植物组织培养 复习题

1、 12/12植物组织培养 复习题 名词解释： 植物组织培养：不仅包括在无菌条件下利用人工培养基对植物组织的培养，而且包括对原生质体悬浮细胞核植物器官的培养 工厂化育苗：以先进的育苗设施和设备装备种苗生产车间，将现代生物技术，环境调控技术，施肥灌溉技术，信息管理技术贯穿种苗生产过程，以现代化，企业化的模式组 织种苗生产和经营以实现种苗的规模化生产 愈伤组织：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞 脱分化：以分化的细胞在一定因素作用下重新恢复分裂机能并改变原来的发展方向而沿着一条新的途径发育的过程 再分化：脱分化的细胞团或组织经重新分化而产生出新的具有特点，结构和功能的组织或器官的一

2、种现象 外植体：由活植体上切取下来进行培养的那部分组织或器官 植物细胞全能性：任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息 继代培养：由最初的外植体上切下新增的组织，转入新的培养基上继续培养 灭菌：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施 消毒：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌，对被消毒的物体基本无害的措施 大量元素：植物所需浓度大于0.5mmol/L的元素称大量元素或主要元素 微量元素：植物所需浓度小于0.5mmol/L的元素称微量元素或次要元素 无性系：由一个个体通过无性繁殖产生的一个群体 快

3、速繁殖技术：利用组织培养技术，将优良植株的器官，组织成细胞进行离体培养，在短时间内获得大量遗传性较为一致的个体的方法或技术 植物种质保存：利用天然或人工创造的适宜环境，使个体中所含的遗传物质保持其遗传完整性，有高的活力，能通过繁殖将其遗传特性传递下去 穴盘育苗：以草炭，蛭石，珍珠岩等轻型材料为基质，以不同规格的穴盘为容器，采用机械自助精量播种生产线完成装填，压穴，播种，覆土，镇压和浇水等系列作业， 在催芽室和温室等设施内进行有效管理，一次培养成苗的现代化育苗技术 水培育苗：利用成型的膨化聚苯乙烯格盘成泡沫为载体，在营养液内培育秧苗 扦插育苗：取植物体的部分营养器官插入基质中，在适宜的环境条件下

4、促使其生根，培养成幼苗的育苗方式 解答题： 1.植物组织培养包括哪些类型？ 包括愈伤组织培养、悬浮细胞培养、器官培养（胚，花药，子房，根和茎的培养等）、茎尖分生组织培养和原生质体培养。 2.工厂化育苗的特点有哪些？ 优点：节省能源和资源；提高种苗生产效率；提高种苗素质；种苗适于长距离运输；适合机械化移栽 缺点：初期投入较大（需育苗温室，相关设施等）对种子质量要求高；生产者需要掌握相关育苗技术 3.植物组织培养技术的发展过程大致可分为几个阶段？列举每个阶段有代表性的人物和相应研究内容。 探索阶段（20世纪初至20世纪30年代中） 代表人物：Haberlandt (德) 研究内容：植物细胞全能性的

5、设想，高等植物的器官和组织可以不断分割，直至成单个细胞，在适宜条件下具有再生完整植株的潜力 奠基阶段（20世纪30年代中至60年代末） 代表人物White和Gautheret 、Nobecourt 研究内容：认识了B族维生素对植物生长的意义；发现了生长素是一种天然的生长调节物质 迅速发展阶段（20世纪70年代至今） 代表人物：Cocking 、Takebe 、Cadson 、Guha和Maaheshwarz 、Morel 研究内容：原生质体培养、细胞融合、花药培养、离体快繁和脱毒技术、与分子生物学联姻 4.说明植物组培中器官分化的激素控制理论 由根和茎的分化可知：由生长素和细胞分裂素之间的比例

