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文档简介
1、专题细胞工程 细胞工程 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 细胞工程应用的原理和方法研究的水平研究的目的细胞生物学和分子生物学细胞整体水平或细胞器水平按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品概念分类植物细胞工程动物细胞工程前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术,后者是分子水平上的生物技术克隆多莉羊技术是 水平上的技术,培育抗虫棉是 水平上的技术。细胞工程与基因工程相比:细胞分子思考:利用菊花花瓣微型繁殖培养的菊花2.1植物细胞工程2.1.1植物细胞工程的基本技
2、术植物组织培养探究:1、为什么已分化的植物组织或细胞能培养成完整植物体? 植物细胞具有全能性。2、什么是细胞的全能性?具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能,也就是说,每个生物细胞都具有全能性的特点 。在特定的时间和空间条件下,基因选择性的表达的结果。生物的每一个细胞都有本物种的全套遗传物质,都有发育成完整个体的全套基因。4、生物体内的细胞为什么没有表现出全能性,而是分化成不同的组织器官?3、已分化的细胞为什么具有发育成完整个体的潜能?6.细胞表现全能性的条件有哪些? 离体、营养物质、激素及其它适宜条件。5、大小: 受精卵生殖细胞体细胞2) 植物细胞动物细胞 3)
3、 1) 受精卵的全能性最高 4)分化程度低的细胞分化程度 高的细胞(1)在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作? 防止杂菌污染,因为杂菌生长快,会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害的物质,导致培养物迅速死亡。讨论(3)请根据上面的实验过程,概括出植物组织培养技术的流程简图。模型构建植物材料(消毒)脱分化无菌接种、诱导愈伤组织再分化诱导试管苗移栽到大田,培养成正常植株1、有关全能性的表述中,不正确的是 受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完 整个体,因此全能性最高 生物体内细胞由于分化全能性不能表达 卵细胞和受精卵一样,细胞未分化,全能 性很高 在一定条件下,植物
4、细胞离体培养能表现 出全能性趁热打铁:强调几个概念:(1)愈伤组织: 离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。(2)植物细胞的脱分化: 是让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程。(3)脱分化的实质和结果分别是什么?实质:恢复细胞的全能性过程结果:形成愈伤组织(4)植物细胞的再分化: 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等 器官的过程。植物组织培养的培养基无机营养成分:C,H,O大量元素及部分微量元素有机营养成分 含N物质:包括维生素和氨基酸 碳源:2%5%的
5、蔗糖 琼脂:起支持作用 相关激素:生长素,细胞分裂素和赤霉素PH值:5.06.0外植体愈伤组织根、芽植物体脱分化再分化一、植物组织培养的过程(离体的,已分化组织或细胞)(未分化)(分化)幼芽或幼根?条件?优点?特点?繁殖速度快不受季节限制工厂化生产幼苗无毒保持优良性状适宜温度、光照、 pH和无菌环境。无机物、有机物和植物激素(生长素,细胞分裂素等)无定形状态薄壁细胞高度液泡化排列疏松、无规则无叶绿体,不进行光合作用分化程度低去分化较易理论基础:细胞的全能性2.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的( )A.消毒灭菌B.适宜的温度C.充足的光照D.适宜的
6、养料和激素C3.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,不需要( )A.具有完整细胞核的细胞B.离体状态C.导入外源基因D.一定的营养物质和激素C 番茄与马铃薯同属茄科植物,但不是同 属植物。番茄的果实和马铃薯的块茎是我们经常食用的蔬菜。马铃薯块茎生长在土壤中。 人们曾经有这样一个幻想:让一株植株地上部分结番茄,地下部分长土豆。 这个幻想可能实现吗?一个梦想?因为不同种生物之间存在着生殖隔离,所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。于是,科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交,来实现这一美妙的设想。二、植物体细胞杂交技术这幅番茄马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么?理想图 1972年
