罗氏试剂盒说明书 IL-605367867001V1

1、05367867001V1白介素6（Interleukin-6，IL-6） 2008-04, V 6 中文 5/5 Elecsys 和 cobas e 分析仪05109442 190 100测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用于体外定量检测人体血清或血浆中的白介素-6（IL-6）。Elecsys IL-6检测可辅助临床急诊病人急性炎症的早期诊断。Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。临床应用IL-6是一种功能广泛的多效性细胞因子。最初被

2、称为2-干扰素，浆细胞瘤生长因子和干细胞刺激因子。后来被称为人B细胞刺激因子2（BSF2）。1988年被正式命名为白介素6，并通过大量的研究发现这种蛋白不仅对B细胞有生理活性作用，对T细胞、造血干细胞、肝细胞和脑细胞均有生理活性作用。1IL-6为单基因表达，包含212个氨基酸序列，且氨基末端易裂解形成184个氨基酸系列的多肽，分子量约为22-27kDa。21989年有研究报道发现急性细菌性感染的患者体液内发现分子量约为60-70 kDa的免疫反应复合物。3在发生内外伤、外科手术，应激反应，感染，脑死亡，肿瘤产生以及其它情况的急性炎症反应过程中IL-6会快速生成。2手术病人的IL-6浓度能过预示

3、是否会有手术并发症的产生。4，5连续检测重症监护（ICU）病人血清或血浆中IL-6的水平能有效的评估系统性炎症反应综合症（SIRS）的严重程度，脓毒血症以及脓毒血症性休克的预后情况。6，7，8 IL-6还能作为脓毒血症的早期警告指标。9，10，11，12 IL-6并且在慢性炎症反应（如类风湿关节炎）中扮演着重要角色。13，14检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟第一次孵育：30l标本、生物素化的IL-6单克隆特异性抗体一起孵育，形成抗原抗体复合物。第二次孵育：添加钌（Ru）a标记的IL-6特异性单克隆抗体和包被链霉亲和素的磁珠微粒进行孵育，抗原抗体夹心复合物与磁珠通过生物素和链霉素的作用

4、结合。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌试剂工作溶液M包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。R1 生物素化的抗IL-6抗体（灰盖），每瓶，9ml；生物素化的抗IL-6单克隆抗体（小鼠）浓度0.9ug/mL，磷酸缓冲液95mmol/L，

5、pH7.3。防腐剂。R2 Ru(bpy)32+标记的抗IL-6抗体（黑盖），每瓶，9ml，钌标记的抗IL-6单克隆抗体（小鼠）浓度0.9ug/mL，磷酸缓冲液95mmol/l，Ph7.3。防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒（M,R1和R2）为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys IL-6试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。

6、稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周放置分析仪上4周样本的采集和准备仅以下罗列的样本类型通过检测并符合要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、K3-EDTA抗凝的血浆适用。标准：斜率0.9-1.1，截距0.95。稳定性： 20-25可保存5小时，2-8可保存1天；-20可保存3个月。一次冻融。选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀的样本检测前必须先作离心处理。避免使用热灭活的样本。添

7、加叠氮化合物的样本和质控品均不能使用。检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡(20-25)。由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号05109469190, IL-6 CalSet , 规格4 x2 ml货号05109477190, PreciControl IL-6 ，规格4 x2 ml，分别为PreciControl IL-6 1和2或者货号03609987190，Diluent MultiAssay，2*16 ml 样本稀释液实验室基础设备Elecsys 2010 、MODULAR ANALYT

8、ICS E170或cobas e分析仪Elecsys 2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲液货号11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL,测量池洗液 货号11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液货号11933159001, SysClean 适配器 货号11706802001, Elecsys 2010分析杯, 60 x 60 反应管货号11706799001, Elecsys 2010 分析吸头, 30 x 120移液管吸头

