贫血其他检查课件

第二节贫血的其它检查精选ppt1第二节贫血的其它检查精选ppt1内容网织红细胞计数红细胞比积及相关数值测定

●

红细胞比积（Hct）●平均红细胞体积（MCV）

●

平均红细胞血红蛋白含量（MCH）

●

平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）溶血性贫血

●

红细胞渗透脆性试验

●酸溶血试验(Hma,stest)

●

抗人球蛋白试验(Coomb,stest)

●尿内含铁血黄素检查(Roustest)

精选ppt2内容网织红细胞计数精选ppt2一、网织红细胞计数

（reticulocytecount）(一)原理

网织红细胞晚幼红细胞

成熟的红细胞,

精选ppt3一、网织红细胞计数

（reticulocytec网织红细胞

（reticulocytecount）

精选ppt4网织红细胞

（reticulocytecount）

精选(二)方法

活体染色法.近年来还可通过某些血液自动分析仪及流式细胞术检测法进行网织红细胞计数。

★(三)参考值(活体染色法)成人0.5%~1.5%新生儿2%~6%网织红细胞绝对值(24~84)×109/L

精选ppt5(二)方法活体染色法.近年来还可通过某些

★（四）临床意义

直接反应骨髓造血功能

疗效观察的指标

反映骨髓增生或重建情况增高●

溶血性贫血●缺铁性贫血●巨幼细胞性贫血减低

●

再生障碍性贫血精选ppt6★（四）临床意义

直接反应骨髓造血功能

疗二、红细胞比积

（hemotocrit，HT，Hct）(一)原理

将定量的经双草酸盐抗凝全血灌注于

Wintrobe分血管中，以一定的速度和时间离心沉淀后，读取红细胞层在全血中所占体积的百分比。(二)方法

温氏法

精选ppt7二、红细胞比积

（hemotoc二、红细胞比积

（三）参考值

成人男性40~50％成人女性37~48％精选ppt8二、红细胞比积

（三）参考值精选p（四）临床意义增加

■相对：血液浓缩

■绝对：真性红细胞增多症减少各种贫血

■Hct改变与RBC数不一定完全平行

■计算RBC各项平均值才有意义精选ppt9（四）临床意义增加精选ppt9三、红细胞平均数值计算(一)原理

根据红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比积，通过公式可分别计算出下列红细胞平均数值，多参数血液自动分析仪可直接获得此类参数。

(二)计算方法及参考值

精选ppt10三、红细胞平均数值计算(一)原理根据红细胞计数、血平均红细胞体积（MCV：80~100fL）指每个红细胞的平均体积，以飞升(fl)为单位。

Hct（L/L）

MCV=×1015fLRBC（×1012/L）平均红细胞Hb含量（MCH：26~34pg）指每个红细胞内所含有的血红蛋白的平均量，以皮克(pg)为单位。

Hb（g/L）

MCH=pgRBC（×1012/L）精选ppt11平均红细胞体积（MCV：80~100fL）指每个红细胞的平

平均红细胞Hb浓度（MCHC：310~70g/L）指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度，以克/升(g/L)表示。

Hb（g/L）

MCHC=g/L

Hct（L/L）

临床意义

根据MCV、MCH、MCHC测定可对贫血进行形态学分类，并对其鉴别诊断也有一定意义。既：有助于贫血形态学分类选择合理治疗方案精选ppt12

平均红细胞Hb浓度（MCHC：310~70g/L）指平均贫血的形态学分类鉴别表

细胞形态学MCVMCHMCHC病因

参考值

80-100fL26-34pg310-370g/L大细胞性贫血↑↑-巨幼细胞性贫血正常细胞性贫血

---急性失血、溶贫再障、白血病小细胞性贫血↓↓-感染、中毒恶性肿瘤小细胞低色素↓↓↓缺铁性贫血慢性失血精选ppt13贫血的形态学分类鉴别表细胞形态学MCV四、溶血性贫血的实验室检查精选ppt14四、溶血性贫血的实验室检查精选ppt14精选ppt15精选ppt15(一)溶血性贫血的实验诊断步骤HA的诊断一般分为四个步骤：确定有无贫血明确溶血的存在判定溶血部位查明溶血原因★精选ppt16(一)溶血性贫血的实验诊断步骤★精选ppt16(一)溶血性贫血的实验诊断步骤1.确定有无贫血若红细胞数量、血红蛋白浓度、红细胞比积低于参考值的下限则为贫血。

精选ppt17(一)溶血性贫血的实验诊断步骤1.确定有无贫血精选ppt172.明确溶血的存在（1）红细胞破坏增加血液中网织红细胞显著增多血浆游离血红蛋白含量增高肝珠蛋白含量减低血清间接胆红素增高尿胆原含量增高

精选ppt182.明确溶血的存在（1）红细胞破坏增加精选ppt182.明确溶血的存在（2）骨髓红系细胞高度代偿性增生骨髓有核细胞增生明显活跃,粒红比值明显减低或倒置，红系以中、晚幼红细胞增生为主，原红和早幼红细胞亦增多，可见染色质小体(Howell-jolly小体)、Cabot环及核分裂幼红细胞增多。血涂片中红细胞形态异常，出现嗜多色性红细胞和幼红细胞等。

精选ppt192.明确溶血的存在精选ppt19骨髓增生程度和粒红比成熟红细胞：有核细胞极度活跃1：1明显活跃10：1活跃20：1减低50：1极度减低200：1粒红比粒细胞各阶段细胞总和与各阶段红细胞总和之比正常3：1精选ppt20骨髓增生程度和粒红比成熟红细胞：有核细胞精选ppt20（粒、红比）M:E正常2：1-4：1

