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PAGEPAGE22/22兽医药理学实验教案.兽医药理学实验基本要求明确药理学实验课的目的兽医药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。其目的为:()通过实验,使学生掌握药理学实验更牢固地掌握药理学的基本概念。通过实验,培养学生对科学工作的严肃态度、严格的要求、严密的工作方法和实事求是的作风,并训练学生能客观地对事物进行观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力。药理学实验课的要求药理学实验课包括实验操作、整理实验结果、写实验报告等环节。为了提高实验效果,达到上述目的,要求作到下列事项:重视预习 实验前应仔细阅读实验指导了解实验的目的和要求方法和操作步骤领会其设计原理以做到心中有数,避免实验中出现忙乱和差错。()加强基本技能训练实验时要在教师指导下,培养独立操作能力,克服依耐性和怕脏、怕动手等不良联系理论进行思考分析。()客观地记录和整理实验结果 药理学实验结果有记录仪描记的曲线,测量资料(如血压、心率、瞳大小、睡眠时间等数据)和记数资料(如动物死活数、阳性或阴性反应等)。要如实准确地对观察到的数据及时加以记录,决不能凭主观想象或书本理论知识代替实验观察到的客观事实。实验完毕,对结果分别加以整理,记录的曲线要加以剪裁或复制,并注明动物的种类、体重、性别、日期、实验题目、给药剂量和途径。测量和记数资料应酌情列表和画图,以便比较,使结果一目了然。()认真书写实验报告写实验报告可以培养同学分析和综合概括问题的能力,亦是训练用文字表达的一种重要手段。每次实验后要求用统一的实验报告本写报告,交负责老师评阅。在实验报告中要求列出实验题目、实验方法和实验结果。有时可对实验结果产生的机理或异常的原因加以分析,但不可离开实验去抄书。最后把实验结果加以概括性总结,并写成结论。要注意科学性和逻辑性,不要单纯地重复实验结果,也不要超过验证范围任意扩大。文字要简练、工整。遵守实验室规则()保持肃静、整洁,以创造良好的学习环境。()分工合作,认真、仔细、有条不紊地进行实验。实验前、后应清点仪器,必须了解器材的性能后才使用,不得任意拨动仪器的开关和旋扭。()厉行节约。按实验需要取用动物,不得多拿;对动物要爱护,用毕放回指定的笼内,死亡动物和废物丢入指定场所;玻璃仪器应轻取轻放;药品按使用量吸取,不得污染。实验完毕要整理器材,洗净擦干,妥善放置;如有破损应报告指导老师,以酌情处理。()注意安全,严防触电、火灾、动物咬伤及中毒等事故的发生。()搞好清洁卫生,关好门窗、水电后才能离开实验室。.常用实验动物的捉持和给药方法实验一、小白鼠的捉持和给药方法一、捉持方法(图)。此外,也可单手捉持,难度较大,但速度快。先用拇指和食指抓住小鼠尾巴,用小指、无名指和手掌压住尾根部,再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部皮肤而固定(图)。
图 图图 小白鼠的捉持法.灌胃法小鼠固定后,使腹部朝上,颈部拉直,右手用带灌胃针头的注射器吸取药液(或事先将药液吸好),将针头从口交插入口腔,再从舌背进沿上腭进入食道(图)。若遇阻力,应退出后再插,切不可用力过猛,防止损伤或误入气管导致动物死亡。灌胃量一般不超过。(~号针头(避开膀胱)。可先刺入皮下~,再刺入腹腔,以防药液外漏(图)。针头刺入部位不宜太高太深,以免刺破内脏。注射量一般为~。图小白鼠的灌胃法 图小白鼠的腹腔注射法.皮下注射法 一般两人合作。一人左手抓住小鼠头部皮肤,右手拉住鼠尾;另一人左手提高背部皮肤,右手持住注射器(针头号同上),将针头刺入提起的皮下(图)。若一人操作,左手小指和手掌夹住鼠尾拇指和食指提起背部皮肤,右手持注射器给药。一般用量为~。图小白鼠的皮下注射法 图小白鼠的尾静脉注射法.肌肉注射法两人合作时,一人抓鼠方法同上,另一人左手拉直一侧后肢,右手持注射器,注射部位多选后腿上部外侧(针头号同上)。如一人操作,抓鼠方法类似腹腔注射,只是药液注射在肌肉内。每腿的注射量不宜超过。.尾静脉注射法将小鼠置于待置的固定筒内,使鼠尾外露,并用酒精或二甲苯棉球涂擦,或插入温水中浸泡片刻,使尾部血管扩张。左手拉尾,选择扩张最明显的血管;右手持注射器(~号针头),近为尖部/处静脉开始,以便重复向上移位注射(图)。