杭太俊药物分析10-巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静药物的分析课件

药物分析JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicines主讲:曾金祥药物分析JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicines第十章:巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析Contents基本结构与主要性质1鉴别试验2特殊杂质检查3含量测定4CompanyLogo一、基本结构与主要性质环状丙二酰脲类化合物(一)基本结构CompanyLogo一、基本结构与主要性质典型药物(Phenylbarbital)(barbital)CompanyLogo一、基本结构与主要性质(Secobarbital)戊巴比妥(Pentobarbital)CompanyLogo一、基本结构与主要性质CompanyLogo一、基本结构与主要性质一级电离二级电离烯醇互变CompanyLogo一、基本结构与主要性质巴比妥钠注射液不能预先配制进行加热灭菌，须制成粉针剂，临用时溶解。CompanyLogo白色难溶性二银盐AgNO3Na2CO3滴加AgNO3Ag与银盐的反应用这种形式表示也是一样的CompanyLogo一、基本结构与主要性质3.与金属离子反应b.与铜盐的反应巴比妥类药物在吡啶溶液中生成烯醇式异构体,可与吡啶试剂反应形成稳定的配位化合物,产生类似双缩脲的呈色反应CompanyLogo一、基本结构与主要性质3.与金属离子反应b.与铜盐的反应巴比妥类＋铜吡啶显色巴比妥类——紫色或紫色沉淀硫巴比妥类——绿色CompanyLogo水吡啶部分离子化＋有色配位化合物与铜盐的反应用这种形式表示也是一样的CompanyLogo一、基本结构与主要性质c.与钴盐的反应Co(NO3)2、CoO、Co(Ac)2异丙胺无水甲醇或乙醇CompanyLogo一、基本结构与主要性质4.香草醛反应(Vanillin)戊巴比妥鉴别：

取戊巴比妥10mg，加香草醛约10mg和硫酸2ml，混合后在水浴上加热2min，显棕红色。放冷，小心加入乙醇5ml，即显紫色并变成蓝色。CompanyLogo一、基本结构与主要性质5.紫外吸收光谱特征λ(nm)2902702502300.51.01.5A巴比妥类药物的紫外吸收光谱ABC240nm255nmA.H2SO4液(0.05mol/L,未电离)B.pH9.9缓冲液(一级电离)C.pH13NaOH液(1mol/L,二级电离)1,5,5-三取代巴比妥类药物不存在二级电离，最大吸收波长不变。CompanyLogo7.显微结晶一、基本结构与主要性质

药物本身晶形反应产物晶形CompanyLogo二、鉴别试验(一)丙二酰脲类的鉴别试验取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。取供试品约50mg，加吡啶溶液(1→10)5ml，溶解后，加铜吡啶试液1ml，即显紫色或生成紫色沉淀。银盐反应铜盐反应CompanyLogo二、鉴别试验1.司可巴比妥钠的鉴别I2褪色Br2KMnO4CompanyLogo二、鉴别试验2.苯巴比妥的鉴别a.硝化反应

b.硫酸-亚硝酸钠反应

苯巴比妥与NaNO2-H2SO4反应生成橙黄色→橙红色c.甲醛-硫酸反应

苯巴比妥与甲醛-H2SO4反应生成玫瑰红色环

区分苯巴比妥与不含芳环取代的巴比妥类药物。CompanyLogo二、鉴别试验3.硫代巴比妥类的鉴别——硫色素反应硫代巴比妥类与巴比妥类的区别以前CompanyLogo三、特殊杂质试验CompanyLogo三、特殊杂质试验1.酸度中间体Ⅱ乙酰化不完全时，Ⅱ与尿素缩合产生的杂质Ⅱ苯基丙二酰脲酸性较强检查方法取本品0.20g，加水10ml，煮沸搅拌1min，放冷，滤过后，取滤液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得显红色CompanyLogo2.乙醇溶液澄清度三、特殊杂质试验检查中间体Ⅱ、Ⅲ等乙醇中不溶物。

取本品1.0g，加乙醇5ml，加热回流3min，溶液应澄清

3.中性或碱性物质(提取重量法,溶解度差异)副产物：2-苯基丁酰(胺)脲或分解产物不溶于NaOHT.S.而溶于醚分液漏斗NaOHT.S.乙醚H2O过滤干燥滤纸蒸发皿105℃1hr<3mg取本品1.0g乙醚，H2O洗3次滤液蒸干残渣CompanyLogo银量法(一)银量法(Argentometry)巴比妥类药物在适当的碱性溶液中,易与重金属离子反应,并可定量地形成盐,因而可用银量法进行滴定.在滴定过程中,可以通过生成沉淀进产生的混浊指示滴定终点.但容易出现误差.改用甲醇及3%的无水碳酸钠溶剂系统,采用Ag-玻璃电极系统电位法指示终点,方法改善,为chp2010所用.CompanyLogo四、含量测定(一)银量法(Argentometry)0.2g甲醇

40ml异戊巴比妥测定3%无水碳酸钠电位滴定法(AgNO3)指示电极(Ag)参比电极(玻璃/甘汞)CompanyLogo四、含量测定(二)溴量法:溴过量,再用KI反应,再用硫代硫酸钠滴定.

