可溶性淀粉合成酶（SSS）活性检测试剂盒说明书-紫外分光光度法UPLC-MS-4161

电话：400-998-2324邮箱：service_uplc_ms@163.com网址：本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！-上海液质检测技术有限公司第第页可溶性淀粉合成酶（SSS）活性检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。货号：UPLC-MS-4161规格：25T/24S、50T/48S

紫外分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。试剂名称25T规格50T规格保存条件提取液液体30mL×1瓶液体60mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体10mL×1瓶液体16mL×1瓶2-8℃保存试剂二A粉剂×1瓶粉剂×2瓶2-8℃保存试剂二B粉剂×1支粉剂×2支-20℃保存试剂二C粉剂×1支粉剂×2支-20℃保存试剂三A液体5mL×1瓶液体12mL×1瓶2-8℃保存试剂三B粉剂×1支粉剂×2瓶-20℃保存试剂四液体16μL×1支液体30μL×1支2-8℃保存试剂五A液体8mL×1瓶液体18mL×1瓶2-8℃保存试剂五B粉剂×1瓶粉剂×2瓶2-8℃保存试剂五C粉剂×1支粉剂×2支2-8℃保存试剂六粉剂×2支粉剂×4支-20℃保存试剂七粉剂×1支粉剂×1支-20℃保存25T溶液的配制：11瓶试剂二A8mLB和试剂二C-20℃22、试剂三：临用前试剂三B加入试剂三A溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融。3、7L2.24L约1T4试剂五：BCA-20℃45试剂六：1208μL-20℃2周，避免反复冻融。6、试剂七：临用前加入2mL蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存8周，避免反复冻融。50T溶液的配制：11瓶试剂二A8mL1B1C-20℃221B5mLA-20℃43、13L4.6L约2T也可根据样本量按比例配制。41B8mLA1C-20℃451208μL-20℃2周，避免反复冻融。6、试剂七：临用前加入2mL蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存8周，避免反复冻融。产品说明：SSS（EC1）通常以游离态存在于质体基质中，催化淀粉链延长，主要负责支链淀粉的合成。SSS催化ADPG（6-NADP+NADPH，NADPH步反应中ADP340nmNADPHSSSADP-Glucose+StarchPrimer

ADP+Starch

PyruvicAcid+ATPD-Glucose+ATP

HK G-6-P+ADPG-6-P+NADP+

G6PDH

Gluconate+NADPH(340nm)2-3紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）粗酶液制备：称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。10000g，4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。二、测定步骤30min340nmEP试剂名称（μL）测定管样本200试剂二270混匀，30℃20min1min（）试剂四150混匀，30℃30min1min（）10000g10min37℃上清液450试剂五300试剂六15试剂七15混匀后立即在340nm波长下记录初始吸光度A1和2min后的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。注意：试剂二如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混匀。三、SSS活性计算1、按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。SSS活性（U/mgprot）=[ΔA÷（ε×d）×V测]÷(Cpr×V样本÷V反总×V上清)÷T=43.2×ΔA÷Cpr此法需要自行测定粗酶液蛋白质浓度。2、按照样本质量计算：单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟催化产生1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。SSS（U