6、关系决定，当生长素相对浓度较高时，有利于细胞增殖和根的分化，当细胞分裂素的相对浓度相对较高，则促进茎芽的分化。若细胞分裂素的相对浓度较高，则促进茎芽的分化。 由此可得：通过改变培养基中生长素和细胞分裂素这两类生长调节物质的相对浓度，可以控制细胞的分化。 1.培养基污染有哪些污染来源？ 培养容器、培养基本身、外植体、接种室的环境、在接种和继代培养是用以操作的器械，培养室的环境等。 2.组培中常用的灭菌方法有哪些，请分别说明其原理。 灭菌方法：干热灭菌湿热灭菌过滤灭菌熏蒸灭菌灼烧灭菌辐射灭菌 原理利用烘箱加热到160180的温度来杀死微生物 在密闭的蒸锅中，其中的蒸气不能外溢，压力不断上升，使水的

7、沸点不断提高，从而 锅内的温度也随之增加，在0.1MPa的压力下，锅内温度达121，在此蒸气温度下可很快杀死各种细菌 0.45m一下，当溶液通过滤膜后，细菌的细膜和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被 阻 用加热焚烧、氧化等方法，使化学药剂变为气体状态扩散到空气中，以杀死空气和物 体表面的微生物 利用在火焰上灼烧时的高温来灭菌 利用电磁辐射产生的电磁波杀死大多数物质上的微生物 3.常用的植物材料消毒剂有哪些？ 次氯酸钙、次氯酸钠、过氧化氢、溴水、硝酸银、氯化汞、抗生素 4.无菌操作室有何要求，主要任务是什么？ 要求：无菌室应完全封闭，人员出入应有两道门，其间应隔有缓冲间 用前应以紫外线消毒30min

8、，定期用乳酸或甲醛熏蒸，彻底消毒 在无菌室中一般仅限于分装无菌的培养基及传染性强的细菌接种，不进行有菌标本 的分离及其他的操作 无菌室内应仅限操作人员进入，而且进入无菌室应着隔离衣和专用鞋，操作时戴口 罩，随时保证室内的无菌状态 应配备空调设备，保证不因室温而影响工作 主要任务：防止实验操作中人为污染样品 保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染 5.接种的一般步骤。 超净工作台用酒精擦拭，各种操作对象顺序摆放 房间喷雾降尘 紫外光照射30min灭菌，灭菌结束后在进入前至少需换气20min 对植物材料进行清洗处理，表面消毒 操作人员洗手，换鞋，将浸在消毒液例的植物材料带进接种

9、室 开启超净工作台，进行无菌操作 消毒结束后，用无菌水清洗植物材料，将材料取出，放在无菌的托盘中 对外植体进行切割整理 打开培养容器，将外植体接种到培养基上，将瓶口在火焰上灼烧后迅速封严瓶口 1.基本培养基主要有哪几种，植物组织培养基包括哪些成分？ MS培养基B5培养基N6培养基 主要成分：无机营养成分、有机营养成分（含氮物质，碳源）、植物生长物质（生长素，细胞分裂素，赤霉素）、琼脂及其他固化剂、其他成分（活性炭AC，硝酸银，抗 生素） 2.在植物组织培养中经常添加的生长素和细胞分裂素有哪些种类，添加生长素和细胞分裂素的目的分别是什么？ 常用的生长素种类：IAA（吲哚乙酸）IBA（吲哚-3-丁

10、酸） NAA（萘乙酸）2,4-D（二氯苯氧乙酸） 2,4,5-TC 目的：诱导离体细胞分裂成愈伤组织和根的分化 常用的细胞分裂素种类：BAP（苄氨基嘌呤）6-BAC（苄基腺嘌呤） 2-ip（异戊烯氨基嘌呤）玉米素和激动素（呋喃氨基嘌呤） 目的：促进细胞分裂，由愈伤组织或器官上分化不定芽 3.大多数植物对培养基的pH值有何要求，如何进行调节？ 培养的植物材料大多要求弱酸性的环境常用pH ：5.75.8 调节：用1mol/L NaOH 和1mol/L HCl 调节其pH 4.用MS培养基的浓缩贮备液来配制1L固体培养基，其操作步骤是怎样的？ 称出7g琼脂和20g蔗糖，加水直到750ml，在恒温水浴

