消化系统肿瘤标志物课件

消化系统肿瘤标志物

雷旦生2013年6月7日

消化系统常见肿瘤良性肿瘤仅占约2%，主要为恶性肿瘤；癌占绝大部分，肉瘤较为少见；癌在食管、胃、肝胆和大肠较为多见，小肠极少发生癌。消化系统常见肿瘤食管癌胃肿瘤肝胆肿瘤胰腺癌小肠肿瘤大肠肿瘤消化系统肿瘤相关标志物食道癌相关标记物：鳞状细胞癌相关抗原（SCC）、癌胚抗原（CEA）、组织多肽抗原（TPA）、谷胱甘肽转移酶（GSTS）、细胞角化素蛋白片段19(CYFRA21-1)、p53基因和p53蛋白、EGFR、c-myc、hst-1。目前，尚未发现具有一定准确性的食道癌相关标记物。食道癌消化系统肿瘤相关标志物胃癌相关肿瘤标志物：胚胎抗原（CEA）、CA19-9、CA50、CA72-4、透明质酸(HA)、唾液酸、胃蛋白酶原（PGI和PGII）、P53基因、P16基因、nm23基因、c-myc基因、表皮生长因子受体（EGFR）、HER-2neu、转化生长因子α（TGFα）、金属蛋白酶（MMPs）及其抑制剂（TIMP）胃癌的肿瘤标志物中缺乏敏感性高、特异性强的指标。胃癌消化系统肿瘤相关标志物胰腺癌相关的肿瘤标志物：癌胚抗原(CEA)、糖抗原(CA19-9、CA242、CA125、CA50)、胰腺肿瘤胎儿抗原(POA)、胰腺癌相关抗原(PCAA、Span-1)、胰腺特异抗原(PaA)及K-ras基因等，临床常用的指标为CA19-9、CA242、CEA及K-ras。各种标志物对胰腺癌虽有一定的阳性率，但均不具备高特异性。

胰腺癌消化系统肿瘤相关标志物大肠癌相关的肿瘤标志物：癌胚抗原(CEA)、糖抗原(CA19-9、CA242、CA72-4、CA50)、结肠癌特异性抗原(CCSA)、生存素(Survivin)、凝集素(Clusterin)、细胞型FLICE抑制蛋白(cFLIP)、唾液酸化的路易斯寡糖－X抗原(SLex)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)、大肠癌缺失基因(DCC)、P27基因等。目前临床常用的大肠癌相关肿瘤标志物均不具备高特异性。大肠癌常用消化系统肿瘤标志物CEA与甲胎蛋白一样，属于胚胎抗原，1965年由Gold和Freedmen首先从结肠腺癌和胚胎期结肠黏膜组织中分离而得，故称癌胚抗原。在临床中常作为空腔脏器如大肠癌及其他消化道肿瘤的辅助诊断指标，其增高见于肝、结-直肠、胃、胰、胆囊、胆管癌肿及非消化道(肺、卵巢)癌。在临床上，当CEA>60ug/L时，可见于结肠癌、胰腺癌、直肠癌、胃癌等。癌胚抗原(CEA)常用消化系统肿瘤标志物CA19-9是胰腺癌，胃癌，结、直肠癌、胆囊癌的相关标志物，大量研究证明CA19-9浓度与这些肿瘤大小有关。在胰腺癌患者中的阳性检出率较高，逐步在临床认为是对胰腺癌的敏感性和特异性优于除CA242以外的其他血清标志物的一个重要指标。胃癌、结直肠癌、胆囊癌、胆管癌、肝癌的CA19-9阳性率也会很高，故不能单独作为诊断胰腺癌的指标。若同时检测CEA或AFP等相关肿瘤标志物可进一步提高这些肿瘤的阳性检出率。胃肠道和肝的多种良性和炎症病变，如胰腺炎、轻微的胆汁郁积和黄疸，CA19-9浓度也可增高，但往往呈“一过性”，而且其浓度多低于120U/ml，必须加以鉴别。糖类抗原19-9(CA19-9)常用消化系统肿瘤标志物CA242是消化系统的肿瘤标志物，对胰腺癌、结直肠癌有较高的敏感性与特异性，对肺癌、乳腺癌也有一定的阳性检出率。对胰腺癌的诊断意义上优于CA19-9，敏感性可达66％~100％，可用于胰腺癌和良性肝胆疾病的鉴别诊断及预后，也用于结直肠癌病人术前预后及复发鉴别。CEA与CA242无相关性，具有独立的诊断价值，且二者之间具有互补性；CEA与CA242联合检测可提高胰腺癌、结直肠癌检出的敏感性。还有助于肝癌、胃癌和食管癌的诊断。糖类抗原242(CA242)常用消化系统肿瘤标志物CA50是胰腺和结、直肠癌的肿瘤标志物，因其广泛存在胰腺、胆囊、肝、胃、结直肠、膀胱、子宫，它的肿瘤识别谱比CA19-9广，因此它又是一种广谱肿瘤标志相关抗原。