1、粒、红比正常：M-E-正常2、M:E↑M↑E-：化脓、粒细胞白血病

M-E-ITPM-E↓：纯红再障

M↑E↑：红白血病

M↓E↓：再障↓3、M:E↓或倒置：M-E↑：各种增生性贫血、巨幼红细胞性贫血、真红；

M↓↓E-：粒细胞缺乏症。精选ppt21（粒、红比）M:E正常2：1-4：1

1、粒、红比正常：M各系统骨髓细胞量和质的改变1、粒系：原粒、早幼粒↑↑、形态改变—急粒早、中、晚幼↑↑、嗜酸↑--慢粒中性中、晚幼、杆状↑WBC中毒变化—感染粒系↓↓--粒缺精选ppt22各系统骨髓细胞量和质的改变1、粒系：精选ppt222、红系各阶段成比例↑--溶贫、失血贫↑↑伴胞浆发育落后于胞核—缺铁贫↑↑伴巨幼红细胞出现—营养性巨幼红细胞贫血↓↓伴余二系↓↓--再障精选ppt232、红系各阶段成比例↑--溶贫、失血贫精选ppt233、淋巴系原淋或幼淋↑↑--急淋相对↑、其他系↓↓--再障↑↑--慢淋精选ppt243、淋巴系原淋或幼淋↑↑--急淋精选ppt244、单核系原单/幼单↑↑--单核细胞型白血病单核C↑--慢性感染（结核）精选ppt254、单核系原单/幼单↑↑--单核细胞型白血病精选ppt25巨核C系↑--ITP、脾亢↓/---再障精选ppt26巨核C系↑--ITP、脾亢精选ppt266、浆C、网C浆C系↑--再障、结核浆C系↑↑、形态改变—骨髓瘤、浆细胞性白血病网C↑↑、形态改变—恶网网C↑--感染、溶贫、再障精选ppt276、浆C、网C浆C系↑--再障、结核精选ppt273.判定溶血部位

血管内溶血血管外溶血

精选ppt283.判定溶血部位

血管内溶血精选ppt284.查明溶血的原因HA的原因较复杂一般先做常用的筛选试验，如红细胞形态观察红细胞渗透脆性试验抗人球蛋白试验蔗糖水溶血试验血红蛋白电泳根据筛选试验结果再选择适当的确诊试验,

绝大部分患者的HA原因可以查明。精选ppt294.查明溶血的原因HA的原因较复杂精选ppt29（二）溶血性贫血的分类遗传性红细胞膜异常红细胞酶异常珠蛋白合成异常获得性机械性理化及生物因素免疫性单核-巨噬系统破坏按病因和发病机制分：精选ppt30（二）溶血性贫血的分类遗传性按病因和发病机制分：精选ppt3（二）溶血性贫血的分类血管内血管外按溶血的部位分：精选ppt31（二）溶血性贫血的分类血管内按溶血的部位分：精选ppt31按溶血发生的部位分红细胞破坏发生于血循环中—血管内溶血。临床表现明显，伴有血红蛋白血症、血红蛋白尿、含铁血黄素尿；红细胞破坏发生于单核-巨噬细胞系统—血管外溶血。主要发生于脾脏，临床表现一般较轻。精选ppt32按溶血发生的部位分红细胞破坏发生于血循环中—血管内溶血。临床血管内溶血与血管外溶血的鉴别检查项目血管内溶血血管外溶血红细胞形态异常-～+++～+++血浆游离血红蛋白+～+++-～+高铁血红素白蛋白+-尿Rous试验+～++-血红蛋白尿-～+++-红细胞渗透脆性试验-++精选ppt33血管内溶血与血管外溶血的鉴别检查项目血管内溶血血管外溶血红细(三)溶血性贫血确诊的实验室检查1.显示红细胞破坏增加的依据(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞寿命测定红细胞形态改变血浆乳酸脱氢酶测定(2)血浆游离血红蛋白增高的检查血浆游离血红蛋白测定血清珠蛋白测定血浆高铁血红素白蛋白测定血红蛋白尿检验含铁血黄素尿试验(Rous试验)（3）胆红素代谢异常的表现精选ppt34(三)溶血性贫血确诊的实验室检查1.显示红细胞破坏增加的依据(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞寿命测定：用51Cr标记红细胞测定其半衰期（T1/2）正常25～32天溶贫﹤15天精选ppt35(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验精选ppt35(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞形态改变可见红细胞破坏的征象精选ppt36(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验精选ppt36(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验血浆乳酸脱氢酶测定

红细胞破坏乳酸脱氢酶精选ppt37(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验精选ppt37(三)溶血性贫血确诊的实验室检查(2).血浆游离血红蛋白增高的检查血浆游离血红蛋白测定血清珠蛋白测定血浆高铁血红素白蛋白测定血红蛋白尿检验含铁血黄素尿试验(Rous试验)精选ppt38(三)溶血性贫血确诊的实验室检查(2).血浆游离血红蛋白增高血浆游离血红蛋白测定原理：游离血红蛋白中血红素部分有类似过氧化物酶的作用，能使邻甲苯胺氧化显色，与已知血红蛋白浓度的标准液比较而求得其含量。标本采集：用肝素或EDTA抗凝血均可。参考值：<40mg/L。精选ppt39血浆游离血红蛋白测定精选ppt39血浆游离血红蛋白测定临床意义

(1)增高血管内溶血如阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)、阵发性寒冷性血红蛋白尿症、冷凝集素综合征、温抗体型自身免疫性溶血性贫血、行军性血红蛋白尿症、微血管病性溶血性贫血等。

(2)血管外溶血正常

如遗传性球形细胞增多症等。

精选ppt40血浆游离血红蛋白测定临床意义

(1)增高血管内溶血血清珠蛋白测定

原理：珠蛋白(haptoglobin，Hp)是肝脏合成的一种a2巨球蛋白，能与血红蛋白(Hb)结合成一稳定的Hb-Hp复合物，后者在pH4的酸性条件下，具有过氧化物酶活性，可催化H2O2分解，使愈创木酚氧化显色，其颜色的深浅与Hp含量成正比。血清中Hp的含量是以Hb的结合量来表示的，即以mgHb/L表示。