11、中加热使之溶解 分别加入50ml大量元素，5ml微量元素，5ml有机成分，5ml铁盐，1ml2,4-D 加蒸馏水至1000ml 充分混合后，用1mol/L NaOH 和1mol/L HCl 调节其pH 把培养基分装到所选用的培养容器中 尽快用封口材料封严瓶口，以免其水分蒸发 把已装入了培养基的培养容器在121（1.1kg/cm2）下灭菌1520min 使培养基在室温下冷却，预培23天后无污染才能使用 1.愈伤组织的形成过程可分为哪几个时期？各有何特点？ 诱导期：外植体大小没有明显变化 特点：1细胞形态大小不变 2细胞内出现活跃的原生质流动，贮藏物质如淀粉等消失 3随着组织的活化，细胞内核糖体增

12、加并形成大量的多聚核糖体 4RNA迅速增加 5细胞核体积明显增大 诱导期：外植体的外层细胞开始迅速分裂，但中间部分的细胞不分裂 特点：1细胞数增加 2体积变小 3核和核仁变大 4RNA含量持续上升 形成期：形成愈伤组织 特点：1细胞形态大小保持相对稳定，体积不再减小 2细胞分裂由平周分裂转为组织内部局部区域的分裂，形成分生组织节 2.优良的愈伤组织评价指标有哪些？ 高度的胚性或再分化能力，以便从这些愈伤组织得到再生植株 分散性好，以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮条 旺盛的自我增值能力 经过长期继代保存而不丧失胚性 3.愈伤组织可分为哪些类型？ 类型（保守分裂型）：结构致密，生长较慢，容易分化成

13、苗 类型（亢进分裂型）：结构松脆，生长旺盛，色泽鲜艳，增殖很快 类型（衰败型）：结构疏松，生长缓慢，色泽暗淡 4.愈伤组织通过器官发生途径再生植株的方式有哪些？ 通过茎芽的分化（器官分化） 先分化芽，再分化根 先分化根，再分化芽 5.影响茎芽分化的因素有哪些？ 外源激素：器官形成是由参与生长和发育的物质之间在数量上的相 互作用决定的，而不是由这些物质的绝对浓度决定的 （1）培养基成分 培养基硬度：培养基中琼脂浓度的变化，对培养物形态发生的方式 存在影响 光照：包括光强，光质和光周期 （2）环境条件温度：25左右的培养温度适于器官发生，但接近于植物原产地的 生长温度对培养物更有利 湿度：适宜湿度

14、为70%80% 基因型差异：苹果花的花药培养中，以元帅品种诱导频率较高（3）植物材料材料的生理状况：苹果茎尖培养中，幼苗比成年树反应好 不同器官：枸杞外植体培养中，芽原基的分化较难而根分化比较容 易 6.为什么培养物在长期培养保存中，会出现形态发生能力下降或丧失的现象？ 新分离形成的组织往往具有较强的再生能力，易于形成各种器官或胚状体，但在继代过程中，器官形成的能力逐渐下降至消失。 （1）遗传说：在长期离体培养中，细胞的染色体组发生变化，包括多倍性，非整倍性和染色体突变等，这种由遗传因素造成的形态发生潜力的丧失是不可逆的。 （2）生理说：由于细胞或组织内激素平衡关系的改变造成的，或是由于细胞对

15、外源生长物质敏感性的改变造成的；“驯化”延长培养期，可能使愈伤组织对生长素的需求发生变化，导致生长素的自给现象。 （3）竞争说：在复杂的多细胞培养物中，只有少数细胞能够产生胚性细胞团，其余细胞是非胚性的。如果非胚性的细胞类型在所用的培养基中具有生长上的选择优势，在反复的继代培养中，非胚性细胞的群体将会逐步增加，而胚性成分则逐渐减少，到一定时期之后，培养物中不在具有成胚潜力。 1.什么是体细胞胚，有何特点？ 体细胞胚：又称胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。 特点：有固定的极性、与合子胚相似，多数体细胞胚不具有一个明显的胚柄 2.体细胞胚的发生途径。 直接途径：从培养中

