样品筛进行造粒，然后分成两部分：取一份，以1%的比例称取碳酸氢钠和柠檬酸（ 1 : 0.76 ），加入0.5%的硬脂酸镁，然后压片。另一部分直接加入0.5%硬脂酸镁压制成片剂。分别用桨法测定两种片剂的溶出度，计算累积溶出度。见下表：表 3-6不同缓释系统与释放曲线表3-6 不同缓释系统药物释放的影响释放时间/小时在不同的缓释系统下释放胃黏附系统浮附协同系统0000.50.12220.1581910.170530.1819920.248430.2701240.531710.4649660.743880.7

52、556480.824210.92029100.870.93987120.87410.94348胃黏附系统 浮动黏附协同系统图 3-7 不同缓释系统对释放速率的影响曲线图3-7 不同缓释系统释药效果曲线实验发现，含浮选剂的制剂放入溶出瓶后迅速上浮，逐渐侵蚀人工胃液表面，而不含浮选剂的片剂则基本在溶出瓶下部释放药物。人工胃液随着搅拌桨的旋转。从上表和实验可以看出，漂浮-黏附增效体系配方可以增加药物在12小时内的累积释放，并且可以加速药物的释放，这主要是由于柠檬酸的逐渐释放和药物溶解过程中的碳酸氢钠。浸润的人工胃液反应产生气体CO 2促进药物上浮，由于片剂部分的柠檬酸与碳酸氢钠直接反应，药物以更分散

53、的状态分散在人工胃液中，如实验中观察到的，浮选-粘附协同系统制剂比后者更早地分散在人工胃液中。第四章结论HPMC和CP可作为骨架材料制备难溶性药物根黄酮缓释制剂，特别是当两者的用量达到适当比例时，根黄酮可以达到良好的缓释效果。例如，当实验中主药： CP ：乳糖： HPMC为100：21.3：73.7：90和100：45 ： 73.7 ： 60时，该药物可以达到良好的缓释效果和较高的累积释放。同时，在制备根黄酮缓释制剂时，压片时应采用较大的压力，使药物达到较好的缓释效果。此外，在压片过程中应尽量采用制粒和压片。由于乳糖对黄酮类缓释制剂的制备影响不大，为增加药物用量，可适当减少乳糖的用量，以达到临

54、床上以最小剂量达到最佳血药浓度。上述研究发现，黄酮黄酮漂浮-粘附增效系统制剂可使根黄酮在胃液中呈漂浮状态，从而达到较好的缓释效果。因此，当胶粘骨架片不能达到所需的缓释效果时，可以考虑。用于制备根黄酮缓释制剂的浮动-粘附协同系统。参考1舒平植物类黄酮药理作用研究进展J.医学院学报, 2006 , 20 ( 1 ): 79-80.2郝.根的研究与发展现状J.氨基酸和生物资源，2006，28 (2) : 24 - 26。3王震，李，王艳。根的研究进展J.医学, 2007 , 28(10) : 464-466 .4李树河，颜文根系资源、化学成分及药理作用研究综述J. HYPERLINK %20%20%

55、20%20:/210.43.9.10/KNS50/Navi/Bridge.aspx?LinkType=BaseLink&DBCode=cjfd&TableName=cjfdbaseinfo&Field=BaseID&Value=SZGY&NaviLink=%e6%97%b6%e7%8f%8d%e5%9b%bd%e5%8c%bb%e5%9b%bd%e8%8d%af t _blank 时政国药, 2006 , 17(11) : 2305-2306.5舒明。中药根的药理研究与进展J.中医，2005 ， （1） ： 58-60。6梁贤道，朱承根根黄酮的研究进展J.医学研究通讯, 2004, 33(11

56、) : 33-35 1.7平启能.现代药学C.：中国医药科技，1998.82。8亚斌，慧玲口服缓控释制剂研究进展J.科学技术, 2007, 23(8) 221-222.9 Seong Hoon Jeong 和KinamPark.各种聚合物包衣离子交换树脂复合缓释速崩片的研制J . HYPERLINK %20%20%20%20:/%20%20%20%20sciencedirect%20%20%20%20/science/journal/03785173 国际药学杂志。 2008 年， 353 ： 195-204。10 Nobuyuki Tanaka 、 Keiji Imai 、 Kazuto O

57、kimoto等。开发一种新型缓释系统J，尼伐地平固体分散颗粒控制崩解骨架片（DCMT）（II）：体内评价。控制杂志出版2006，112 ： 51-56 。11克劳迪娅赖茨和彼得克莱内巴德。缓释剂型的固体挤出J . HYPERLINK %20%20%20%20:/%20%20%20%20sciencedirect%20%20%20%20/science/journal/09396411 欧洲药学和生物药剂学杂志， 2007 年， 67(2) ： 440-448。12马尼南,陆旭,王启芳.等。新型缓释浮动微球的研制与评价J . HYPERLINK %20%20%20%20:/%20%20%20%20sciencedirect%20%20%20%20/sci