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文档简介
1、怎样确定双向复制是
[答]
3H-胸腺嘧啶核苷标记大肠杆
2、DNA
[答]
DNA;同时发现如果加入
引物再加利福平,DNA
答]
3.4nm(或
3.4×10-3μm)含有
含有:1100×10╱3.4×10-3≈3.24×106(核苷酸对)4、若使
DNA,并用平衡沉降法测定
14N-15N
答]
14N-15N
14N-DNA
14N-15N
3:1,所以
14N-DNA
14N-15N
3:1。5、DNA
[答](1)DNA
III、DNA
DNA,RNA
RNA,以
聚合酶;RNA
RNA,以
6、真核生物
[答]
3′聚合酶活性,DNA
DNA,DNA
用,DNA
7、要说明原核生物的转录过程。答]
个阶段。RNA
合的部位,DNA
2~9
[答]
般序列的结合常数和停留时间。RNA
45SrRNA
tRNA,5SrRNA
9、真核生物三类启动子各有何结构特点?[答]
SL1
10、细胞内至少要有几种
[答]
tRNA,但事实上绝大多数细胞内只有
tRNA,线粒体中只有
11、 [答]
分:核糖体、各种tRNA、各种氨酰-tRNA
以及终止释放因子、GTP、ATP、20
12、简述原核细胞和真核生物蛋白质合成的主要区别(青岛海洋大学
[答]
真核生物的肽链合成是从甲硫氨酰-tRNA
ATP,
(7(813、在原核细胞中高效表达真核细胞的基因要注意哪些问题?[答]
(4
(414、
一组,不间断地连续读下去,直到出现终止密码为止。mRNA
2~4
如丙氨酰-
A、C
不代表终止密码子,而代表色氨酸;CUA
U,则第一位和第三位不论怎么变化,其编码的氨基酸总是疏水性的,如第二位是C,
C,第二位是
15、一基因的编码序列中发生了一个碱基的突变,那么这个基因的表达产物在结构上、功16、如果
[答]
17、原核生物与真核生物翻译起始阶段有何异同?[答]
(4
tRNA(不需甲
序列;mRNA
种类少(3
fmet-
结合,rps-1
辩认识别序列;小亚基与起始氨酰-tRNA
18、原核生物的肽链延长需要哪三种蛋白质因子参与?它们各自有何功能?[答]
EF-Tu、EF-Ts
上的密码子指导的氨酰-
外的所有氨酰-
tRNA。EF-Ts
基-tRNA
19、尽管
[答]
GTP,并且有
个氨基酸残基组成的大肠杆菌某蛋白时需水解多少个磷酸酐键?(2)[答]
(1)在蛋白质的合成中,每个氨基酸的活化伴随着两个磷酸酐键的水解。活化反应由氨酰-tRNA
ATP。因此,合成含600
21、肽链合成后的加工修饰有哪些途径?[答]
Met,切除信号肽,23、简述干扰素抑制病毒繁殖的机制。[答]
(1)干扰素与双链
24、为什么翻译能被一段与
RNA)抑制?[答]
RNA。由于互补的反义
答](1)真核生物以正调控为主的必要性与优越性如下:
90%基因的阻遏蛋白;若采用正调控,只需要合成10%基因的反式作用因子,这显然是经济合理的调控方式。(2)原核生物为负调控的必要性与优越性如下:原核生物基因组小,基因少,简单,生命26、一个基因如何产生多种不同类型的
[答]
mRNA。第二种是:如
mRNA。此外,RNA
mRNA。[答]
28、什么是基因组文库(genomic
library)?构建基因组文库涉及哪些基本过程?它同遗传[答]
(1
(1
(5)将重组
上的基因库是完全不同的概念。基因库(gene
pool)是指在进行有性生殖的某一群体中,29、举例说明基因表达的诱导与阻遏,正调控与负调控。[答]
30、在
[答](1)在操纵基因中所发生的大多数突变都会导致阻遏蛋白同操纵基因的结合能力减弱31、概述原核生物基因表达调控的特点。[答]
32、概述真核生物基因组的特点。
右的基因,90%以上的
33、简答真核生物基因表达的调控方式。[答](1)DNA
水平的调控:a.基因丢失,即
。c.DNA
白各编码区的连接。d.染色质结构的变化,通过异染色质关闭某些基因的表达。e.DNA
。a.染色质的活化,
(3
(3a.mRNA
5′端加帽、3′端加尾、拼接、修饰、编辑等。B.mRNA
(4
的稳定。b.反义
(5
b.氨基酸的重排,如
时,氨基酸序列大幅度地被剪接重排。c.通过肽链的断裂等的加工方式34、真核生物基因转录的调控因子有哪些重要的结构模体?[答]
构模体,常见的结构模体有螺旋-转角-螺旋、锌指结构、亮氨酸拉链、螺旋-环-螺旋等。35、在基因克隆中,目的基因有哪些主要来源?
(2
DNA:利用限制性核酸内切酶将染色体
cDNA:提取mRNA,利用反转录酶合成与其互补的
DNA(cDNA)分子,再复制成双链
36、用于
[答]
1~2
(2
(2
DNA,容纳外源
37、什么是
[答]
cloning)是指含有单一
38、原核表达载体应具备哪些基本的结构元件?[答]
39、概述筛选和鉴定
[答]
b.插入失活法:将目
重组子导入亮氨酸异养型(Leu-)的宿主细胞后,在不含
题)也是一种标志补救选择方法。d.酶切图谱筛选:分别挑取独立的菌落,培养后快速提取重组体DNA,用重组时所采用的限制酶
性克隆。e.核酸杂交筛选:将转化子
(2
(240、为什么蓝白斑选择法有时会出现假阳性?[答]
41、将重组
[答]
(1)将重组质粒导入原核细胞称转化,通常用氯化钙法使大肠杆菌细胞处于感受态,
导入细胞。另一个常用方法是用脉冲高压电瞬间处理,使外源DNA
导入细胞,称为电穿孔法。(2)将重组体
技术,电穿孔转染技术,脂质体载体法,DEAE-葡聚糖转染技术,显微注射法等。将外源
Ti
42、分析蛋白质融合表达和非融合表达的利弊。[答]
(1)外源基因的活性蛋白质第一个氨基酸可能不是甲硫氨酸,表达融合蛋白有利于肽
43、概述基因定点诱变的常用方法。[答]
(2
44、什么是蛋白质工程?举例说明蛋白质工程的意义。[答]
Lys,使其与
45、如何区分相对分子质量相同的单链
RNA?
RNA,含有
46、
变性?DNA
[答]
(1
(6
(6
其[
]=150。当
[答]
2′-OH
3′-OH
5′-OH
48、何谓
Tm?影响
[答]
温度,melting
含量越高,Tm
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