参考值：200～1900mgHb/L。精选ppt41血清珠蛋白测定原理：珠蛋白(haptoglobin，Hp)血清珠蛋白测定

临床意义（血管内、血管外）各种HAHp明显减低但肝细胞损伤性病变、传染性单核细胞增多症，先天性无Hp血症等Hp亦见降低。感染、创伤、肿瘤、红斑狼疮、类固酵治疗、肝外阻塞性黄疸时可增高。故在此种情况下，如Hp不减低，并不能排除溶血。

精选ppt42血清珠蛋白测定精选ppt42血浆高铁血红素白蛋白测定

原理：当溶血较重使Hp耗尽时，可出现高铁血红素白蛋白，电泳时出现在Hb-Hp区带之前。标本采集：静脉血凝固后分离血清。参考值：正常人为阴性。临床意义：阳性表示严重血管内溶血精选ppt43血浆高铁血红素白蛋白测定

原理：当溶血较重使Hp耗尽时，可血红蛋白尿检验

临床意义：阳性表示血管内溶血精选ppt44血红蛋白尿检验

精选ppt44★含铁血黄素尿试验(Rous试验)

原理：尿中含铁血黄素在酸性条件下与亚铁氰化钾形成亚铁氰化铁而呈蓝色。标本采集：将尿液离心后取沉渣染色。参考值：正常人为阴性。精选ppt45★含铁血黄素尿试验(Rous试验)

原理：尿中含铁血黄素在★含铁血黄素尿试验(Rous试验)

临床意义阳性血管内溶血特别是慢性血管内溶血时易出现，并可持续数周。

阴性并不能除外血管内溶血。因溶血初期，肾小管上皮细胞尚未充分将吸收的Hb转变为含铁血黄素，未形成足够大的颗粒(直径>1mm才能在光镜下检出)，含有含铁血黄素的上皮细胞的未完成其衰老脱落的过程等均可呈阴性反应，必要时反复检查或取晨尿、午睡后的尿液进行检查。精选ppt46★含铁血黄素尿试验(Rous试验)

精选ppt46（3）胆红素代谢异常的表现血非结合胆红素尿中的尿胆原

尿胆红素（—）精选ppt47（3）胆红素代谢异常的表现血非结合胆红素精选ppt47(三)溶血性贫血确诊的实验室检查2.显示红细胞代偿增加的依据(1)外周血网织红细胞明显增高(2)外周血涂片红细胞形态改变(3)增生性贫血骨髓象精选ppt48(三)溶血性贫血确诊的实验室检查2.显示红细胞代偿增加的依据(四)溶血性贫血的病因诊断

精选ppt49(四)溶血性贫血的病因诊断

精选ppt49溶血性贫血病因红细胞内在缺陷—遗传性溶血：红细胞膜缺陷红细胞酶缺陷珠蛋白异常红细胞外部因素异常：免疫因素（患者产生红细胞抗体）非免疫因素（人工瓣膜置换术、蛇毒、疟原虫）精选ppt50溶血性贫血病因红细胞内在缺陷—遗传性溶血：精选ppt501.红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷主要是指膜成分或膜支架结构异常,导致红细胞表面积与体积比、可塑性及脆性等改变，有的还伴有红细胞形态异常而易于破裂导致溶血性贫血。膜成分异常主要是指脂质和膜支架结构的异常，常见的是收缩蛋白(区带Ⅰ、Ⅱ)、肌动蛋白(区带Ⅴ)及区带Ⅳ-1蛋白的磷酸化或相互结合障碍,不能形成牢固的膜骨骼。针对红细胞膜缺陷常用的筛选试验是测定红细胞在各种实验条件下抗溶解的能力，若通过生化方法直接测定膜成分的异常,则更为准确而特异。精选ppt511.红细胞膜缺陷的检验精选ppt51（1）.红细胞渗透脆性试验（2）.温孵育后渗透脆性试验（3）.自身溶血试验及其纠正试验（4）.酸溶血试验（5）.蔗糖水溶血试验★1.红细胞膜缺陷的检验精选ppt52（1）.红细胞渗透脆性试验★1.红细胞膜缺陷的检验精选ppt（1）红细胞渗透脆性试验(red-cellosmoticfragilitytest,ROFT)原理：正常红细胞为双凹圆盘状,在低渗盐水中吸水膨胀的适应性较大(可增加70%的体积而不破裂)。遗传性球形细胞增多症(HS)等红细胞的表面积/体积(S/V)的比值小,对低渗盐水的适应性小(脆性增大)。本试验是测定红细胞在一系列不同浓度低渗氯化钠盐水内开始溶血和完全溶血的氯化钠浓度。标本采集：用肝素抗凝血,也可取静脉血立即测定。精选ppt53（1）红细胞渗透脆性试验(red-cellosmotic红细胞脆性实验脆性增高开始溶血及完全溶血时氯化钠溶液的浓度均较正常对照提前两管（0.04%）或更高，即开始溶血﹥0.50%,完全溶血﹥0.38%NaCl时为脆性增高，即红细胞对低渗NaCl溶血的抵抗力减低；脆性减低即红细胞对低渗NaCl溶血的抵抗力增高；精选ppt54红细胞脆性实验脆性增高开始溶血及完全溶血时氯化钠溶液的浓参考值：开始溶血4.2~4.6g/LNaCl

完全溶血2.8~3.4g/LNaCl意义

↑：遗传性球形RBC增多症自身免疫性溶血性贫血

↓：低色素性贫血(IDA，地中海贫血)精选ppt55精选ppt55温孵育渗透脆性试验红细胞孵育过程中，葡萄糖消耗增加，储备的ATP减少→红细胞对阳离子的主动传递受阻，钠离子在红细胞内集聚，细胞膨胀→渗透脆性增加。精选ppt56温孵育渗透脆性试验红细胞孵育过程中，葡萄糖消耗增加，储备的A（2）温孵育后渗透脆性试验