16、的器官，组织，细胞或原生质体由预先决定的胚性细胞直接分化成胚， 不经过愈伤组织阶段 间接途径：外植体先愈伤化，后由愈伤组织内分生性细胞分化成胚 3.控制体细胞同步化发育的措施有哪些？ 抑制剂法：细胞培养初期加入DNA合成抑制剂，使细胞DNA合成暂时停止，一旦除去DNA抑制剂，细胞开始进入同步分裂 分离过筛法：用不同孔径的尼龙网过滤，来选择处于某一阶段的体细胞胚，或采用密度梯度离心法来选择不同发育阶段的胚，后转入适宜其发育的培养基上继续发育 低温法：培养早期采用适当低温处理一段时间后，再把温度提高到正常培养温度，可以达到同步分裂的目的 渗透压法：利用不同发育阶段的胚状体对不同渗透压的要求，可用含

17、高浓度蔗糖的培养基来控制胚的发育，使胚停留在某一阶段，后降低蔗糖浓度使胚状体进入同步发育 通气调控法：在烟草的组织培养中，乙烯的产生与细胞生长有密切关系，在细胞生长达到高峰前有一个乙烯合成的高峰 4.什么是人工种子，由哪些结构构成？ 人工种子：含有植物胚状体或芽，营养成分，激素以及其他成分的人工胶囊 结构：体细胞胚（胚状体）人工胚乳人工种皮 1.幼胚培养对培养条件有哪些要求？ 基本培养基、碳水化合物和培养基的渗透压、氨基酸和维生素、天然的植物浸提液、生长调节物质、光照和温度 2.幼胚培养时胚的发育方式有哪几种，各有何特点？ 胚性发育：幼胚接种到培养基上以后，仍按照在活体内的发育方式发育，最后形

18、成成熟胚；一般一个幼胚将来就是一个植株 早熟萌发：幼胚接种后，离体胚不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，通常称为早熟萌发；多数情况下，一个幼胚萌发成一个植株，但有时会产生丛生配现象 产生愈伤组织：幼胚在离体培养中细胞增殖，形成愈伤组织；一般而言，由胚形成的愈伤组织对位胚性愈伤组织，极易分化形成植株 3.胚胎培养有哪些应用？ 克服远缘杂交的不育性，获得稀有杂种植物 打破种子休眠，提早结实，缩短育种年限 使生活力低下或无生活力的种子萌发 测定种子生活力 获单倍体植株 快速繁殖特殊植物 4.什么是早熟萌发？ 幼胚接种后，离体胚不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，称之为早熟萌发。

19、5.胚乳培养有什么应用价值？ 用于研究某些物质的生物合成，如淀粉，蛋白质等 用于培养无籽果实，如苹果，西瓜等 获得植物的营养体，如三倍体颤杨的木材，三倍体的桑树 通过三倍体获得三体，用于基因定位研究 1.通过热处理消毒的基本原理是什么，该法消除植物病毒有何局限性？ 基本原理：在高于正常的温度下，植物组织中很多病毒可被部分地或完全地钝化，但很少伤害甚至不伤害寄主组织 局限性：不能去除所有病毒，只对圆形病毒（苹果花叶病毒），或对线状病毒（马铃薯卷叶病毒）有效；而对杆状病毒（干日红病毒）无效 2.简述茎尖培养消除病毒的基本原理，并说明基本操作程序 基本原理：病毒在植物体内的分布是不均匀的；在受侵染的

20、植株中，成熟的组织和器官病毒含量较高，而幼嫩的和未成熟的组织和器官病毒含量较低，生长点则几乎不含或含量很少 操作程序：取材消毒处理剥离和接种培养生根诱导 3.详述脱毒效果的检验方法有哪些？ 直接检测法：根据植株茎叶是否表现某种病毒特有可见症状来确定脱毒效果，如带毒植株长势弱，叶片表现褪绿条斑，花叶扭曲，植株矮化等病毒症状 指示植物检测法：灵敏可靠，便于在苗圃推广 汁液感染法：由受检植株上取下叶片，在缓冲液中研碎。在指示植物的叶片上撒少许金刚砂，后用受检植物的叶汁涂于其上并适当用力摩擦，停留约5min，然后用清水冲洗叶面，将指示植物放在防蚜温室中培养 血清学检测法：抗原和抗体间能发生高度专一性的