司可巴比妥钠测定取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.05mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液（0.05mo1/L）相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。CompanyLogo四、含量测定(三)酸碱滴定法(Acid-basetitrationmethod)

水-乙醇混合溶剂中滴定胶束水溶液中滴定非水滴定法CompanyLogo四、含量测定异戊巴比妥水—醇溶解麝香草酚酞NaOH淡蓝色1.水-乙醇混合溶液CompanyLogo2.胶束水溶液四、含量测定正胶束反胶束H2O溴化十六烷基三甲基苄铵Cetyltrimethylbenzylammoniumbromide，CTMA氯化四癸基二甲基苄铵Tetradecyldimethylbenzylammoniumchloride，TDBA巴比妥类表面活性剂溶解麝香草酚酞指示剂NaOH滴定CompanyLogo四、含量测定3.非水滴定法溶剂：二甲基甲酰胺、甲醇、丙酮、三氯甲烷、无水乙醇、苯、吡啶、甲醇-苯、乙醇-三氯甲烷滴定剂：甲醇钠（钾）、氢氧化四丁基胺指示剂：麝香草酚蓝,也可以用电位法指示终点CompanyLogo四、含量测定(四)紫外分光光度法

直接测定的UV法提取分离后的UV法CompanyLogo四、含量测定注射用硫喷妥钠含量测定取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量(约相当于硫喷妥钠0.25g)，置500ml量瓶中，摇匀，量取此溶液用0.4%NaOH溶液定量稀释制成每1ml中约含5µg的溶液；另取硫喷妥对照品，精密称定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5µg的溶液。用1cm吸收池，于304nm波长处分别测定吸收度，以0.4%NaOH溶液作空白。根据每支的平均装量计算。每1mg的硫喷妥钠相当于1.091mg的C11H19N2NaO2SCompanyLogo四、含量测定USP24法测定苯巴比妥含量巴比妥类药物适量，加水使其溶解后，加酸酸化，用三氯甲烷提取巴比妥类药物，三氯甲烷提取液加入pH7.2～7.5的缓冲液，振摇，分离弃去水相缓冲液层，再用氢氧化钠自三氯甲烷中提取巴比妥类药物，调节碱提取液的pH值，然后选用相应的吸收波长进行测定。提取后的UV分光光度法,消除干扰CompanyLogo(五)HPLC法五、体内药物分析CompanyLogo第二节苯并二氮杂卓类药物的分析NNClH3CO1234567892’地西泮(diazepam)

七元亚胺内酰胺环奥普唑仑奥沙西泮(Oxazepam)氯氮卓(Chlordiazepoxide)NNNCH3OClHCompanyLogo理化性质通常为白色或微黄色结晶或结晶性粉末；具有一定的熔点。一般不溶或极微溶于水，溶于丙酮或三氯甲烷等有机溶剂。具有弱碱性；水解性；UV吸收特性。CompanyLogo第二节苯并二氮杂卓类药物一、鉴别试验

(一)化学鉴别试验

1.沉淀反应

氯氮卓橙红色沉淀

阿普唑仑

＋KBiI4

盐酸氟西泮也生成橙红色沉淀

氯硝西泮放置后，沉淀颜色变深，因此可以相互区别。阿普唑仑+遇硅钨酸白色沉淀，药典中也用于鉴别。CompanyLogo第二节苯并二氮杂卓类药物2.水解后呈芳伯胺反应

氯氮卓和奥沙西泮的盐酸溶液(1→2)，缓缓加热煮沸，放冷，加亚硝酸钠和碱性β-萘酚试液，生成橙红色沉淀，后者放置后颜色变暗。3.分解产物的反应

有机氯化合物，氧瓶燃烧法破坏，生成HCl，以5%氢氧化钠溶液吸收，硝酸酸化，显氯化物反应。

CompanyLogo第二节苯并二氮杂卓类药物4.硫酸－荧光反应：苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸/稀硫酸在紫外光(365nm)下显不同的颜色。药物硫酸稀硫酸地西泮黄绿色黄色氯氮卓黄色紫色艾司唑仑亮绿色天蓝色硝西泮淡蓝色蓝绿色CompanyLogo(二)UV第二节苯并二氮杂卓类药物药物溶剂C(μg/ml)λmax(nm)A地西泮0.5%硫酸甲醇溶液5242约0.51282约0.23366－氯氮卓盐酸(9→1000)7245、3080.65阿普唑仑盐酸(9→1000)12264－盐酸氟西泮硫酸甲醇(1→36)10239±2、284±2比值1.95~2.50362±2－氯硝西泮0.5%硫酸甲醇溶液10239±2，307±2－奥沙西泮乙醇10229，315±2(较弱)CompanyLogo第二节苯并二氮杂卓类药物(三)TLC硅胶G薄层板，苯－丙酮(3:2)为展开剂，稀硫酸喷雾，105℃干燥30min，紫外灯下检视荧光斑点药物Rf值斑点颜色*单一点样混合点样自然光254nm365nm地西泮0.800.78无色黄色(m)黄色(m)氯氮卓0.340.34无色蓝紫色(s)蓝紫色(w)艾司唑仑0.220.20无色灰紫色(m)蓝紫色(m)硝西泮0.720.72黄色紫色(w)紫色(w)奥沙西泮0.490.52黄色亮灰蓝色(s)亮灰蓝色(s)*s,m,w分别表示荧光的强、中、弱CompanyLogo二、有关物质检查第二节苯并二氮杂卓类药物

TLCHPLCGCCompanyLogo第六节含量测定

非水溶液滴定法

非水酸量法非水碱量法紫外分光光度法对照品法吸收系数法高效液相色谱法CompanyLogo第六节含量测定一、非水溶液滴定法当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸CompanyLogo第六节含量测定供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml结果