原理略意义：正常人轻度增加轻症遗传性球形RBC增多症丙酮酸激酶缺陷症精选ppt57（2）温孵育后渗透脆性试验

原理略精选ppt57自身溶血试验及纠正试验先天性非球形细胞性溶血性贫血病人，由于红细胞内酶缺陷，葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP以维持红细胞内的钠泵作用。病人红细胞无菌条件下在自身血浆中温育48h，使ATP储备减少，钠泵作用减弱导致溶血增强。在孵育过程中分别加入葡萄糖、ATP作为纠正物，并以氯化钠溶液对照，观察溶血是否被纠正。遗传球：明显纠正Ⅰ型先天型性非球（G-6PD缺陷症）加葡萄糖、ATP—均可纠正Ⅱ型先天型性非球（丙酮酸激酶缺陷症）加ATP—纠正精选ppt58自身溶血试验及纠正试验先天性非球形细胞性溶血性贫血病人，由于（3）.自身溶血试验及其纠正试验原理参考值：孵育48h,<4.0%;+葡萄糖orATP<0.6%意义：用于鉴别诊断遗传性球形RBC增多症和先天性非球形细胞性HA精选ppt59（3）.自身溶血试验及其纠正试验原理精选ppt59阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关的检测PNH是一种获得性红细胞膜缺陷引起的溶血病，临床以间歇发作的睡眠后血红蛋白尿为特征。Ham-TPNH患者红细胞对补体敏感性增高，在酸化的血液中经37℃孵育，易溶血。蔗糖溶血试验蔗糖溶液离子浓度低，经孵育可加强补体与红细胞膜的结合—PNH患者红细胞膜上形成小孔—蔗糖水进入红细胞—溶血。精选ppt60阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关的检测PNH是一种获得性红细胞膜★（4）.酸化溶血试验(Ham’stest)原理:RBC膜在酸性条件下对补体敏感参考值：正常人阴性意义：阵发性睡眠性Hb尿症(PNH)确诊精选ppt61★（4）.酸化溶血试验(Ham’stest)原理:RBC精选ppt62精选ppt62（5）蔗糖水溶血试验原理同酸溶血试验参考值：正常人阴性意义：阵发性睡眠性Hb尿症(PNH)筛选精选ppt63（5）蔗糖水溶血试验筛选精选ppt63自免溶贫检测AIHA是免疫发生异常，产生抗体或（和）补体，结合在红细胞上，红细胞破坏加速所致的一组溶血性贫血。抗人球蛋白试验为检测温抗体（不完全抗体）的敏感方法，是诊断自免溶贫的重要试验（Coombs).直接：RBC表面结合不完全抗体为致敏RBC.其在盐水中不凝集，加入抗人球蛋白血清后出现凝集—RBC表面有不完全抗体；间接：先用正常RhD阳性的O型RBC吸附血清的不完全抗体，使之致敏，再按直接法操作—凝集—血清中有游离的不完全抗体。精选ppt64自免溶贫检测AIHA是免疫发生异常，产生抗体或（和）补体，结2.自身免疫性溶血性贫血★（1）.抗人球蛋白试验Coombstest原理检测不完全抗体意义：阳性见于新生儿溶血自身免疫性溶血

SLE

类风湿性关节炎恶性淋巴瘤及药物性溶血等精选ppt652.自身免疫性溶血性贫血★（1）.抗人球蛋白试验CCoombs新生儿溶血病本病是由于孕母和婴儿血型不和引起的溶血病，主要包括ABO和Rh溶血病。患儿的红细胞在母体子宫内被其母的免疫性抗体所致敏——Coombs直接：阳性；其间接试验用于ABO或Rh妊娠免疫性新生儿溶血病，母体血清中不完全抗体的检测。不完全抗体不完全抗体（IgG）无法架接2个邻近的RBC而只能和1个RBC抗原结合，抗人球蛋白抗体是完全抗体，可与多个不完全抗体的Fc段结合→RBC凝集精选ppt66Coombs新生儿溶血病精选ppt66直接凝集－检测新生儿RBC

间接凝集－检测母亲血清多数为温抗体型(37℃,IgG)

少数为冷抗体型(4℃,IgM)大多数为IgG型，少数IgA,IgM精选ppt67直接凝集－检测新生儿RBC精选ppt67冷凝集试验冷凝集素是一种可逆性抗体，在低温时可与自身红细胞、“O”型红细胞或与患者同型红细胞发生凝集，当温度升高时，凝集块又消失。参考：效价＜1：40，反应适宜温度为4℃.某些AIHI病人冷凝集素效价很高，可达64000或更高。精选ppt68冷凝集试验冷凝集素是一种可逆性抗体，在低温时可与自身红细胞、冷热双相溶血试验阵发性寒冷性血红蛋白尿症（PCH）患者血清中有双相溶血素，在0-4℃时，溶血素与红细胞结合，并吸附补体，但不溶血；当升温至30-37℃时则发生溶血参考：阴性阳性见于PCH。某些病毒感染。精选ppt69冷热双相溶血试验阵发性寒冷性血红蛋白尿症（PCH）患者血清中（2）.冷凝集试验－可逆性凝集试验意义：自身免疫溶血中的冷型抗体

（3）.冷热双相试验意义：阵发性寒冷性Hb尿症(PCH)精选ppt70（2）.冷凝集试验－可逆性凝集试验精选ppt70红细胞酶缺陷所致贫血又称红细胞酶病，是指参与红细胞代谢（主要指糖代谢）的酶由于基因缺陷，导致活性改变而发生溶血的一组疾病。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶参与磷酸己糖旁路代谢途径是红细胞产生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH）的唯一来源。G6PD缺乏导致NADPH和还原型谷胱甘肽减少，后者是保护细胞免受氧化的重要物质。酶缺乏红细胞接触氧化物质（如蚕豆、药物等）后受损。精选ppt71红细胞酶缺陷所致贫血又称红细胞酶病，是指参与红细胞代谢（主要3.RBC酶缺陷所致的溶贫（1）高铁Hb还原试验原理：