一般用药量为~,不宜超过。实验二、家兔的捉持和给药方法一、捉持方法一般左手抓住兔颈背部皮肤,将其提起,右手托住臀部称坐位姿态。不要抓两耳,以防兔挣扎。二、给药方法.耳缘静脉注射法 一人操作,将兔放入固定箱或试验台上,选好耳缘静脉(在耳背的下缘),拔除局部的毛,用酒精棉球涂擦,并用食指轻弹耳,使血管扩张.用左手的食指和中指夹住耳根,拇指和无名指夹住耳尖部拉直右手将抽好药液的注射器(~号针头)阵头刺入血,用拇指和食指使针头和兔耳固定,将药液推入.如针头在血管内,推注轻松,并可见血液被药液冲走如不在血管内,则推注有阻力,耳局部变白或肿,应立即拔除重新注射.注射完毕,则用手指或棉球压在针眼上,再拔出针头,并继续按压片刻,防止出(图)如两人操作,一人夹住兔子,右手暴露血管,压住耳根部使血管充盈,另一人注射给药。图 图.灌胃法两人合作,一人坐下,两腿夹住兔身,左手固定兔耳,右手抓住前肢;另一人将开口器从嘴角插入口腔,压在舌上,并向后翻转几下,使兔舍伸直。取号导尿管由开口器中部的小孔插入食道约。如插入气管,兔子则剧烈挣扎、呼吸困难。也可将导尿管外端浸入水中,不见气泡则表示插在胃中。插好后,把注射器接在导尿管上,将药液推入。再注入少量空气,使导尿管中所有药液进入胃内(图)。灌完药液后,先慢慢抽出导尿管,再取出开口器。一般用药量为~㎏。.腹腔、肌肉、皮下注射法 基本同小白鼠,唯针头可稍大(~号),给药量可稍多,一般腹腔为~㎏肌肉、皮下为~㎏。.眼结合膜内给药法 将兔固定在兔箱内或夹在腋下,左手拇指和食指拉开兔下眼睑成杯状,中指压住眼内眦,以防药液由鼻泪管流入鼻腔内而被吸收。滴入药液~滴,将下眼睑向上合拢,使眼球充分接触药液约后将手放开,让药液自然流出。实验三、大白鼠的捉持和给药方法一、捉持方法大白鼠比小白鼠攻击性强,不要突然袭击去抓它,以免被咬伤。捉持前先戴上手套,右手夹住尾巴,放在但用力过大会使其窒息死亡。二、给药方法类似于小白鼠,只是工具和用药量大点,静脉给药除尾静脉注射外还可舌下静脉给药。【目的】
.药理学总论实验实验一、药物的基本作用.了解药物的兴奋作用和抑制作用;局部作用和吸收作用等。.观察硫喷妥钠的抗惊厥作用。【材料】器材:、注射器、普通剪药品:普鲁卡因溶液、的硫喷妥钠溶液动物:家兔只【方法】 取家兔只,称体重。先观察正常活动情况,如四肢站立和行走姿态;并用针刺其后肢,测其有无痛觉反射。然后于一侧坐骨神经周围(使家兔作自然俯卧式,在尾部坐骨嵴与股骨头间摸到一凹陷处)注入普鲁卡因溶液(),观察同侧后肢有无运动和感觉障碍;待局部作用明显后(分钟),在将普鲁卡因溶液注入肌肉待出现中毒症(惊厥立即由耳缘静脉缓慢注射的硫喷妥钠溶液至肌肉松弛为(约【注意事项】.测试痛觉反射针刺后肢踝关节处,轻度适中。到髂骨稍回退一点。抑制,如不安、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。【思考题】根据实验观察,分析药物的基本作用:.药物的兴奋作用和抑制作用表现有那些?.哪些表现是药物的局部作用?哪些表现是药物的吸收作用?.普鲁卡因的选择作用表现在哪些方面?..哪些是治疗作用?哪些是不良反应?.有没有观察到药物的拮抗作用?实验二、剂量对药物作用的影响【目的】观察不同剂量戊巴比妥钠对小鼠作用的差异。【材料】器材:天平、注射器药品:、、戊巴比妥钠溶液动物:小白鼠只【方法】 取小鼠只,以苦味酸溶液涂毛作不同记号。称其体重及观察小鼠正常时的活动情况。各鼠经腔注射不同剂量的戊巴比妥钠溶液,分别置于小笼中,密切观察先后出现的反应。【结果】鼠号现标记体重给药后表现剂量潜伏期给药前表()()()【注意事项】麻醉、死亡等。.比较各鼠所出现反应的程度和发生快慢。【思考题】了解药物的剂量和作用的关系对于进行药理学试验和临床用药有何重要意义?实验三、不同给药途径对药物作用的影响【目的】 观察不同给药途径对硫酸镁作用的影响【材料】器材:天平、注射器、小鼠灌胃针头药品:的硫酸镁水溶液动物:体重相近的小白鼠只【方法】 取小白鼠只,一只由腹腔注射的硫酸镁水溶液();另一只用同样剂量的硫酸镁水溶液灌胃分别置小笼中,观察两鼠的表现,并记录结果。【结果】鼠号标记体重 剂量 给药途径 给药前表现给药后表现()()【注意事项】状,重则死亡。.注射后作用发生较快,需留心观察。【思考题】给药途径不同时,药物的作用为什么有的会出现质的差异,有的会出现量的不同?