CA50对胰腺癌和胆囊癌的阳性检出率较高，可用于胰腺癌、胆囊癌等肿瘤的早期诊断，对肝癌、胃癌、结直肠癌及卵巢肿瘤诊断亦有较高价值。值得指出的是CA50在80％的AFP阴性的肝细胞癌中呈阳性结果，作为手术治疗彻底与否的指标也有较大的临床意义。另外，CA50对恶性胸水有很高的阳性检出率，而良性胸水尚无阳性报道，故CA50的检测对鉴别良、恶性胸水亦有较大的应用价值。另有报导萎缩性胃炎患者胃液CA50的浓度与正常人比较有显著改变。通常认为萎缩性胃炎是癌前高危期，因此CA50可作为癌前诊断指标之一。在胰腺炎、结肠炎和肺炎发病时，CA50也会升高，但随炎症消除而下降。糖类抗原50(CA50)常用消化系统肿瘤标志物AFP是早期诊断原发性肝癌最敏感、最特异的指标，适用于大规模普查，如果成人血AFP值升高，则表示有患肝癌或慢性肝炎的可能。AFP含量显著升高一般提示原发性肝细胞癌，越是晚期，AFP含量越高，但阴性并不能排除原发性肝癌。在转移性肝癌中，AFP值一般低于350-400ng/ml。胃癌、胰腺癌等疾病时，AFP值也会偏高。甲胎蛋白(AFP)常用消化系统肿瘤标志物胃蛋白酶原I、II（PGI、PGII）是由胃主细胞合成和分泌并转化成有分解蛋白能力的胃蛋白酶。幽门螺杆菌(HP)感染和萎缩性胃炎是与胃癌密切相关的两种病变，胃蛋白酶原(PG)的变化已成为前面三种病变的良好诊断指标,以及治疗和预防干预过程中的监测指标。测定PG，特别是PGI／PGII比值和PGI水平，对于诊断慢性萎缩性胃炎和肠化生有很高的价值，血清PG的变化可被认为是胃癌高危的亚临床指标。PGI/PGII值降低是胃癌和胃腺瘤的高危信号，血清PG的测定是普查中筛选胃癌和胃腺瘤的良好指标。胃蛋白酶原I、II（PGI、PGII）常用消化系统肿瘤标志物胰胚胎抗原（POA）：POA是胰腺癌的又一新型、敏感、特异的新标志物，胰腺癌的POA的阳性率＞95%，其血清含量一般会＞20U/ml；当肝癌、大肠癌、胃癌等恶性肿瘤时也会使POA升高，但阳性率较低。角蛋白18-3A9（CK18）：CK18-3A9片段是一种分化特异的蛋白质，广泛存在于上皮细胞，浓度与肿瘤病程进展、转移密切相关，临床上主要用于胃癌的辅助诊断。研究表明肠癌、肺癌也可使血清中CK18-3A9片段浓度升高。其他常用消化系统肿瘤标志物的临床应用大多数TM与肿瘤分期有关，且浓度与肿瘤大小或分期之问通常存在着关联。CEA与进展期低分化腺癌相关，亦与肿瘤大小、浆膜面浸润相关；在判断癌患者临床分期方面，CA19-9是比CEA更为敏感的指标，CA19-9与肿瘤大小及浸润深度相关；CA72-4水平与肿瘤大小，分期、浆膜受累有关。AFP水平在一定程度上反应肿瘤的大小，其动态变化与病情有一定的关系，也是显示治疗效果和预后判断的一项敏感指标。肿瘤分期、部位、大小、浸润深度常用消化系统肿瘤标志物的临床应用检测血清CA19-9等的含量，可以预测胃癌的肝、腹膜及淋巴结的转移；高水平的CA19-9是提示淋巴结转移的独立因子。胃癌患者AFP的高表达提示有肝转移的可能；CEA能介导肿瘤细胞与肝实质接触而提示肝转移。CA72-4水平与肿瘤大小有关，可用于检测术后是否有肿瘤细胞残存，且与淋巴结受累有关。CA72-4在胃癌的监测中敏感性高于CA19-9，与CEA相当，在有淋巴结转移的情况下CA72-4明显升高，胃癌患者术前血浆CA72-4表达水平与胃癌的分期有相关性。CA72-4、CA19-9水平与肿瘤大小、淋巴结转移及浸润深度有关，可用于检测术后是否有肿瘤细胞残存。当CA19-9小于1000U/ml时，有一定的手术意义，肿瘤切除后CA19-9浓度会下降，如再上升，则可表示复发。