21、免疫反应，可用已知病毒的抗血清来鉴定未知病毒的种类 嫁接检测法：一些通过蚜虫传播的植物病毒，应采用嫁接接种方法鉴定，已被鉴定植株为接穗嫁接到指示植物上，根据指示植物的症状表现，判断是否脱除了病毒 电镜观察法：可以直接观察有无病毒颗粒的存在和鉴定病毒的种类 1.快繁的过程可分为哪几个阶段？ 阶段零：选择供体植株，并为其创造有利于离体培养的环境条件 一：无菌培养物的建立 二：茎芽的增殖 三：离体形成的枝条的生根 四：植株的移栽 2.快繁中惊讶增殖的途径有哪几种，各有什么优点？ 原球茎发育：兰科植物特有的增殖方式 通过愈伤组织（增殖最快的一种途径）：利用植物细胞在培养中无限增殖的可能性以及它们的全能

22、性，可对若干种植物进行快速繁殖 不定芽形成特点：可显著提高不定芽的频率；诱导极小的外植体产生不定芽；对于在正常的情况下不能进行营养繁殖的植物，透过激素诱导产生不定芽 腋芽增殖：在腋芽上施用的细胞分裂素可克服顶端优势，并在顶芽存在的情况下刺激侧芽生长，其最大的优点是使无性系后代保持原品种特性，可以长时间大量提供遗传上同质的试管苗 3.为什么要进行试管苗的炼苗，如何进行？ 炼苗的原因：试管苗生长在恒温，高湿，弱光，无菌和有完全营养供应的特殊条件下，虽有叶绿素但营异养生活，因此在形态解剖和生理特性上都有很大的脆弱性，这样的试管苗若未经充分锻炼，一旦被移出试管，投入到一个变温，低湿，强光，有菌和缺少完

23、全营养供应的条件下，则很快失水萎蔫，最后死亡。 炼苗的方法：将生根试管苗的培养容器带封口材料一起转移到温室，首先使温度条件一致，初期适度遮光，以后逐渐撤除保护，使光照条件接近生长环境，然后松开并去除封口材料，使组织苗生长的空气环境与栽培环境相通。 4.怎样进行试管苗的移栽？ 轻轻的但彻底的洗掉根上的培养基，选用排水性和透气性良好的移栽介质并消毒 栽培深度适宜，不要埋没叶片，移栽后要浇一次透水，但不能造成基质积水 移栽初期要保持较高的空气湿度，同时注意通风，光照强度一般只有露地的十分之一 移栽苗成活的必要条件：空气湿度高，土壤通气好，太阳勿直照 5.造成污染的原因有哪些，防止污染的措施有哪些？

24、原因：培养基及各种使用器具灭菌不彻底，外植体灭菌时不彻底，操作时人为因素带入，环境不清洁，超净工作区域污染 措施：培养基灭菌（121126灭菌2030min） 接种用的器具（高温灭菌外还需要蘸酒精，在火焰上灭菌） 外植体（及时进行外植体检查和淘汰） 环境条件（定期熏蒸，紫外灯照射，高压蒸汽灭菌锅灭菌） 超净工作台（定期清洗过滤器，测定操作区风速） 6.什么是褐变，如何防止褐变？ 外植体在诱导脱分化或再分化过程中，自身组织从表面向培养基释放褐色物质，以致培养基逐渐变为褐色，外植体也随之变褐而死亡的现象 控制措施：外植体和材料进行2040天的遮光处理或暗培养，可以减轻一些种类的褐化程度 在接种之前