实验四、肝脏功能状态对药物作用的影响【目的】观察肝功能损伤对戊巴比妥钠作用的影响【材料】药物:四氯化碳油溶液、戊巴比妥钠溶液动物:小白鼠只【方法】取正常小鼠和肝功能已破坏的(实验前小时皮下注射四氯化碳油溶液)小鼠各只,称其体重。分别由腹腔注射戊巴比妥钠溶液(),比较小鼠麻醉时间(以翻正反射消失为指标)。实验结束时将小鼠拉断颈椎处死,剖取肝脏,比较两组动物肝脏外观的不同。组别鼠号体重()药量()组别鼠号体重()药量()潜伏期()维持时间()肝脏肉眼观察正常组损伤组【注意事项】.如室温在℃以下,应给麻醉小鼠保暖,否则动物将因体温下降,代谢减慢而不易苏醒。小时皮下注射。.四氯化碳中毒小鼠的肝脏比较肿大,有的充血,有的变成灰黄色,触之有油腻感,其小叶比正常肝脏更清楚。【思考题】.为什么损害肝脏的小白鼠注射戊巴比妥钠后作用时间延长?.讨论肝脏功能与临床用药的关系?.亦可用硫喷妥钠代替戊巴比妥钠。实验五、药物作用的个体差异及常态分布规律【目的】了解药物反应的个体差异和常态分布规律翻正反射消失持续时间()以下-以上翻正反射消失持续时间()以下-以上小鼠数(只)再以翻正反射消失持续时间组距为横坐标,每个组距内的小鼠数为纵坐标,仿照示例绘制直方图,观察各组距内的小鼠数是否呈常态分布。【思考题】药物反应的个体差异规律对于判断药理实验和临床上用药治病的结果有何指导意义?.传出神经系统药物实验实验一、拟胆碱药和抗胆碱药对家兔瞳孔的影响【目的】观察阿托品和毛果芸香碱对瞳孔的影响。【材料】器材:家兔固定盒、瞳孔测量尺、注射器动物:家兔只【方法将两药交换滴入,给药后,重复测量瞳孔大小。兔眼滴入药物给药前第一次兔眼滴入药物给药前第一次第二次瞳孔直径()给药后第一次第二次左右硫酸阿托品毛果芸香碱毛果芸香碱硫酸阿托品【注意事项】.滴药液时,要把下眼睑拉成杯状,同时压迫内眦部,以免药液经鼻泪管流入鼻腔而吸收。待滴药后,再将手放开。.测量瞳孔时,请勿触及角膜。.试验始终,要求兔头朝一个方向固定,以免由于光强度的变化影响结果。【思考题】滴入毛果芸香碱及阿托品后,瞳孔为何有不同的变化?如果将毛果芸香碱换成毒扁豆碱,结果会如何?为什么?实验二、敌百虫的中毒及其解救【目的】观察敌百虫中毒的症状及阿托品、解磷定作用。【材料】器材:、注射器、测瞳尺药品:%精制敌百虫溶液、%硫酸阿托品溶液、%解磷定溶液动物:家兔只【方法】.取家兔只,称重。分别观察并记录活动情况、呼吸(频率、幅度、节律是否均匀)、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤等。.给家兔腹腔注射%精制敌百虫().随时观察,并记录上述各指标的变化。待中毒症状明显后,立即耳缘静脉注射%硫酸阿托品溶液()观察上述指标的变化。.耳缘静脉注射%解磷定溶液()。观察上述指标的变化。观察阶段活动情况呼吸情况瞳孔大小观察阶段活动情况呼吸情况瞳孔大小唾液分泌大小便次数及形状肌张力及震颤给药前给敌百虫后给阿托品后给解磷定后【注意事项】.有机磷农药为剧毒药,切勿污染。如手接触后,可用肥皂水清洗,但敌百虫则不能用碱性物。.本试验为分析阿托品和解磷定的解救机制而设计的,临床上须将两药合用,才能获得最好的效果。脉以备抢救注药。如经尚为出现中毒症状,可追加/量。【思考题】有机磷农药中毒的机制是什么?阿托品和解磷定为什么能抢救有机磷农药中毒?在临床上如何应用?实验三、乙酰胆碱和阿托品对家兔离体肠管的影响【目的】观察乙酰胆碱和阿托品对家兔离体肠管的作用,分析其作用原理。学习离体器官的测定方法【材料】器材:离体器官测定仪、木槌、手术刀、手术剪、注射器药品:×乙酰胆碱溶液、%硫酸阿托品溶液、%氯化钡溶液,台式液动物:家兔只【方法】.离体肠管的制备取体重为㎏左右的家兔只,用木追击枕骨处死,迅速剖腹,取空肠和回肠的上端,置于盛有冷的台式液的器皿中,沿肠壁分离肠系膜,并将肠管剪数段,轻压出肠内容物,并冲洗干净,将肠管剪成~厘米的小段备用。.安装离体肠管试验装置打开离体器官测定仪,调整状态,让浴槽温度维持在±℃。在肠管两端结扎穿线,一端系于通气钩上,然后放入盛有台式液的浴槽中,另一端系于测定仪的换能器上,并连接记录仪。给肠肌约左右的前负荷,并调节通气速度(约个气泡),稳定后,调整记录仪的走纸速度,描记肠肌正常活动曲线。.加药:用注射器依次向浴槽中加入下列物质,描记曲线变化。()×乙酰胆碱溶液,当肠管显著收缩后,再加入()%硫酸阿托品溶液,当记录曲线下降到基线后再加入:()×乙酰胆碱溶液,如作用不明显,接着追加:()%氯化钡溶液,待作用稳定后,立即加入:()%的硫酸阿托品溶液【结果】剪下肠管收缩曲线,分析比较其作用。