基因工程-第一章 绪论课件

1、基因工程原理与操作主讲教师：李洪涛资源与环境学院 应用生物科学专业学习内容第一章 绪论第二章 基因工程工具酶第三章 基因工程载体第四章 核酸操作的基本技术第五章 聚合酶链式反应第六章 基因文库的构建与目的基因获得学习内容第七章 DNA体外重组与基因转移第八章 重组子的筛选与鉴定第九章 外源基因的表达第十章 生物信息学第十一章 基因工程规则、安全性及专利 基本要求了解基因工程的发展历史及意义。掌握基因克隆的工具及基本方法。了解怎样利用基因重组技术研究基因的结构、表达和调控。能够设计一个基因克隆的程序。利用基因工程生产重组蛋白。学习资料教材 基因工程原理与应用 陈宏 2003 中国农业出版社参考书

2、 基因工程原理 吴乃虎 1999 科学出版社 分子克隆实验指南 J. Sambtook EF Frish T Maniatis； 金冬雁 等译 科学出版社第一章 绪 论问题什么是基因工程？基因工程是如何发展形成的？基因工程的研究内容是什么？基因工程发展前景如何？第一节 基因工程的概念 基因工程（基因操作），分子生物学、分子遗传学等学科基础上，20世纪70年代诞生一门崭新的生物技术科学。基因工程 指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之参入到原先没有这类分子的寄主细胞内，而能持续稳定的繁殖。第二节 基因工程的诞生与发展 一、基因工程诞生的理论基础 基因工程 1

3、973 无数科学家 智慧与劳动基础理论上的三大发现技术上的三大发明（一）理论上的三大发现证实了DNA是遗传物质 基因学说的创立 基因与DNA物质现代遗传学之父，奥地利生物学家格雷戈尔孟德尔（Johann Gregor Mendel，18221884）并未描述过基因，也没有观测到基因以及使用基因这个词。但这位奥地利传教士发现了遗传定律，他通过繁育豌豆，画出其结果图，就得出了卓越的结论。 果蝇是上帝专门为摩尔根创造的 美国遗传学家摩尔根（Thomas Hunt Morgan，18661945）对基因学说的建立作出了卓越的贡献。1915年至1928年，他和他的助手以果蝇作为实验材料，第一次将代表某一

4、特定性状的基因，同某一特定的染色体联系了起来，创立了遗传的染色体理论。 基因的化学本质就是DNA分子 加拿大生物化学家艾弗里（Oswald Theodore Avery，18771955 ）。1945年，他和他的合作者在纽约进行细菌转化的研究（下图），实验材料是肺炎链球菌，结果说明，使细菌性状发生转化的因子是DNA，而不是蛋白质或RNA。 这一重大的发现轰动了整个生物界，在遗传学理论上树起了全新的观点，即DNA分子是遗传信息的载体。（一）理论上的三大发现揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理 双螺旋结构 是双链、三链还是四链？三螺旋还是双螺旋？ 半保留复制 1953年，最伟大的模型D

5、NA双螺旋结构模型被提出来了，两位创立者是美国生物化学家沃森和英国生物物理学家克里克。这一模型的建立，揭开了生物遗传信息传递的秘密，从遗传物质结构变化的角度解释了遗传性状突变的原因，并标志着遗传学完成了由“经典”向“分子”时代的过渡。 双螺旋结构发现年来，生命的很多秘密已经被解开，但剩下的秘密更多。一切不过只是刚刚开始。“今天比我起步的时候有更多的新的疆域，”沃森在接受美国时代周刊采访时曾表示，“未来几百年中，还会有足够多的问题需要人们去应对。” 1957年，当时在Caltech作研究生的 Meselson和作博士后的Stahl设计并实现了这组著名的，证明了DNA复制半保留机理的实验。 （一）

6、理论上的三大发现遗传密码的破译和遗传信息传递方式的确定 遗传密码 -生命的语言 数学推理阶段和实验研究阶段 中心法则 -生命信息的传递 第一阶段和第二阶段 1954 年 俄裔美国物理学家伽莫夫提出蛋白质的遗传密码是由 3 个碱基的排列组合而成的假说。 1961年，美国生物学家尼伦伯格（Marshall Warren Nirenberg，1927）（左图）等人成功破译了遗传密码，以无可辩驳的科学依据证实了DNA双螺旋结构的正确性。 有关遗传密码的几个问题 “密码比” “密码是否重叠” “相邻的2个三联体之间是否存在（逗号）”遗传密码表霍拉纳(1922 ) （右图）美国生物化学19601966年，

7、破译了mRNA的全部基因密码，并在蛋白质合成机制、信使核糖核酸等方面取得了重要研究成果。（二）技术上的三大发明限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割内森斯使用II型限制性内切酶首次完成了对基因的体外切割。他们的研究成果为人类在分子水平上实现人工基因重组提供了有效的技术手段。 1965年阿尔伯首次从理论上提出了生物体内存在着一种具有切割基因功能的限制性内切酶，并于1968年成功分离出I型限制性内切酶。1970年史密斯分离出了II型限制性内切酶（二）技术上的三大发明DNA连接酶的发现与DNA片断的连接1967年在世界上有5个实验室几乎同时发现了DNA连接酶。1970年当时在Wisconsin大学的一

8、个实验小组，发现T4DNA连接酶具有更高的连接活性。到了1972年底，人们已经掌握了好几种连接双链DNA分子的方法。二、基因工程的诞生 20世纪70年代初期，理论和技术层面已具备开展DNA重组工作的条件。 1972年， Stanford的P. Berg博士领导的研究小组，率先完成了世界上第一次成功的DNA体外重组实验。 1973年，Stanford的Cohen等成功地利用体外重组实现了细菌间性状的转移。 1973年被定为基因工程诞生的元年。 第三节 基因工程研究的主要内容一、基因工程研究的主要内容 基础研究 克隆载体的研究 受体系统的研究 目的基因的研究 生物基因组学研究 应用研究 二、基因工

9、程的基本操作程序 从细胞中分离出DNA限制酶截取DNA片断分离大肠杆菌中的质粒 DNA重组用重组质粒转化大肠杆菌培养大肠杆菌克隆大量基因第四节 基因工程的意义与发展前景基因工程可以绕过远缘有性杂交的困难，使基因在微生物、植物、动物之间交流，迅速并定向的获得人类需要的新的生物类型 。概括地讲，其意义体现在以下三个方面：大规模的生产生物分子设计构建新物种搜寻、分离和鉴定生物体尤其是人体内的遗传信息。基因工程的意义主要基因工程产品的研制、开发、上市时间基因工程的发展前景 1976年，世界上第一个基因公司在美国成立，“Genetech”注册登记，意味着基因工程的实际应用已跨入商业运作的门槛。 生物工程从此进入产业化，生物技术产业是当今世界经济中最富有活力的先导性、战略性新兴产业 由于重组DNA技术的突破，生物技术的应用已遍及农业、食品、医药、卫生、化工、环保、资源、能源、海洋开发等各个领域，为解决人类的食物、健康、资源、能源、环境等重大