25、用无菌水反复清洗外植体并对外植体进行冷藏处理，洗净切口处渗 出的酚类物质，可以起到减轻褐化的作用 用氧化剂溶液对外植体进行预处理，或在抗氧化剂溶液中切割剥离外植体，可 防止褐变的发生 7.玻璃化苗与正常苗的区别。 玻璃化苗细胞含水量高，叶绿素蛋白质、纤维素和木质素等含量低 CoA连接酶及与木质化进程有关的苯丙氨酸解酶的活性比正常苗低得多；玻璃化组织的乙烯产量高于正常组织 8.如何预防玻璃化苗的产生？ 培养基硬度：培养基太硬会影响养分的吸收，使苗的生长速度减慢，进行摇床培养时，需通过摇床来振荡通气，否则材料很快会玻璃化或窒息死亡 温度：主要影响苗的生长速度，温度升高，苗的生长速度明显加快，高温达

26、一定限度后，会对正常的生长和代谢产生不良影响，促进玻璃化生产 湿度：包括瓶内的空气湿度和培养基的含水量，瓶内湿度与通气条件密切相关，使用有透气孔的膜或通气较好的滤纸，牛皮纸封口时，玻璃化发生率减少 激素浓度：包括生长素和细胞分裂素的影响，高浓度的细胞分裂素促进芽的分化，亦会使玻璃化的发生比例提高，两者比例失调，细胞分裂素的含量显著高于两者之间的适宜比例，使组培苗正常生长所需的激素水平失衡，导致玻璃化的产生 光照时间：增加光照强度可以促进光合作用，提高碳水化合物的含量，使玻璃化的发生比例降低，高温及光照不足，极易引起过度生长，加速玻璃化的发生 培养基成分：培养基中的各种矿质营养，对促进培养物的生

27、长和发育有积极作用，但是各营养物之间存在平衡，一般认为提高培养基的碳氮比，可减少玻璃化的比例 1.对植物种质进行超低温保存的主要步骤 冷冻保存解冻重新培养 2.超低温保存时，对种质冷冻有哪些方法？各有何特点 慢冷法：先把材料以0.54/min的冷却速度由0冷却到-100，后转入液氮，适用于含有大液泡的成熟细胞，对于悬浮培养的细胞特别有效。使细胞内的水分减少到最低降度；又能防止因溶质含量增加引起的“溶液效应” 快冷法：将植物材料从0或其他预处理温度直接投入液氮罐内，降温速度为3001000/min，适用于细胞体积小，胞质浓，含水量低，液泡化程度低的材料。使胞内水分迅速通过冰晶生成的危险温度区（-

28、140-10） 分步冷冻法：先把材料较慢冷却（15/min）到一个适宜的中间温度（-30-50），在这个温度下停留约3050min，使材料充分脱水，后投入到液氮中快速冷却，停留是诱导细胞外溶液结冰，使细胞内外产生蒸气压差，进行保护性脱水，经证明该法对于茎尖和芽的冷冻保存最为有效 干炼法：将培养材料的含水量降到一定温度，再浸入液氮罐中，可使植物免遭冻死。该方法程序简单，主要应用于植物的合子胚或胚轴的冻存 玻璃化法：指液体转变为非晶体的固化过程，采用高浓度保护剂与快速降温相结合的完全玻璃化冻存方法，显示了比其他方法程序简化，冻存效果好的优点，玻璃化法不需要昂贵的程序降温仪，适用于茎尖，合子胚等器官

29、 包埋脱水冷冻法：先将植物材料包埋在藻酸钙的颗粒中，再将这些颗粒置于高浓度蔗糖溶液种培养一段时间。再无菌风干，最后直接在液氮中冷冻保存；包埋后植物材料所处环境比较稳定，对脱水和降温过程的要求很严格，适用于对冷冻防护剂敏感的植物材料 3.低温保存与超低温保存的区别？ 低温保存：将种质保存在非冻结温度下（19），通过降低温度来减缓植物组织，细胞的生长，以达到延长保存时间的目的 超低温保存：把植物材料在液氮温度（约-196）下进行冷冻和保存，致使细胞的物质代谢和生长活动停滞在完全不活动的状态，在适宜的条件下可迅速繁殖，再生出新的植株，并保持其原来的遗传特性 1.简述植物组培工厂化生产技术 （1）品种