【注意事项】.剪取家兔肠管及冲洗、挂线等操作必须轻柔。.肠管两端穿线时切勿将肠腔缝死。.浴槽中液体,根据浴槽大小而定,应覆盖肠管。【思考题】用受体学说分析阿托品为什么能对抗乙酰胆碱对肠管的收缩作用?.中枢神经系统药物实验一、巴比妥类药物的催眠作用时间和强度的比较【目的】比较几种巴比妥类药物对动物作用强度和维持时间的长短【材料】器材:、注射器、婴儿秤、兔笼、秒表药物:%硫喷妥钠溶液、%戊巴比妥钠溶液、%苯巴比妥钠溶液、苦味酸溶液动物:家兔只(㎏)【方法】 取健康家兔,称重,编号。观察各兔正常活动及翻正反射情况。按家兔体重经耳缘静脉给药号家兔给%硫喷妥钠溶液(),号家兔给%戊巴比妥钠(),号家兔给%的苯巴比妥钠()。药后观察翻正反射消失时间及恢复时间,按下表记录。兔号体重(㎏)药物与剂量兔号体重(㎏)药物与剂量()翻正反射时间给药消失时间恢复时间作用特点【注意事项】.注药时不宜太快,特别是硫喷妥钠。.进行本试验时需保持环境安静。【思考题】根据实验结果讨论上述巴比妥类药物作用强度、快慢、欠缺的差别及原因。实验二、安定抗士的宁惊厥作用【目的】观察安定对士的宁中毒动物的解救作用。【材料】器材:与注射器、小儿头皮针、大烧杯或玻璃钟罩、天平、鼠笼药品:%或%士的宁溶液、%或%安定溶液、生理盐水、苦味酸溶液动物:小白鼠只或家兔只【方法】 取小白鼠只,各于腹腔注射%士的宁溶液~体重(~),其中一只接着注射%安定溶液另一只注射生理盐水,观察两鼠的反应情况。【方法】 取家兔只,与先在耳缘静脉插入头皮针,然后各兔腹腔注射%士的宁溶(),待出现强直性厥后,一只耳缘静脉注射%安定溶液(),另一只则由耳缘静脉注射生理盐水,记录两兔最后表现情况。动物号(鼠、兔)体重(或㎏)药物与剂量反应情况动物号(鼠、兔)体重(或㎏)药物与剂量反应情况%士的宁生理盐水%安定【注意事项】.苯实验亦可仅用只家兔,不用生理盐水对照,以节约动物。.右侧腹腔注射部位不宜太高,进针不宜过深。.士的宁亦可按由耳缘静脉给药。士的宁致惊厥作用快,要事先准备好安定。.有的动物,安定一次注射量不够,可适当加量。【思考题】安定为什么能解救士的宁所致的惊厥?实验三、氯丙嗪对小白鼠激怒反应的影响【目的】观察氯丙嗪的安定作用【材料】器材:型药理生理多用仪及其附件激怒盒、注射器、天平、鼠笼药品:%盐酸氯丙嗪溶液、生理盐水、苦味酸溶液动物:小白鼠(异笼喂养,雄性,体重在左右)只。【方法】多用仪的使用方法见附录。测阈值电压 取小鼠只,称重,标记,随机分为两组。每次取一放入激怒刺激盒内,接通多用仪电源并打开电源开关,由小到大调节交流电压输出强度,至小鼠出现激怒反应(两鼠竖立对峙、互相撕咬)为止(约)。记录两组小鼠出现激怒反应时的阈值电压()。刺激,观察两组小鼠给药前后反应的差异。组别鼠号体重药物组别鼠号体重药物激怒阈值电压激怒反应()()()给药前后给药氯丙嗪生理盐水【注意事项】.药理生理多用仪后面板上的开关拨向激怒,而不能拨向恒温一边。.刺激电压应从小到大,过低不引起激怒,过高易致小鼠逃避,同组小鼠用药前后应一致。.每组小鼠体重不要相差太大。(距尾尖/处使之疼痛,引起两鼠竖立互斗,代替药理生理多用仪。【思考题】根据实验结果,说明氯丙嗪安定作用的机理与临床应用。实验四、氯丙嗪对小白鼠的耐缺氧的影响【目的】观察氯丙嗪对动物基础代谢的影响【材料】器材:磨口瓶(容积需校正)、秒表、注射器、天平药品:%盐酸氯丙嗪溶液、%硫酸异丙肾上腺素溶液、生理盐水、苦味酸溶液、凡士林动物:小白鼠()只【方法】:取体重相似(±≤)、性别相同的小鼠只,标记,分别于腹腔注射%盐酸氯丙嗪()、%硫酸异丙肾上腺素()、生理盐水。后分别放入磨口瓶中,并用凡士林涂抹瓶塞周围,盖入密封,立即用秒表记录时间,记录各鼠停止呼吸时间。鼠号药物与剂量鼠号药物与剂量(%,)存活时间()全班实验存活时间均值()存活时间延长百分率()存活时间延长百分率(%)=(给药组平均存活时间均值-对照组平均存活时间)/对照组平均存活时间×%【注意事项】.磨口瓶用广口,且容积必须相同,加盖密封使不漏气,瓶底可放钠石灰(),易吸收二氧化碳与水气。.动物性别与体重的一致,可减少动物的差异性。【思考题】氯丙嗪对动物提高缺氧的耐受力与基础代谢有何关系,其在临床有何意义?实验五、哌替啶、阿司匹林、金铃子散的镇痛作用【目的】掌握用热板法测试镇痛药物、比较镇痛效价的方法。【材料】器材:恒温水裕、大烧杯、温度计、注射器、鼠笼、秒表、纱布条。药品:%盐酸哌替啶溶液、%阿司匹林混悬液、金铃子散水煎醇沉液()、生理盐水、苦味酸溶液。动物:雌性小鼠(~)只。【方法】将恒温水浴调节在±℃,放入大烧杯固定,将雌性小白鼠投入烧杯,以秒表测定其痛觉反应时间(以舔足为指标),共测次,间隔,取其平均值不超过的鼠作为正式实验使用。取合格小鼠只,称重,编号。号鼠腹腔注射%盐酸哌替啶溶液(),号鼠用%阿司匹林混悬液(),灌胃,号鼠腹腔注射金铃子散液()、号鼠腹腔注射生理盐水。在给药后、、、、各测痛觉反应一次。在测试中,如内无痛反应,应立即取出,并以计算。【结果】:体重鼠号(g) 药物与剂量 用药前(均值)