高铁Hb

NADPH

NADP

亚铁HbG-6-PD促进NADPH生成参考值：还原率>75%意义：G-6-PD缺乏症，如蚕豆病、伯氨喹啉型药物溶血性贫血精选ppt723.RBC酶缺陷所致的溶贫（1）高铁Hb还原试验精选ppt7红细胞酶检测变性珠蛋白小体生成试验G6PD缺乏可致红细胞内的还原型谷胱甘肽含量减少→高铁血红蛋白增高→形成变性珠蛋白小体。取G6PD缺乏患者血液+乙酰苯肼→37℃温育2-4h，推薄血片，用1%煌焦油蓝染色，计算含5个或更多变性珠蛋白小体的红细胞百分率。精选ppt73红细胞酶检测变性珠蛋白小体生成试验精选ppt733.RBC酶缺陷所致的溶贫（2）.变性珠蛋白小体生成试验原理：G-6-PD↓→还原型GST↓

→

高铁Hb↑→变性珠蛋白小体→染色→

记含5个或更多小体的RBC百分率参考值<30%意义：G-6-PD缺乏症、不稳定Hb等病常﹥45%精选ppt743.RBC酶缺陷所致的溶贫精选ppt744.珠蛋白合成异常的检测精选ppt754.珠蛋白合成异常的检测精选ppt75

HbA2↑－β轻型地中海贫血

HbA四条肽链异常－限制性内切酶

谱分析－肽链基因突变Hb电泳HbF↑-酸洗脱试验、碱变性试验

异丙醇试验－检测不稳定Hb或HbH

HbH包涵体试验精选ppt76HbA2↑－β轻型地中海贫血溶血性贫血检查项目选择策略确定是否有贫血（血常规）确定是否有溶血（胆红素代谢产物、Rous试验、Hb尿等）确定是否有RBC代偿性增生(网织RBC↑,骨髓中幼稚RBC↑)RBC寿命检查确认溶血的类型精选ppt77溶血性贫血检查项目选择策略确定是否有贫血（血常规）精选ppt溶贫检测小结概念各种原因导致的红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速，而骨髓造血功能不能代偿的一类贫血。分类按部位分血管内、血管外；

按病因分红细胞内在缺陷—遗传性（遗传球）、红细胞外因素—获得性（自免溶贫）红细胞缺陷红细胞膜缺陷、红细胞酶缺陷、珠蛋白生成异常精选ppt78溶贫检测小结概念各种原因导致的红细胞生存时间缩短、破坏增多检测方法溶贫筛查检测血清游离血红蛋白测定、血清结合珠蛋白测定、血浆高铁血红素清蛋白测定、含铁血黄素尿测定、红细胞寿命测定。红细胞缺陷检测红细胞渗透脆性实验、红细胞孵育渗透脆性试验、自身溶血试验及纠正试验红细胞酶缺陷检测高铁血红蛋白还原试验、氰化物-抗坏血酸试验、变性珠蛋白小体生成试验、G6PD活性试验、丙酮酸激酶活性试验珠蛋白生成异常试验血红蛋白电泳、胎儿血红蛋白酸洗脱试验、胎儿血红蛋白测定或HbF碱变性试验、限制性内切酶谱分析自免溶贫检测抗人球蛋白试验、冷凝集试验、冷热双相溶血试验阵发性睡眠性血红蛋白尿酸溶血试验、蔗糖水试验、蛇毒因子试验精选ppt79检测方法溶贫筛查检测血清游离血红蛋白测定、血清结合珠蛋白第二节贫血的其它检查精选ppt80第二节贫血的其它检查精选ppt1内容网织红细胞计数红细胞比积及相关数值测定

●

红细胞比积（Hct）●平均红细胞体积（MCV）

●

平均红细胞血红蛋白含量（MCH）

●

平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）溶血性贫血

●

红细胞渗透脆性试验

●酸溶血试验(Hma,stest)

●

抗人球蛋白试验(Coomb,stest)

●尿内含铁血黄素检查(Roustest)

精选ppt81内容网织红细胞计数精选ppt2一、网织红细胞计数

（reticulocytecount）(一)原理

网织红细胞晚幼红细胞

成熟的红细胞,

精选ppt82一、网织红细胞计数

（reticulocytec网织红细胞

（reticulocytecount）

精选ppt83网织红细胞

（reticulocytecount）

精选(二)方法

活体染色法.近年来还可通过某些血液自动分析仪及流式细胞术检测法进行网织红细胞计数。

★(三)参考值(活体染色法)成人0.5%~1.5%新生儿2%~6%网织红细胞绝对值(24~84)×109/L

精选ppt84(二)方法活体染色法.近年来还可通过某些

★（四）临床意义

直接反应骨髓造血功能

疗效观察的指标

反映骨髓增生或重建情况增高●

溶血性贫血●缺铁性贫血●巨幼细胞性贫血减低

●

再生障碍性贫血精选ppt85★（四）临床意义

直接反应骨髓造血功能

疗二、红细胞比积

（hemotocrit，HT，Hct）(一)原理

将定量的经双草酸盐抗凝全血灌注于

Wintrobe分血管中，以一定的速度和时间离心沉淀后，读取红细胞层在全血中所占体积的百分比。(二)方法

温氏法

精选ppt86二、红细胞比积

（hemotoc二、红细胞比积

（三）参考值

成人男性40~50％成人女性37~48％精选ppt87二、红细胞比积

（三）参考值精选p（四）临床意义增加

■相对：血液浓缩

■绝对：真性红细胞增多症减少各种贫血

■Hct改变与RBC数不一定完全平行

■计算RBC各项平均值才有意义精选ppt88（四）临床意义增加精选ppt9三、红细胞平均数值计算(一)原理

根据红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比积，通过公式可分别计算出下列红细胞平均数值，多参数血液自动分析仪可直接获得此类参数。