30、选育和母株培养：根据需要选择有市场发展潜力或生产需要的品种，建立材料和原料培养育圃 （2）离体快繁组培苗：在组培快繁车间完成，经无菌苗建立，增殖培养，生根等工序（3）组培苗的移栽驯化： 准备工作：a 选择育苗容器，一般选用穴盘，经济实惠 b基质选配，组培苗移栽一般用无土栽培方式，对基质的要求较高，基 质的作用是固定化幼苗，吸附营养液，改善根基透气性，基质需要具 有良好的物理特性，吸水力强，透气性好，不易分解，具有良好的化 学特性，不含对植物和人体有毒的成分，不与营养液中的成分发生化 学反应，有良好的缓冲能力，物美价廉，便于就地取材 c场地工具及基质灭菌，装盘：移栽场地及所有工具必须用灭菌药水清

31、 洗（800倍高锰酸钾液泡1015min） d营养液配制：按配方根据实际需要量计算具体用量，称取配制，配置 过程中要防止沉淀发生，配制好后测定pH值，并矫正。pH以5.56.5 最适 组培苗移栽：移栽前需先进行炼苗，一般从培养室转移到温室并先放置2周左右， 再打开瓶盖适应，炼好苗后起苗。并将基部培养基全部洗净，分为有 根苗和无根苗两部分 组培苗扦插：为加快繁殖速度，可将试管苗切断扦插 驯化管理：移栽后12周为关键管理阶段，主要是光照，水分，通风，透气等 驯化：不同基质对组培苗移栽成活率有显著影响，苗的生根状况、温度、湿度影响 试管苗移栽成活率 绿化炼苗：组培苗移栽成活46周后，可逐渐移到遮阳大

32、棚下进行绿化炼苗，结合 浇水灌营养液；逐渐延长光照时间，增加光照强度，控制病虫害 成苗管理：及时供水，保持育苗基质湿润，苗床温度适宜于植物的生长，利用保温， 通风措施加以调节，可一定时间根外追肥 苗木传送和运输：异地育苗须考虑经济是否合算，苗木须有较高的技术含量，品种 优良，具有稳定而畅通的销售渠道 苗木质量检测：苗木质量是保证苗木质量和保护种植者利益的重要环节，亦是确定 苗木价格按质论价的重要依据，商品性状，健康状况，遗传稳定， 是否具备品种的典型性状；是否整齐一致，采用RAPD或ACFP 法对快繁材料进行“指纹”鉴定，以确定遗传稳定性 2.组培育苗工厂的机构应如何设置？ 生产部：负责人，勤

33、杂，清洁工，培养基制作工，接种工，培养间管理工，炼苗管理工， 大田苗圃管理工 质量检验部：主持制定各种苗木出厂的质量标准，监督检查，签发质量合格证或苗木质量 等级证，保存检验档案并注意技术保密 技术开发部：负责生产技术改进，新品种及技术改进消化和研制开发新产品 市场营销部：做好广告策划，运用各种方式完成销售指标，及时反馈市场信息并作出市 场预测；做好产品的售后服务，实现长久市场占有 3.组培苗的生产成本和经济效益应怎么估算？ （1）成本核算：每株苗的效益量=（总收入-所有消耗）/产量 培养基成本，接种与培养成本，移栽成本，电耗成本，基建投资 （2）效益分析：成本核算：有效地降低人工费，药品费 产销对路：以销定产，出产新、特、名品种，批量生产 规模生产：提高利润 4.可通过哪些措施降低成本和提高经济效益？ 掌握熟练的技术技能，特定有效的工艺流程，提高生产效率，要求操作工接种熟练，按照工艺流程操作，每天转接苗10001200株 减少设备投资，延长使用寿命，除应购置一些基本设备外，能代用的就代用；对现有设备经常检修，及时保