痛觉反应时间(s)给药后(s)【注意事项】.因动物个体差异大,故用药前必须挑选,痛反应时间在内者才能适应。.小鼠以雌性为好,因雄性小鼠遇热时,睾丸易下垂,阴囊触及热板而致反应敏感。.小鼠痛反应时间超过者应立即取出,以免烫伤足部,影响以后测试结果。.室温以℃左右为宜,过低动物反应迟钝,过高侧敏感。时效曲线(以全班实验结果统计)。痛阈提高百分率=(药后痛反应时间均值-药前痛反应时间均值)/药前痛反应时间均值×(如用药后平均反应时间减去用药前平均反应时间得到负数,则以零计算)实验六、尼可刹米对抗吗啡抑制呼吸的作用【目的】观察尼可刹米对吗啡中毒时抑制呼吸的解救作用。【材料】器材:兔固定箱、婴儿秤、兔口罩、橡皮管、呼吸容量管、换气瓶、双向形管、注射器、铁支架、双凹夹、胶布药品:%的吗啡溶液、%的尼可刹米溶液动物:家兔只(㎏以上)【方法】 取家兔只,称重,置于兔固定盒内,将连有橡皮管的口罩照住其鼻部,通过橡皮管与换气瓶的双向型管相连,另一端与呼吸容量瓶相连,呼吸容量瓶倒置于盛有浅红色水的面盆中。由兔耳缘静脉缓慢注射%吗啡溶液~(),待呼吸抑制明先后,再由耳缘静脉注射%尼可刹米溶液(),再观察上述指标的变化。动物体重()记录项目动物体重()记录项目后正常状态给吗啡后给尼可刹米呼吸曲线呼吸频率(次/)【注意点】.先测秒钟呼吸容量瓶中上升的气泡数(呼吸频率)及排水量(呼吸深度),连续次,取平均值。.吗啡注射速度应缓慢,以控制其出现潮式呼吸为止。如上述剂量不足时可适当增加。.尼可刹米注射不宜过快,否则易引起惊厥。【思考题】各种中枢兴奋药兴奋呼吸作用机理有什么不同?临床如何选择应用?实验七、药物的解热作用【目的】掌握大鼠发热模型的制备方法。观察阿司匹林、柴胡注射液的解热作用。【材料】器材:注射器、肛温表、灌胃针头药品:%阿司匹林混悬液、柴胡注射液()、生理盐水、甘油、苦味酸动物:大鼠【方法】选用体重为~大鼠,先测正常体温(一般为~℃)二次。选用体温合格者大鼠只,称重,标记,并分为正常组、模型组、阿司匹林组、柴胡注射液组,除正常组大鼠,其他各鼠皮下注射%的,二硝基苯酚~,待体温升高后(约升高℃),分别按剂量给药,阿司匹林组灌服%阿司匹林混悬液,柴胡注射液组肌注,其他组给等容量的生理盐水。并分别于给药后、、、、、测定各组大鼠的体温,记录体温变化,以观察阿司匹林的解热作用。组别动物数大鼠组别动物数大鼠体温(℃)正常致热后【注意点】.实验室温度明显影响发热反应的速度和程度,故实验室温度应保持恒定在~℃。.致热剂的配置 精密称取,二硝基苯酚,置于生理盐水中,滴加的氢氧化钠溶液,不断搅拌,待药澄明变亮黄色,再加入生理盐水至。【思考题】阿司匹林的解热作用机理是什么?对正常体温有无影响?两种药物的解热作用有何不同?.内脏系统药物实验实验一、利尿药和脱水药对动物尿量的影响【目的】观察药物对尿排血量的影响,了解利尿实验方法。【材料】器材:兔手术台、号导尿管、兔灌胃器、注射器、烧杯、量筒。药品:%戊巴比妥钠溶液、%速尿溶液,%葡萄糖溶液动物:家兔(雄性,㎏以上)只【方法在手术台上。将号导尿管尖端用液体石蜡润滑后自尿道轻而慢地插入,待导尿管通过膀胱括约肌进入膀胱后,既有尿液滴处,然后再插入(共~),用胶布将导尿管与兔体固定。轻轻按兔下腹部将膀胱内的尿液挤出。将最初分钟内滴出的尿液弃去,待滴速稳定后,在导尿管下接一量筒,收集分钟内滴出的尿液,作分钟内的尿量,同对照组比较。兔别物兔别物药尿量()剂量给药前给药后%葡萄糖%葡萄糖%速尿【注意事项】.插胃管时,应注意将胃管从兔的舌上方插入。并避免将胃管误插入气管。当胃管插好后,可将导管的外端放入水中,如有气泡,则说明误插入气管中,应拔出重新插。.插导管时动作应轻巧,以免引起膀胱括约肌痉挛;插入深度应适当,过多可致卷曲或管口上翘。为避免导尿不畅,可在导尿管的尖端两侧各剪一小孔。