开题报告正式课件

葫芦素BNF-KB信号通路诱导Ramos细胞外源性凋亡(CucurbitacinBinducesRamoscellexogenousapoptosisthroughinhibitingNF-KBsignalpathway)

姓名：丁秀丽导师：吴雄志葫芦素BNF-KB信号通路诱导Ramos细胞外源性凋亡姓名：1主要内容研究背景1研究思路2研究内容3研究流程4创新性与可行性5主要内容研究背景1研究思路2研究内容3研究流程4创新性与可行2研究背景葫芦素是从葫芦科植物中提取的一类四环三萜类化合物，其强大的抗肿瘤作用尤其令人瞩目，有望成为一种新的有效的抗肿瘤药物。JianChaoChenetal.,Cucurbitacinsandcucurbitaneglycosides:structuresand

biological

activities,Nat.Prod.Rep,2005,2005,386–396研究背景葫芦素是从葫芦科植物中提取的一类四环三萜类化合物，其3葫芦素发现于1960s，因具有广泛的抗肿瘤活性而备受关注，但由于其较窄的治疗指数和非特异的毒副作用，其研究在随后的几十年里被停滞。随后，基于美国NCI60抗肿瘤筛选平台的建立，葫芦素又重新吸引了研究者的目光。它的抗肿瘤活性几乎可以与紫杉类，长春新碱和鬼臼素类等植物来源的抗肿瘤药物相睥睨，是一种极具前景的新型抗肿瘤药。DhongHyunLeeetal.,Cucurbitacin:AncientCompoundSheddingNewLightonCancerTreatment,TheScientificWorldJOURNAL(2010)10,413–418葫芦素发现于1960s，因具有广泛的抗肿瘤活性而备受关注，但4葫芦素的抗肿瘤活性葫芦素B乳腺癌肺癌白血病，淋巴瘤。。。结直肠癌前列腺癌喉癌脑胶质瘤骨肉瘤葫芦素的抗肿瘤活性葫芦素B乳腺癌肺癌白血病，淋巴瘤。。。结直5相关机制XiupingChenetal.,Biologicalactivitiesandpotentialmoleculartargets

of

cucurbitacins:afocusoncancer,Anti-CancerDrugs2012,23:777–787相关机制XiupingChenetal.,Biolo6研究思路

研究证实CuB能够通过调节STAT3,NF-KB信号通路及其下游信号分子Bcl-2,Bcl-xl,Bax,mcl-l等诱导细胞发生内源性凋亡。但有关CuB对淋巴瘤细胞外源性凋亡通路影响的研究尚未见报道。葫芦素B

本研究通过观察CuB作用后人淋巴瘤Ramos细胞形态、增殖、凋亡、周期、外源性凋亡相关分子的变化情况，探讨其对Ramos细胞外源性凋亡的影响及其可能的作用机制。研究思路研究证实CuB能够通过调节STAT3,NF-KB7理论依据1我们研究发现葫芦素B对Burkitt淋巴瘤Ramos细胞有明显的凋亡诱导作用。2通过初步实验证实其能上调NF-KB的抑制蛋白IkBa的蛋白表达。3我们又通过westernblot实验检测，发现其主要影响外源性凋亡蛋白caspase8。理论依据1我们研究发现葫芦素B对Burkitt淋巴瘤Ramo8通过查阅文献…caspase8c-FLIPNF-KB葫芦素能够抑制泛素蛋白酶体系统对IkBa的降解，从而抑制NF-KB信号通路。NF-KB又恰好能上调外源性凋亡调控分子c-FLIP的表达。c-FLIP是目前发现的唯一在DISC水平参与调节受体调亡通路的分子，它能抑制caspase8的激活，从而抑制外源性凋亡。

由此将NF-KB与外源性凋亡联系起来NingDingetal.,ApoptosisInductionThroughProteasome

InhibitoryActivityofCucurbitacinDin

HumanT-CellLeukemia,Cancer2011;117:2735–46WangQetal.PKCdelta-mediatedregulationofFLIPexpressioninhumancoloncancercells.IntJCancer,2006Jan15;118(2):326-34.MaHM,ZhouKY,ProgressinBiochemistryandBiophysics,2006,33(10):932~939通过查阅文献…caspase8c-FLIPNF-KB葫芦素能9信号通路如下：-a信号通路如下：-a10研究内容细胞学实验分子生物学实验

动物实验

1.CuB对Ramos的增殖抑制作用。

2.CuB对Ramos的凋亡诱导作用。

3.CuB对Ramos的细胞周期阻滞作用。

Text裸鼠移植移植瘤免疫组化

4.CuB对IkBa，p-IkBa的蛋白表达的影响。5.CuB对c-FLIP蛋白表达的影响。6.CuB对caspase8凋亡酶活性的影响。7.CuB对P65mRNA片段,c-flip的转录水平影响。研究内容细胞学实验分子生物学实验动物实验1.CuB对Ra11研究流程Western检测IkBa,NF-KB,c-FLIP蛋白表达

RT-PCR检测p65C-flip,mRNA转录

Western检测caspas8蛋白含量变化Hochest染色检测细胞凋亡流式细胞术检测细胞凋亡CuB通过抑制NF-KB信号通路诱导Ramos细胞外源性凋亡细胞学实验分子生物学实验