9、MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪所需材料：货号04880340190,ProCell M, 2 x 2 L 系统缓冲液货号04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L测量池洗液 货号03023141001, PC/CC杯, 12个用于在检测前预热Procell M及Cleancell M。货号03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。货号12102137001,反应杯/吸头 组合装84反应杯/吸头 组合装48盒,废物袋 货号03023150001, Wa

10、steLiner,废物袋 货号03027651001,系统清洁适配器 M所有分析仪需要：货号11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生

11、。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。定标溯源性：该检测方法可溯源至NIBSC 1st IS参考标准 89/548。每套Elecsys IL-6试剂的条码标签上均含有其批特异的定标信息。使用Elecsys IL-6定标液可调整预设置的定标曲线。定校频率：新批号试剂必须进行定标（新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析仪:使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）根据需要：如失控。质控可使用Elecsys PreciControl IL-

12、6进行质量控制。其他合适的质控品也适用。各浓度质控至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。请遵循政府法规和当地行业导则进行质量控制计算仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度，单位是pg/mL干扰因素检测结果不受黄疸（胆红素428mol/L或25 mg/dL）, 溶血（血红蛋白0.621mmol/L或 1.0g/dL）, 脂血(脂肪乳剂 1500mg/dL)和生物素30ng/mL或 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。检测结果不受类风湿因

13、子影响（RF1500 IU/ml）。IL-6检测不受hook效应影响（IL-6浓度 120000 pg/mL）体外对18种常用药物和13种特殊药物进行试验未发现会影响检测结果。少数病例中高浓度的人抗鼠抗体、生物素或钌抗体会影响检测结果。通过适宜性的实验设计可将影响因素降到最低。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围1.5-5000 pg/mL（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告5000 pg/mL。(1:10稀释结果可报告至50000 pg/mL)稀释高于检测范围的标本可用稀释液（Elecsys Diluent MitiA

14、ssay）稀释。建议1:10稀释（MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析仪可以自动稀释，也可以手工稀释）。稀释的标本IL-6浓度必须高于50 pg/mL。如用手工稀释，结果应乘稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。期望值Elecsys IL-6检测817位表面健康人群的95位点的参考值为7pg/mL。每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。临床性能检测281名ICU已知或未知感染患者的血清IL-6水平。病人依据ACCP/SCCM规则进行分类：系统性炎症反应综合症（SIRS）、重症脓毒血症和脓毒

15、血症性休克。15SIRS的病人（n=94）, 重症脓毒血症的病人（n=65）和脓毒血症性休克的病人（n=62）各组的IL-6浓度的分布情况如下表：特殊的性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。精密度应用Elecsys试剂盒、样本和质控品验证重复性，按照CLSI的EP5-A2执行：每天2次，共21天 (n=84)。下面是获得的结果。灵敏度（最低检出限）约为1.5 pg/mL最低检出限指区别于零浓度的分析物最低检测浓度。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1+2SD，批内精密度，n=21）。方法学比较使用临床标本比较Ele

16、csys IL-6 检测（y） 和性能可靠的商业化IL-6检测（x），相关性数据如下：标本数n=113Passing/Bablok18 线性回归y = 1.14x +3.0 y = 1.06x +7.36T = 0.908 r = 0.980样品比较的浓度范围约为31000pg/mL 特异性下列物质不会对Elecsys IL-6检测（浓度范围10200 pg/mL）造成明显的交叉反应：参考文献1. Kishimoto T, Hirano T. A New Interleukin with Pleiotropic Activities. BioEssays 1988 Jul;9(1):11-15

17、.2. Song M, Kellum JA. Interleukin-6.Crit Care Med 2005;33(Suppl12):463-465.3. Helfgott DC, Tatter SB, Santhanam U, Clarick RH, Bhardwaj N, May LT, Sehgal PB. Multiple Forms of IFN-2/IL-6 in Serum and Body Fluids During Acute Bacterial Infection. J Immunol 1989;142:948-953.4. Giannoudis PV, Harwood

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