台,下腹部剪毛(或剃毛),在耻骨联合上缘向上沿正中线作约的皮肤切口,再沿腹白线剪开腹部及腹膜,暴露膀胱。在膀胱底部两侧找出输尿管,轻轻分离一侧输尿管,在其下方穿两根细线,在输尿管靠近膀胱处用一细线结扎。轻轻提起输尿管,在结扎处的上方剪一型小口,然后向肾脏方向插入一细塑料管~,并用另一根细线结扎固定。塑料管的另一端连接记滴装置,记录尿液滴数。将腹部切口处合拢,并用生理盐水纱布覆盖切口。待尿滴数稳定后,即可给药观察。【思考题】根据实验结果,试讨论利尿药和脱水药的作用机制。实验二、硫酸镁对大鼠胆汁的影响【目的】观察硫酸镁对大鼠胆汁流量的影响,验证药物的利胆作用【材料】器材:手术剪、注射器、内径的塑料管、镊子、医用缝合线药品:硫酸镁或其他药物动物:大鼠【方法】大鼠没有胆囊,其肝脏分泌的胆汁经肝总管进入十二指肠。因此,在胆总管引流收集胆汁,不受胆囊贮存胆汁功能影响,有利于利胆实验的进行。其体重大鼠,实验前禁食小时,用乌拉坦(%)麻醉,,背部固定,开腹后在右上腹找到胃幽门部,以幽门部为标准,翻转十二指肠,即可见到白色十二指肠乳头部,从乳头部追踪至胆总管,用镊子将覆盖在表形成瘘管引流胆汁,待胆汁流量稳定后,按剂量口服给药,测定给药前及给药后小时内胆汁流量,并可用胆汁来测定胆汁中胆酸、胆固醇、卵磷脂、胆红素及其它成分。组别鼠号体重剂量组别鼠号体重剂量给药前流量 给药后流量()()()()【注意事项】身比较方法。.由于体内雌激素水平会影响胆汁流量及胆汁成分的比例,故应用雄性动物实验。.巴比妥类能增加胆汁分泌和胆酸含量,并影响胆固醇、胆汁酸合成的限速酶,能诱导肝微粒体酶,故一般不用于麻醉动物。汁。.胆汁流量常以胆汁充盈导管的长度计算,也可记录滴数或毫升数。胆汁中的磷脂主要是卵磷脂。实验三、硫酸镁、生大黄对小鼠肠管推进性作用的影响(墨汁法)【目的】观察硫酸镁、生大黄对小鼠肠管运动的影响【材料】器材:手术剪、直尺、灌胃针头、注射器、天平药品:硫酸镁、%碳素墨汁生理盐水溶液、生大黄水煎液()动物:小鼠【方法】 取禁食小时成年体重相近小鼠只,均分成组,分别用硫酸镁墨汁溶液、生大黄墨汁溶液体重墨汁液体重灌胃,给药后分钟颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲部的肠管,置于托盘中拉成直线,测量肠管长度作为“小肠总长度”,从幽门至墨汁前沿的距离作为:墨汁在肠内的推进距离“用公式计算墨汁推进百分率”。墨汁推进百分率(%)=墨汁在肠内推进距离()/小肠全长()×%组别鼠号体重()药物剂量小肠总长度()墨汁推进距离()墨汁推进率()组别鼠号体重()药物剂量小肠总长度()墨汁推进距离()墨汁推进率()【注意事项】.给药至处死动物的时间必须准确,以免时间不同造成实验误差。.实验动物体重越相近越好,平均体重最好用~小鼠,肠管比较粗大,易于操作。.肠容积变化观察可以上下段结扎,称取重量,以定量化。.肠推进距离观察的着色剂,可用活性炭溶液或其他颜料(%卡红溶液)体重灌胃。实验四、几种药物对血凝时间的影响【目的】学习测定小鼠血凝时间的简易方法,观察药物对血凝时间的影响。【材料】器材:注射器、约长度的毛细管、载玻片、针头、秒表、棉球。药品:%的止血敏溶液、/肝素溶液、丹参注射液()、生理盐水、苦味酸溶液。动物:小白鼠只【方法】.毛细管法取左右的健康小白鼠,用苦味酸标记。号鼠腹腔注射%止血敏溶液(),号鼠腹腔注射肝素溶液(),号腹腔注射丹参注射液、号鼠腹腔注射生理盐水。后,以毛细管作眼眶内眦穿刺,取达的血柱。立即启动秒表,每隔秒折断毛细管一小截,检查有无出现血凝丝,计算从毛细管采血到出现血凝丝的时间,即为血凝时间。汇聚全班试验结果,计算三组小鼠的平均血凝时间,并作均数之间差异的显著性检测,从而得出关于止血敏和肝素对血凝时间的影响的结论。.玻片法作眼眶内眦穿刺后迅速取血,于清洁干燥的玻片的两端各滴血一滴,并启动秒表,每隔秒用干燥针头拨动血液一次,到针头能挑起纤维蛋白丝为止。另一滴血供复验。记录血凝时间,同上法统计实验结果。组别小鼠数给药血凝时间均值±标准差组别小鼠数给药血凝时间均值±标准差机率(值)毛细管法玻片法毛细管法玻片法【注意事项】.血凝时间可受温度影响,本实验室温最好在℃左右。.毛细管的内径最好为,并均匀一致。【思考题】止血敏、丹参注射液和肝素对凝血时间有何影响?其作用机理如何?临床上有哪些用途?.药物的安全性试验实验一、药物半数致死量测定【目的】测定戊巴比妥钠的半数致死量【材料】器材:注射器、量筒、烧杯、粗天平药品:%戊巴比妥钠动物:小白鼠(左右,雌雄各半)【方法】.