(二)计算方法及参考值

精选ppt89三、红细胞平均数值计算(一)原理根据红细胞计数、血平均红细胞体积（MCV：80~100fL）指每个红细胞的平均体积，以飞升(fl)为单位。

Hct（L/L）

MCV=×1015fLRBC（×1012/L）平均红细胞Hb含量（MCH：26~34pg）指每个红细胞内所含有的血红蛋白的平均量，以皮克(pg)为单位。

Hb（g/L）

MCH=pgRBC（×1012/L）精选ppt90平均红细胞体积（MCV：80~100fL）指每个红细胞的平

平均红细胞Hb浓度（MCHC：310~70g/L）指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度，以克/升(g/L)表示。

Hb（g/L）

MCHC=g/L

Hct（L/L）

临床意义

根据MCV、MCH、MCHC测定可对贫血进行形态学分类，并对其鉴别诊断也有一定意义。既：有助于贫血形态学分类选择合理治疗方案精选ppt91

平均红细胞Hb浓度（MCHC：310~70g/L）指平均贫血的形态学分类鉴别表

细胞形态学MCVMCHMCHC病因

参考值

80-100fL26-34pg310-370g/L大细胞性贫血↑↑-巨幼细胞性贫血正常细胞性贫血

---急性失血、溶贫再障、白血病小细胞性贫血↓↓-感染、中毒恶性肿瘤小细胞低色素↓↓↓缺铁性贫血慢性失血精选ppt92贫血的形态学分类鉴别表细胞形态学MCV四、溶血性贫血的实验室检查精选ppt93四、溶血性贫血的实验室检查精选ppt14精选ppt94精选ppt15(一)溶血性贫血的实验诊断步骤HA的诊断一般分为四个步骤：确定有无贫血明确溶血的存在判定溶血部位查明溶血原因★精选ppt95(一)溶血性贫血的实验诊断步骤★精选ppt16(一)溶血性贫血的实验诊断步骤1.确定有无贫血若红细胞数量、血红蛋白浓度、红细胞比积低于参考值的下限则为贫血。

精选ppt96(一)溶血性贫血的实验诊断步骤1.确定有无贫血精选ppt172.明确溶血的存在（1）红细胞破坏增加血液中网织红细胞显著增多血浆游离血红蛋白含量增高肝珠蛋白含量减低血清间接胆红素增高尿胆原含量增高

精选ppt972.明确溶血的存在（1）红细胞破坏增加精选ppt182.明确溶血的存在（2）骨髓红系细胞高度代偿性增生骨髓有核细胞增生明显活跃,粒红比值明显减低或倒置，红系以中、晚幼红细胞增生为主，原红和早幼红细胞亦增多，可见染色质小体(Howell-jolly小体)、Cabot环及核分裂幼红细胞增多。血涂片中红细胞形态异常，出现嗜多色性红细胞和幼红细胞等。

精选ppt982.明确溶血的存在精选ppt19骨髓增生程度和粒红比成熟红细胞：有核细胞极度活跃1：1明显活跃10：1活跃20：1减低50：1极度减低200：1粒红比粒细胞各阶段细胞总和与各阶段红细胞总和之比正常3：1精选ppt99骨髓增生程度和粒红比成熟红细胞：有核细胞精选ppt20（粒、红比）M:E正常2：1-4：1

1、粒、红比正常：M-E-正常2、M:E↑M↑E-：化脓、粒细胞白血病

M-E-ITPM-E↓：纯红再障

M↑E↑：红白血病

M↓E↓：再障↓3、M:E↓或倒置：M-E↑：各种增生性贫血、巨幼红细胞性贫血、真红；

M↓↓E-：粒细胞缺乏症。精选ppt100（粒、红比）M:E正常2：1-4：1

1、粒、红比正常：M各系统骨髓细胞量和质的改变1、粒系：原粒、早幼粒↑↑、形态改变—急粒早、中、晚幼↑↑、嗜酸↑--慢粒中性中、晚幼、杆状↑WBC中毒变化—感染粒系↓↓--粒缺精选ppt101各系统骨髓细胞量和质的改变1、粒系：精选ppt222、红系各阶段成比例↑--溶贫、失血贫↑↑伴胞浆发育落后于胞核—缺铁贫↑↑伴巨幼红细胞出现—营养性巨幼红细胞贫血↓↓伴余二系↓↓--再障精选ppt1022、红系各阶段成比例↑--溶贫、失血贫精选ppt233、淋巴系原淋或幼淋↑↑--急淋相对↑、其他系↓↓--再障↑↑--慢淋精选ppt1033、淋巴系原淋或幼淋↑↑--急淋精选ppt244、单核系原单/幼单↑↑--单核细胞型白血病单核C↑--慢性感染（结核）精选ppt1044、单核系原单/幼单↑↑--单核细胞型白血病精选ppt25巨核C系↑--ITP、脾亢↓/---再障精选ppt105巨核C系↑--ITP、脾亢精选ppt266、浆C、网C浆C系↑--再障、结核浆C系↑↑、形态改变—骨髓瘤、浆细胞性白血病网C↑↑、形态改变—恶网网C↑--感染、溶贫、再障精选ppt1066、浆C、网C浆C系↑--再障、结核精选ppt273.判定溶血部位

血管内溶血血管外溶血

精选ppt1073.判定溶血部位

血管内溶血精选ppt284.查明溶血的原因HA的原因较复杂一般先做常用的筛选试验，如红细胞形态观察红细胞渗透脆性试验抗人球蛋白试验蔗糖水溶血试验血红蛋白电泳根据筛选试验结果再选择适当的确诊试验,

