动物细胞融合和单克隆抗体终极版

关于动物细胞融合和单克隆抗体终极版第一页，共二十七页，2022年，8月28日动物细胞融合和单克隆抗体第二页，共二十七页，2022年，8月28日一、动物细胞融合（别名：细胞杂交）1.概念：

是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。

融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。第三页，共二十七页，2022年，8月28日2.过程：、动物细胞融合的基本原理是什么？、动物细胞融合的诱导方式是什么？与植物细胞融合的诱导方式有什么不同？第四页，共二十七页，2022年，8月28日不同DNA的两个细胞融合有丝分裂两个完整的杂交细胞灭活的病毒？这是什么？？用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程2.过程：第五页，共二十七页，2022年，8月28日⑴.原理：与植物原生质体融合的基本原理相同，即细胞膜的流动性。⑵.诱导方式：物理法：电激、振动、离心化学法：聚乙二醇（PEG）生物法：灭活的病毒例如：仙台病毒第六页，共二十七页，2022年，8月28日打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；重要用途：制备单克隆抗体。3.意义和应用：第七页，共二十七页，2022年，8月28日三、单克隆抗体1、抗体是由何种细胞产生的？浆细胞（效应B细胞）2、抗体是如何产生的？B淋巴细胞抗原增殖分化成浆细胞3、一种浆细胞能产生几种抗体？一种知识回顾第八页，共二十七页，2022年，8月28日思考：1、传统的方法得到的抗体具有什么特点？特异性差、产量和纯度都很低。第九页，共二十七页，2022年，8月28日二、单克隆抗体1.概念：

由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。

特点：

特异性强、灵敏度高

第十页，共二十七页，2022年，8月28日思考：1、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？不可能2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？癌细胞3、你认为有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？细胞融合第十一页，共二十七页，2022年，8月28日一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖杂种细胞动物细胞培养技术２、实验原理：动物细胞融合创始人：米尔斯坦单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量繁殖柯勒第十二页，共二十七页，2022年，8月28日2.制备过程：诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点注射抗原的目的是什么为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法第十三页，共二十七页，2022年，8月28日第十四页，共二十七页，2022年，8月28日考考你！1.在制备单克隆抗体的过程中，选用哪两种细胞进行融合？为什么选择这两种细胞？浆细胞和骨髓瘤细胞浆细胞能产生单一抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生单一抗体。第十五页，共二十七页，2022年，8月28日考考你！2、在这过程中进行了几次筛选？分别在哪个步骤进行筛选？两次筛选。第一次在B细胞和骨髓瘤细胞融合以后筛选出杂交瘤细胞；第二次在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。第十六页，共二十七页，2022年，8月28日三、单克隆抗体的应用请同学们根据自己所收集的资料，谈谈单克隆抗体的应用。１、可用于作为诊断试剂２、可用于疾病治疗３、可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的“生物导弹“。）“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物第十七页，共二十七页，2022年，8月28日小结第十八页，共二十七页，2022年，8月28日

细胞骨髓瘤细胞细胞融合

浆筛选

瘤细胞

杂交细胞培养选出能产生特定抗体的细胞群继续培养体外培养

体内培养从培养液或小鼠腹水中取出

单克隆抗体第十九页，共二十七页，2022年，8月28日练习：1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是（）A、融合的原理B、融合的优点C、融合的诱导手段D、融合的过程第二十页，共二十七页，2022年，8月28日练习：2、动物细胞融合的目的中最重要的是（）A、克服远缘杂交不亲和B、制备单克隆抗体C、培育新物种D、生产杂种细胞第二十一页，共二十七页，2022年，8月28日练习：3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A、经过免疫的B淋巴细胞B、不经过免疫的T淋巴细胞C、经过免疫的T淋巴细胞D、不经过免疫的B淋巴细胞第二十二页，共二十七页，2022年，8月28日练习：4.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融

合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞

⑤杂交瘤细胞

A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③第二十三页，共二十七页，2022年，8月28日练习：5、(2006，广雅中学考题)研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C．抗癌物质在克隆细胞中大量合成D．单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合第二十四页，共二十七页，2022年，8月28日练习：6．只能使动物细胞融合的常用诱导方法（）A．PEG

B．灭活的病毒C．电刺激D．离心7、“生物导弹”是指（）A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单抗上连接抗癌药物第二十五页，共二十七页，2022年，8月28日练习：8、（多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是（）A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不

需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B．融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又