预试验以%的戊巴比妥钠为原液,按倍稀释原则(即……)配成不同浓度的稀释液。取小鼠~只,每只一组,每组按以上不同稀释浓度的溶液腹腔注射,注射容量均为体重。找出正式试验时的最大剂量()和最小剂量()。即引起%和%动物死亡的剂量或引起大多数动物死亡和大多数动物存活的两个剂量。~时内动物死亡数。并计算各组的死亡率。按简化机率单位法或寇氏改进法计算半数致死量。【结果】.列表计算(参阅有关半数致死量测定计算方法介绍).报告被试药物 。给药途径给药日期和时间:室温 ℃动物品种=中毒症状:报告日期:【注意事项】.每次试验可根据实际具体情况采用其他药物代替戊巴比妥钠,如敌百虫、士的宁、普鲁卡因等。.可受室温、饥饿或饱食等因素影响,应注意掌握。.按新药审评办法,给药后应观察时间至少为天,并对中毒死亡动物进行肉眼尸检,记录所用病变。【思考题】的大小同毒性有什么关系?实验二、注射剂的热原检查热原又称为致热原,主要来自细菌的代谢产物。中草药含有有利于细菌生长繁殖的淀粉、糖、蛋白质等成分,如果在提取过程中在空气中暴露的时间过长,则容易被细菌污染而产生热原。我国药典规定的热原检查法系将一定剂量的供试品静脉注入家兔体内,在规定的时间内,观察家兔体温升高的情况,以决定供试品中所含热原的限度是否符合规定。【目的】学习用家兔检查注射剂内热原的方法和判断标准【材料】器材:兔固定盒、肛门温度计、注射器及针头、镊子、酒精棉球和干棉球药品:供试品(%或%葡萄糖注射液或其他注射液)、液体石蜡动物家兔(体重~㎏,雌兔应无孕)只【方法】.试验前准备 在做热原检查前~日,供试家兔应尽可能处于同一温度的环境中。凡未经使用于热原检查的家兔,应在试验前天内预测体温,进行挑选。于停食~小时后,用肛温表每隔小时测量体温次(测温时应尽可能避免对家兔刺激,温度计插入的深度各兔应相同,一般约厘米)共次。若次体温都在~℃范围内且最高最低体温差数不超过℃的家兔方可供试验用。试验用的注射器、针头及一切与供试品接触的器皿,应置℃的烘箱中加热或在℃的烘箱中加热小时,除去热源。.检查法 试验当日家兔停食后用肛门温度计每隔~测家兔体温次共~次末两次体温之差不得超过即以这两次体温的平均值作为该兔的正常体温。正常体温应在~℃内,各兔间的温差不得超过℃。取适用的家兔只,在测定其正常温度后内,自耳缘静脉缓缓注入预热到℃规定剂量的供试品溶液~,然后每隔按前法测体温次,共次。以次体温中最高的一次减去正常体温,即为该兔体温的升高度数。【结果】检查日期室温检查者检查名称理化性状和含量批号兔号体重第次测量注射前后温差结查结论【结果判断试品符合规定。如只家兔中仅有只体温升高或℃以上;或只家兔体温升高均在℃以下,但总数达到或℃以上,应另取只家兔复试。复试时,在只家兔中,体温升高或℃以上的兔数不超过只,并且初复试合并只家兔的体温升高度数不超过℃时,均应认为供试品符合规定。在初试只家兔中,体温升高或℃以上的家兔数超过只时;或在复试的只家兔中,体温升高或℃以上兔数超过只;或在初复试合并只家兔的体温升高总数超过℃时,均应认为供试品不符合规定。【注意事项】响动物体温变化的因素又较多,因此必须严格按照要求的条件进行试验。以液体石蜡,轻轻插入肛门深,测温时间至少,每兔各次测温最好用同一温度计,且测温时间相同,以减少误差。.本实验记述的方法主要供教学试验之用,其他事项可参阅药典。.也可以在供试品中加入适量伤寒副伤寒菌苗,或自制的非灭菌葡萄糖液,使学生观察到阳性结果。【思考题】热原检查对家兔有何要求?试验中须注意什么?药物的剂型及处方一、药物的剂型药物经过加工制成便于应用、保存和携带的成品,称药物制剂。制剂的型态,称剂型。一般可分为液体、固体和软体三类。现将一些比较常用的剂型简介如下:()液体剂型溶液剂(或):用外用瓶签。注射剂():也称安瓿剂(),是供注射用的灭菌是供注射用的灭菌或灭菌混悬液。有的药物在溶液中不稳定,则以其灭菌粉末封装于安瓿中(通常成粉针剂),临用时配成溶液。如青霉素钠盐。煎剂():是单味或复方中草药用水煎煮的煎出液,多数为新鲜制备。合剂():是多种药物配制成的透明或混悬的水性液体制剂,供内服。如复方甘草合剂。混悬的合剂在瓶签上应注明“用时振摇”字样。系指将中药用白酒(~℃)浸出的液体制剂。糖浆剂():为含有药物的,或不含药物的蔗糖近饱和水溶液,供内服。不含药物的糖浆成单糖浆,作为矫味用。流浸膏剂():将生药用适当溶剂浸出其有效成分后,再将浸出液低温浓缩,除特别规定外,每毫升相当于原生药。