7、卡尔森等通过两个烟草品种之间原生质体的融合,获得了第一个体细胞杂种。背景资料1978年梅尔彻斯(Melchers)等首次获得了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种“马铃薯番茄”。 目前,已得到栽培烟草与野生烟草、栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种及其后代,获得了有价值的新品系或育种上有用的新材料。 白菜甘蓝白菜甘蓝“白菜甘蓝”同普通白菜相比,具有生长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。1你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合,遇到的第一个障碍是什么?2有没有一种温和的去壁方法呢?3为什么两个原生质体能发生融合,这与细胞膜的什么特性有关?4如果两个来源不同的原生质体发生了融
8、合,下一步该做何处理?5如何将杂种细胞培育成杂种植株?请思考:利用电激法将野生马铃薯与栽培马铃薯进行细胞融合杂种植株融合的原生质体AB再生出细胞壁脱分化愈伤组织再分化1、过程植物细胞的融合植物组织培养植物细胞A原生质体B原生质体A杂种细胞AB去 壁去 壁人工诱导方法?促进融合的方法?融合完成的标志植物细胞B二、植物体细胞杂交技术去壁去壁纤维素酶果胶酶原生质体植物细胞原生质体融合离心、振动、电刺激、聚乙二醇再生细胞壁杂种细胞去分化愈伤组织杂种植株激素筛选等量激素再分化植物体细胞杂交过程示意图涉及的方法(1)酶解法去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。植物细胞原生质体(2)人工诱导两种植物的原生质体
9、融合成杂种细胞。离心、振动、电刺激 聚乙二醇(PEG)处理(3)用植物组织培养法培养杂种细胞为杂种植株。纤维素酶、果胶酶物理法:化学法: 植物体细胞杂交是将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。2、概念将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。3、意义在克服不同种生物远缘杂交的障碍上,取得了巨大的突破,从而扩大了可用于杂交的亲本组合。4.未能解决的问题:未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良性状。1.为什么“番茄马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样,地上长番茄、地下结马铃薯? 主要原因是:
10、生物基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,马铃薯番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达受到相互干扰,不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达,所以杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯。2.自然界中有一种含有叶绿体的原生动物眼虫,说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活,请探讨:动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?如果理论上可行,请设计出具体实验方案。比较无性繁殖细胞全能性脱分化再分化保持优良性状繁殖速度快、大规模生产提高经济效益杂交技术应用了组织培养克服不同种生物远源杂交的障碍去除细胞壁融合形成杂种细胞组织培养膜流动性细胞全能性染色体
11、变异、基因重组1、不能人工诱导原生质体融合的方法是( )A、振动 B、电刺激C、PEG试剂 D、重压2、植物细胞融合完成的标志的是( )A、产生新的细胞壁 B、细胞膜发生融合C、细胞质发生融合 D、细胞核发生融合AD 生姜是药食两用的经济作物,具有栽培容易、产量高、价格高等特点,近年在各地发展很快。但是生姜在生产上长期采用无性繁殖,容易感染多种病毒病,使生姜品质变差,叶子皱缩,生长缓慢,一般减产30%50%。设计无毒生姜幼苗的培育方案。请你设计案例一如何培育出上结大豆、下结花生的新品种?请你们讨论后设计 案例二一、植物繁殖的新途径1.微型繁殖 (1)微型繁殖技术: (2)特点: 保持优良品种的遗传特性;高效快速地实现种苗的大量繁殖.快速繁殖优良品种的植物组织培养技术.2.作物脱毒 (1)材料: 无病毒的茎尖 (2)脱毒苗: 切取茎尖进行组织培养获得3.人工种子 (1)特点: (2)技术: (3)结构:后代无性状分离不受气候,季节和地域限制植物组织培养.人工种皮、 胚乳、胚状体或不定芽或顶芽或腋芽.二、作物新品种的培育1.单倍体育种 (1)方法: (2)优点:花药的离体培养秋水仙素诱导
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