台盼蓝染色测增殖

流式细胞术检测细胞周期动物实验裸鼠淋巴瘤移植瘤模型建立免疫组化检测NF-KB,C-FLIP水平研究流程Western检测IkBa,NFRT-PCR检测p12创新性从NF-KB信号通路阐明了CuB诱导凋亡是通过外源性凋亡通路，与c-FLIP下调有关。第一次通过裸鼠移植瘤模型研究CuB对Burkitt淋巴瘤的体内抑瘤作用。为CuB早日开发成抗肿瘤药物进入临床应用积累经验。创新性从NF-KB信号通路阐明了CuB诱导凋亡是通过外源性凋1314写在最后成功的基础在于好的学习习惯Thefoundationofsuccessliesingoodhabits14写在最后成功的基础在于好的学习习惯结束语当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的，所以不要放弃，坚持就是正确的。WhenYouDoYourBest,FailureIsGreat,SoDon'TGiveUp,StickToTheEnd演讲人：XXXXXX

时间：XX年XX月XX日

结束语15葫芦素BNF-KB信号通路诱导Ramos细胞外源性凋亡(CucurbitacinBinducesRamoscellexogenousapoptosisthroughinhibitingNF-KBsignalpathway)

姓名：丁秀丽导师：吴雄志葫芦素BNF-KB信号通路诱导Ramos细胞外源性凋亡姓名：16主要内容研究背景1研究思路2研究内容3研究流程4创新性与可行性5主要内容研究背景1研究思路2研究内容3研究流程4创新性与可行17研究背景葫芦素是从葫芦科植物中提取的一类四环三萜类化合物，其强大的抗肿瘤作用尤其令人瞩目，有望成为一种新的有效的抗肿瘤药物。JianChaoChenetal.,Cucurbitacinsandcucurbitaneglycosides:structuresand

biological

activities,Nat.Prod.Rep,2005,2005,386–396研究背景葫芦素是从葫芦科植物中提取的一类四环三萜类化合物，其18葫芦素发现于1960s，因具有广泛的抗肿瘤活性而备受关注，但由于其较窄的治疗指数和非特异的毒副作用，其研究在随后的几十年里被停滞。随后，基于美国NCI60抗肿瘤筛选平台的建立，葫芦素又重新吸引了研究者的目光。它的抗肿瘤活性几乎可以与紫杉类，长春新碱和鬼臼素类等植物来源的抗肿瘤药物相睥睨，是一种极具前景的新型抗肿瘤药。DhongHyunLeeetal.,Cucurbitacin:AncientCompoundSheddingNewLightonCancerTreatment,TheScientificWorldJOURNAL(2010)10,413–418葫芦素发现于1960s，因具有广泛的抗肿瘤活性而备受关注，但19葫芦素的抗肿瘤活性葫芦素B乳腺癌肺癌白血病，淋巴瘤。。。结直肠癌前列腺癌喉癌脑胶质瘤骨肉瘤葫芦素的抗肿瘤活性葫芦素B乳腺癌肺癌白血病，淋巴瘤。。。结直20相关机制XiupingChenetal.,Biologicalactivitiesandpotentialmoleculartargets

of

cucurbitacins:afocusoncancer,Anti-CancerDrugs2012,23:777–787相关机制XiupingChenetal.,Biolo21研究思路

研究证实CuB能够通过调节STAT3,NF-KB信号通路及其下游信号分子Bcl-2,Bcl-xl,Bax,mcl-l等诱导细胞发生内源性凋亡。但有关CuB对淋巴瘤细胞外源性凋亡通路影响的研究尚未见报道。葫芦素B

本研究通过观察CuB作用后人淋巴瘤Ramos细胞形态、增殖、凋亡、周期、外源性凋亡相关分子的变化情况，探讨其对Ramos细胞外源性凋亡的影响及其可能的作用机制。研究思路研究证实CuB能够通过调节STAT3,NF-KB22理论依据1我们研究发现葫芦素B对Burkitt淋巴瘤Ramos细胞有明显的凋亡诱导作用。2通过初步实验证实其能上调NF-KB的抑制蛋白IkBa的蛋白表达。3我们又通过westernblot实验检测，发现其主要影响外源性凋亡蛋白caspase8。理论依据1我们研究发现葫芦素B对Burkitt淋巴瘤Ramo23通过查阅文献…caspase8c-FLIPNF-KB葫芦素能够抑制泛素蛋白酶体系统对IkBa的降解，从而抑制NF-KB信号通路。NF-KB又恰好能上调外源性凋亡调控分子c-FLIP的表达。c-FLIP是目前发现的唯一在DISC水平参与调节受体调亡通路的分子，它能抑制caspase8的激活，从而抑制外源性凋亡。

由此将NF-KB与外源性凋亡联系起来NingDingetal.,ApoptosisInductionThroughProteasome

InhibitoryActivityofCucurbitacinDin

HumanT-CellLeukemia,Cancer2011;117:2735–46WangQetal.PKCdelta-mediatedregulationofFLIPexpressioninhumancoloncancercells.IntJCancer,2006Jan15;118(2):326-34.MaHM,ZhouKY,ProgressinBiochemistryandBiophysics,2006,33(10):932~939通过查阅文献…caspase8c-FLIPNF-KB葫芦素能24信号通路如下：-a信号通路如下：-a25研究内容细胞学实验分子生物学实验

动物实验

1.CuB对Ramos的增殖抑制作用。

2.CuB对Ramos的凋亡诱导作用。

3.CuB对Ramos的细胞周期阻滞作用。

Text裸鼠移植移植瘤免疫组化

4.CuB对IkBa，p-IkBa的蛋白表达的影响。5.CuB对c-FLIP蛋白表达的影响。6.CuB对caspase8凋亡酶活性的影响。7.CuB对P65mRNA片段,c-flip的转录水平影响。研究内容细胞学实验分子生物学实验动物实验1.CuB对Ra26研究流程Western检测IkBa,NF-KB,c-FLIP蛋白表达

RT-PCR检测p65C-flip,mRNA转录

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