绝大部分患者的HA原因可以查明。精选ppt1084.查明溶血的原因HA的原因较复杂精选ppt29（二）溶血性贫血的分类遗传性红细胞膜异常红细胞酶异常珠蛋白合成异常获得性机械性理化及生物因素免疫性单核-巨噬系统破坏按病因和发病机制分：精选ppt109（二）溶血性贫血的分类遗传性按病因和发病机制分：精选ppt3（二）溶血性贫血的分类血管内血管外按溶血的部位分：精选ppt110（二）溶血性贫血的分类血管内按溶血的部位分：精选ppt31按溶血发生的部位分红细胞破坏发生于血循环中—血管内溶血。临床表现明显，伴有血红蛋白血症、血红蛋白尿、含铁血黄素尿；红细胞破坏发生于单核-巨噬细胞系统—血管外溶血。主要发生于脾脏，临床表现一般较轻。精选ppt111按溶血发生的部位分红细胞破坏发生于血循环中—血管内溶血。临床血管内溶血与血管外溶血的鉴别检查项目血管内溶血血管外溶血红细胞形态异常-～+++～+++血浆游离血红蛋白+～+++-～+高铁血红素白蛋白+-尿Rous试验+～++-血红蛋白尿-～+++-红细胞渗透脆性试验-++精选ppt112血管内溶血与血管外溶血的鉴别检查项目血管内溶血血管外溶血红细(三)溶血性贫血确诊的实验室检查1.显示红细胞破坏增加的依据(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞寿命测定红细胞形态改变血浆乳酸脱氢酶测定(2)血浆游离血红蛋白增高的检查血浆游离血红蛋白测定血清珠蛋白测定血浆高铁血红素白蛋白测定血红蛋白尿检验含铁血黄素尿试验(Rous试验)（3）胆红素代谢异常的表现精选ppt113(三)溶血性贫血确诊的实验室检查1.显示红细胞破坏增加的依据(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞寿命测定：用51Cr标记红细胞测定其半衰期（T1/2）正常25～32天溶贫﹤15天精选ppt114(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验精选ppt35(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验红细胞形态改变可见红细胞破坏的征象精选ppt115(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验精选ppt36(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验血浆乳酸脱氢酶测定

红细胞破坏乳酸脱氢酶精选ppt116(1)红细胞寿命缩短、破坏增加的实验精选ppt37(三)溶血性贫血确诊的实验室检查(2).血浆游离血红蛋白增高的检查血浆游离血红蛋白测定血清珠蛋白测定血浆高铁血红素白蛋白测定血红蛋白尿检验含铁血黄素尿试验(Rous试验)精选ppt117(三)溶血性贫血确诊的实验室检查(2).血浆游离血红蛋白增高血浆游离血红蛋白测定原理：游离血红蛋白中血红素部分有类似过氧化物酶的作用，能使邻甲苯胺氧化显色，与已知血红蛋白浓度的标准液比较而求得其含量。标本采集：用肝素或EDTA抗凝血均可。参考值：<40mg/L。精选ppt118血浆游离血红蛋白测定精选ppt39血浆游离血红蛋白测定临床意义

(1)增高血管内溶血如阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)、阵发性寒冷性血红蛋白尿症、冷凝集素综合征、温抗体型自身免疫性溶血性贫血、行军性血红蛋白尿症、微血管病性溶血性贫血等。

(2)血管外溶血正常

如遗传性球形细胞增多症等。

精选ppt119血浆游离血红蛋白测定临床意义

(1)增高血管内溶血血清珠蛋白测定

原理：珠蛋白(haptoglobin，Hp)是肝脏合成的一种a2巨球蛋白，能与血红蛋白(Hb)结合成一稳定的Hb-Hp复合物，后者在pH4的酸性条件下，具有过氧化物酶活性，可催化H2O2分解，使愈创木酚氧化显色，其颜色的深浅与Hp含量成正比。血清中Hp的含量是以Hb的结合量来表示的，即以mgHb/L表示。

参考值：200～1900mgHb/L。精选ppt120血清珠蛋白测定原理：珠蛋白(haptoglobin，Hp)血清珠蛋白测定

临床意义（血管内、血管外）各种HAHp明显减低但肝细胞损伤性病变、传染性单核细胞增多症，先天性无Hp血症等Hp亦见降低。感染、创伤、肿瘤、红斑狼疮、类固酵治疗、肝外阻塞性黄疸时可增高。故在此种情况下，如Hp不减低，并不能排除溶血。

精选ppt121血清珠蛋白测定精选ppt42血浆高铁血红素白蛋白测定

原理：当溶血较重使Hp耗尽时，可出现高铁血红素白蛋白，电泳时出现在Hb-Hp区带之前。标本采集：静脉血凝固后分离血清。参考值：正常人为阴性。临床意义：阳性表示严重血管内溶血精选ppt122血浆高铁血红素白蛋白测定

原理：当溶血较重使Hp耗尽时，可血红蛋白尿检验

临床意义：阳性表示血管内溶血精选ppt123血红蛋白尿检验

精选ppt44★含铁血黄素尿试验(Rous试验)

原理：尿中含铁血黄素在酸性条件下与亚铁氰化钾形成亚铁氰化铁而呈蓝色。标本采集：将尿液离心后取沉渣染色。参考值：正常人为阴性。精选ppt124★含铁血黄素尿试验(Rous试验)

原理：尿中含铁血黄素在★含铁血黄素尿试验(Rous试验)

临床意义阳性血管内溶血特别是慢性血管内溶血时易出现，并可持续数周。

阴性并不能除外血管内溶血。因溶血初期，肾小管上皮细胞尚未充分将吸收的Hb转变为含铁血黄素，未形成足够大的颗粒(直径>1mm才能在光镜下检出)，含有含铁血黄素的上皮细胞的未完成其衰老脱落的过程等均可呈阴性反应，必要时反复检查或取晨尿、午睡后的尿液进行检查。精选ppt125★含铁血黄素尿试验(Rous试验)

精选ppt46（3）胆红素代谢异常的表现血非结合胆红素尿中的尿胆原

尿胆红素（—）精选ppt126（3）胆红素代谢异常的表现血非结合胆红素精选ppt47(三)溶血性贫血确诊的实验室检查2.显示红细胞代偿增加的依据(1)外周血网织红细胞明显增高(2)外周血涂片红细胞形态改变(3)增生性贫血骨髓象精选ppt127(三)溶血性贫血确诊的实验室检查2.显示红细胞代偿增加的依据(四)溶血性贫血的病因诊断