对胰腺癌转移的诊断也有较高的阳性率，当血清CA19-9水平高于10000U／ml时，几乎均存在外周转移复发与转移的监测常用消化系统肿瘤标志物的临床应用食道：SCCA、CEA胃：CA72-4、CEA、CA19-9、CA242、PGI、PGII、CA50、CK18(TPS)；肠、胆道：CEA、CA19-9、CA72-4、CA242、CA50；胰腺：CA242、CA19-9、CEA肝：AFP、CEA、AFU、FERRITIN、CA50、CA72-4、CA19-9多肿瘤标志物联合应用展望随着分子生物学技术不断进展，肿瘤标志物的研究已进入分子水平，肿瘤标志物的概念、内容及应用都在不断地扩展，这必将会促进消化系统癌的早期诊断、监测肿瘤发生及预后的判断。胃肠道恶性肿瘤中的肿瘤标志物基因表达检测方法：RT-PCRCK20有严格的上皮特异性分布，包括胃黏膜及幽门腺体内分泌细胞、十二指肠黏膜及沿绒毛排列的上皮细胞、泌尿道伞状细胞、表皮Merkel细胞、舌味蕾细胞。临床上较重要且较难诊断的具腺体形态的肿瘤中，CK20阳性可提示肿瘤可能起源于结肠、胃、胆道系统、胰腺或卵巢的黏液腺癌，排除起源于子官内膜腺癌、卵巢非黏液腺癌、胸腺腺癌、唾液腺癌及间皮瘤可能，而肺癌、乳腺癌的可能性较小。胞角蛋白20(CK20)极其mRNA(CK20mRNA)胃肠道恶性肿瘤中的肿瘤标志物基因表达检测由于CK20表达具有高度组织特异性，在正常骨髓、血液、淋巴结中均无表达，而几乎全部胃肠道肿瘤中均有较多表达，且在侵袭、转移、扩散到其他组织器官时始终保持稳定。外周血循环中CK20mRNA高表达提示进展期肠癌患者有高复发的危险。国内研究表明，CK20mRNA阳性率和肿瘤分级及肿瘤大小呈显著正相关，而与肿瘤病理分化没有相关性。有研究显示：在非肿瘤患者的血液和骨髓液中也有CK20表达，因此设定一个阈值十分必要。可见，CK20对恶性肿瘤特别是胃肠道恶性肿瘤的预后判断有一定帮助，但还需迸一步研究证实其与肿瘤分期、大小和恶性程度的确切关系及其在非肿瘤组织中的表达状况。胞角蛋白20(CK20)极其mRNA(CK20mRNA)胃肠道恶性肿瘤中的肿瘤标志物基因表达检测MMP-2和TIMP-2可作为胃肠道肿瘤恶性程度、侵袭能力判断的重要参考指标，但对胃肠道恶性肿瘤的特异性不强。MMP-2和TIMP-2在胃肠癌中表达阳性率与淋巴结转移、浸润深度显著相关。MMP-2和TIMP-2在结肠癌伴肝脏转移患者中的表达显著高于未转移者。MMP-2可作为癌症进展的监测指标和判断预后和手术后化疗方案制订的参考依据。MMP-2是肿瘤转移和预后判断较理想的指标，且MMP-2/TIMP-2比值较单个指标表达的阳性率对评价肿瘤转移和预后情况更有价值。基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs）蛋白指纹技术（蛋白组学）研究进展蛋白质是基因功能的执行者，疾病相关基因组(包括癌基因等)的活化就会表达特异的蛋白质，随着蛋白质组学的兴起，业已证明蛋白指纹图谱分析是有效的早期诊断恶性肿瘤的具有划时代的诊断新模式。蛋白指纹技术（蛋白组学）研究进展蛋白指纹图谱技术不同于只能单一指标分析的传统肿瘤标志物，通过对蛋白质动态、全景的分析，将病人疾病早期最微小基因表达产物(蛋白质或多肽)系统地分析，获得待检标本中各种蛋白的含量和蛋白质分子量等信息，绘制成蛋白指纹图谱(EPG)，通过计算机软件与正常人、亚健康状态人群、良性疾病和癌症病人的指纹图谱库对照，比较分析差异，就能快速、敏感和特异地发现和捕获新的与疾病相关的蛋白。原理蛋白指纹技术（蛋白组学）研究进展表面加强激光解析-电离飞行时间质谱技术：SELDI-TOF-MS（surface-enhancedlaserdesorption/inionation-timeofflight-massspectra）检测技术蛋白指纹技术（蛋白组学）研究进展将患者血清中蛋白质成分的变化记录下来，绘制成蛋白指纹质谱图，并显示样品中各种蛋白的分子量、含量等信息，从而鉴别癌症患者和非癌症患者的血清蛋白质组图谱，这样就能最终发现和捕获新的特异性相关蛋白及其特征，整个测定只需几十分钟即可完成。检测技术胃肠道恶性肿瘤中的肿瘤标志物基因表达检测待测样本来源广，不需要特殊处理，可以直接点样检测，如血清、尿、组织液等；可检测蛋白质分子质量范围大(0—500ku)；应用范围广，如肿瘤的早期