如甘草流浸膏。洗剂():主要是指含有不溶性药物粉末的混悬液,专供外用。如炉甘石洗剂。()固体制剂片剂():是将药粉加在赋刑剂经压制而成的小圆片。每片含有一定的药量,由于片剂在制造、分发和服用等方面都很方便,使临床应用最多的一种剂型。有些苦味或易氧化的药物,常在片剂外包一层糖衣,称糖衣片。此外,有些对胃粘膜有刺激性,或易被胃液破坏的药物,可在片剂外包一层耐酸的肠溶包衣,能完整的通过胃腔到达肠内才崩解,称肠溶片。丸剂():通常称丸药,是将中草药细粉(目以上)加适当粘合剂(蜂蜜、水、米糊或面糊)制成小球形,内服。如银翘解毒丸、六神丸等。散剂():又称粉剂。为一种药物或多种药物均匀混合而成的粉末状制剂,供内服或外用。易潮解的药物不宜做成散剂。冲剂:以中草药为原料,制成颗粒性散剂(),临用时加水冲服,故称为冲剂。冲剂使用方便,又便于保存和运输,如板蓝根冲剂。胶囊剂两种。硬胶囊剂一般内装固体药物,而软胶囊剂通常装液体药物,呈球形或椭圆形,又称胶丸。如鱼肝油胶丸。()软性剂型(半固体剂型)软膏剂():是指药物加入任何基质(如凡士林、羊毛脂等)中均匀混合而成的半固体外用制剂。另有一种专攻眼科用的极为细腻的软膏,称眼膏剂。栓剂剂为圆锥型,重约;阴道栓剂为椭圆形或球形,重约。常用的基质有甘油、明胶和柯柯豆脂,起熔点接近体温,室温时保持固态,产入腔道后可渐渐熔化。浸膏():是生药用适当溶剂浸出起有效成分后,再将浸出液浓缩成粉状或膏状固体剂型。除特别规定外,每克浸膏的浓度相当于原生药的~。如当归浸膏、颠茄浸膏等。二、处方人负责的书面文件。医师药正确的写明药物制剂及其用量和用法,药师则应根据厨房准确的调剂和发药,若发生差错,对病人的健康可能造成严重的损害。.处方的结构 一般医疗单位都印有处方笺,便于应用和保存。完整的处方结构可分为六部分:()处方前项 包括病人姓名、性别、年龄和处方日期等。()处方头 处方都.(或)开头,.是拉丁文(请取)的缩写表示取下列数量的药剂。()处方正文 包括药物名称、剂型、规格和用量。如果一张处方有数种药,则每一种药物均应另起一行写。()配制法 包括药物的调配方法和要求的剂型(简单处方无此项)。()用法“用药方法”通常以.或(拉丁文的缩写)表示。包括一次用量、给药次数、给药时间、给药途径等。()医师签名 处方完毕应仔细看一遍,保证无误后才签名交给病处方举例:处 方 笺前项: 姓名陈刚 性别男 年龄 门诊住址前进路号 年月日处方头:配制法:用 法: .签 名:医师:陈红.书写处方的注意事项()要求字迹清楚,不要涂改。如有涂改,医师需再涂改处签名。()药物剂量单位一律采用药典规定的公制。凡固体或半固体药物以为单位、液体药物以为单位的,或可省略不写。如果用、或则必须写明。药量小数点必须写准确,小数点前如无整数,必须加零,如;整数后如无小数,也必须加小数点和零,如,以免错误。()总量以开三天量为宜,七天量为限(慢性病或特殊情况可适当增加)剧药总量一般不超过二日极量。如果病情特殊需要的可以不受此限,但医师再剂量旁边加惊叹号,如!,并在此另行签名以示负责。()拉丁文处方时,药名字尾应写第二格。亦可书写英文药名及处方。()用法必须书写清楚。可用拉丁文缩写字或中文书写。.处方类型完整处方 医师根据病情需要开写比较复杂的处方药物可以包括主药佐药赋形药和矫味药等并提出配制法和剂型的要求。处方举例:. .磷酸可待因氯化铵糖浆蒸馏水加至混合制成合剂用法:每日三次,每次. .氧化锌滑石粉凡士林混合制成糊剂.外用 用法:外用()简化处方 适用于书写已经制成各种剂型的药物,现在多用。其中片剂、胶囊剂、注射剂的共同格为:.药物及剂型名称 单量×总数(片、支等用法:每次用量,每天几次,给药途径等。内服用溶液剂、合剂、糖浆剂、酊剂以及外用的软膏剂等,其共同格式为:.药物及剂型名称用法:每次用量,每天几次(或外用)浓度和总量.. ×黄连素片×.. . 用法:每天一片,每日三次. .. 万× 青霉素注射剂 万×. .氯化钾溶液. . 用法:每日三次,每次. .颠茄合剂. . 用法:每日三次,每次. .. 醋酸地塞米松软膏. 外用 用法:外用处方举例:. .. 复方阿司匹林片#. 用法:每日三次,每次一片. .. . 胃舒平片#. 用法:每日三次,每次三片表处方中常见拉丁文简缩写表药表处方中常见拉丁文简缩写表药安瓿剂剂滴物胶囊剂量克剂浸膏单国际单位型注射剂
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