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文档简介

大肠杆菌及其检验一、大肠杆菌的生物学特性

1、简介大肠埃希氏菌习惯称为大肠杆菌，分类于肠杆菌科，归属于埃希氏菌属，大肠杆菌为人和动物肠道中的常居菌，一般多不致病，在一定条件下可引起肠道外感染。2、形态与染色大小0.4～0.7×1～3um,无芽胞,大多数菌株有动力。有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖类包膜，革兰氏阴性杆菌（1）光滑型

（2）粗糙型4、生化反应

大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。5、抗原构造

比较复杂，主要由菌体O抗原、鞭毛H抗原、夹膜K抗原组成。6、抵抗力

该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中存活更久。二、致泻性大肠杆菌简介

某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，与人类疾病有关的大肠杆菌，统称为致泻性大肠杆菌（enterovirulent

E.coli）。

三、大肠杆菌的检验方法

1、样品制备以无菌操作取25g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000r/min均质1～2min,制成1:10样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替)。从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过15min。

2、LST和EC初步筛选

对每个样品,选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤,每管接种1mL。将接种管置于36±1℃培养48±2h。观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生,用直径为3mm的接种环将所有48±2h内产气的LST肉汤管培养物移种于EC肉汤管中。将所有接种的EC肉汤管在30min内放入带盖44.5±0.5℃水浴箱内,培养48±2h。4、生化试验1）靛基质试验2）MR-VP试验3）柠檬酸利用试验

5、结果报告大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢杆菌,发酵乳糖产酸产气,生化试验为＋＋－－或－＋－－，再根据LST肉汤阳性管数查MPN表,报告每克(毫升)样品中大肠杆菌MPN值。

四、致泻性大肠杆菌的检验

1、增菌以无菌手续称取检验25g，加在225mL营养肉汤中，以均质器打碎1min或用乳钵加灭菌砂磨碎。挑取1环，接种于1管30mL肠道菌增菌肉汤内，于42℃培养18h。2、分离3、生化试验1）三糖铁琼脂(TSI)2）靛基质3）半固体4）pH7.2尿素琼脂5）

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