精选ppt128(四)溶血性贫血的病因诊断

精选ppt49溶血性贫血病因红细胞内在缺陷—遗传性溶血：红细胞膜缺陷红细胞酶缺陷珠蛋白异常红细胞外部因素异常：免疫因素（患者产生红细胞抗体）非免疫因素（人工瓣膜置换术、蛇毒、疟原虫）精选ppt129溶血性贫血病因红细胞内在缺陷—遗传性溶血：精选ppt501.红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷主要是指膜成分或膜支架结构异常,导致红细胞表面积与体积比、可塑性及脆性等改变，有的还伴有红细胞形态异常而易于破裂导致溶血性贫血。膜成分异常主要是指脂质和膜支架结构的异常，常见的是收缩蛋白(区带Ⅰ、Ⅱ)、肌动蛋白(区带Ⅴ)及区带Ⅳ-1蛋白的磷酸化或相互结合障碍,不能形成牢固的膜骨骼。针对红细胞膜缺陷常用的筛选试验是测定红细胞在各种实验条件下抗溶解的能力，若通过生化方法直接测定膜成分的异常,则更为准确而特异。精选ppt1301.红细胞膜缺陷的检验精选ppt51（1）.红细胞渗透脆性试验（2）.温孵育后渗透脆性试验（3）.自身溶血试验及其纠正试验（4）.酸溶血试验（5）.蔗糖水溶血试验★1.红细胞膜缺陷的检验精选ppt131（1）.红细胞渗透脆性试验★1.红细胞膜缺陷的检验精选ppt（1）红细胞渗透脆性试验(red-cellosmoticfragilitytest,ROFT)原理：正常红细胞为双凹圆盘状,在低渗盐水中吸水膨胀的适应性较大(可增加70%的体积而不破裂)。遗传性球形细胞增多症(HS)等红细胞的表面积/体积(S/V)的比值小,对低渗盐水的适应性小(脆性增大)。本试验是测定红细胞在一系列不同浓度低渗氯化钠盐水内开始溶血和完全溶血的氯化钠浓度。标本采集：用肝素抗凝血,也可取静脉血立即测定。精选ppt132（1）红细胞渗透脆性试验(red-cellosmotic红细胞脆性实验脆性增高开始溶血及完全溶血时氯化钠溶液的浓度均较正常对照提前两管（0.04%）或更高，即开始溶血﹥0.50%,完全溶血﹥0.38%NaCl时为脆性增高，即红细胞对低渗NaCl溶血的抵抗力减低；脆性减低即红细胞对低渗NaCl溶血的抵抗力增高；精选ppt133红细胞脆性实验脆性增高开始溶血及完全溶血时氯化钠溶液的浓参考值：开始溶血4.2~4.6g/LNaCl

完全溶血2.8~3.4g/LNaCl意义

↑：遗传性球形RBC增多症自身免疫性溶血性贫血

↓：低色素性贫血(IDA，地中海贫血)精选ppt134精选ppt55温孵育渗透脆性试验红细胞孵育过程中，葡萄糖消耗增加，储备的ATP减少→红细胞对阳离子的主动传递受阻，钠离子在红细胞内集聚，细胞膨胀→渗透脆性增加。精选ppt135温孵育渗透脆性试验红细胞孵育过程中，葡萄糖消耗增加，储备的A（2）温孵育后渗透脆性试验

原理略意义：正常人轻度增加轻症遗传性球形RBC增多症丙酮酸激酶缺陷症精选ppt136（2）温孵育后渗透脆性试验

原理略精选ppt57自身溶血试验及纠正试验先天性非球形细胞性溶血性贫血病人，由于红细胞内酶缺陷，葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP以维持红细胞内的钠泵作用。病人红细胞无菌条件下在自身血浆中温育48h，使ATP储备减少，钠泵作用减弱导致溶血增强。在孵育过程中分别加入葡萄糖、ATP作为纠正物，并以氯化钠溶液对照，观察溶血是否被纠正。遗传球：明显纠正Ⅰ型先天型性非球（G-6PD缺陷症）加葡萄糖、ATP—均可纠正Ⅱ型先天型性非球（丙酮酸激酶缺陷症）加ATP—纠正精选ppt137自身溶血试验及纠正试验先天性非球形细胞性溶血性贫血病人，由于（3）.自身溶血试验及其纠正试验原理参考值：孵育48h,<4.0%;+葡萄糖orATP<0.6%意义：用于鉴别诊断遗传性球形RBC增多症和先天性非球形细胞性HA精选ppt138（3）.自身溶血试验及其纠正试验原理精选ppt59阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关的检测PNH是一种获得性红细胞膜缺陷引起的溶血病，临床以间歇发作的睡眠后血红蛋白尿为特征。Ham-TPNH患者红细胞对补体敏感性增高，在酸化的血液中经37℃孵育，易溶血。蔗糖溶血试验蔗糖溶液离子浓度低，经孵育可加强补体与红细胞膜的结合—PNH患者红细胞膜上形成小孔—蔗糖水进入红细胞—溶血。精选ppt139阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关的检测PNH是一种获得性红细胞膜★（4）.酸化溶血试验(Ham’stest)原理:RBC膜在酸性条件下对补体敏感参考值：正常人阴性意义：阵发性睡眠性Hb尿症(PNH)确诊精选ppt140★（4）.酸化溶血试验(Ham’stest)原理:RBC精选ppt141精选ppt62（5）蔗糖水溶血试验原理同酸溶血试验参考值：正常人阴性意义：阵发性睡眠性Hb尿症(PNH)筛选精选ppt142（5）蔗糖水溶血试验筛选精选ppt63自免溶贫检测AIHA是免疫发生异常，产生抗体或（和）补体，结合在红细胞上，红细胞破坏加速所致的一组溶血性贫血。抗人球蛋白试验为检测温抗体（不完全抗体）的敏感方法，是诊断自免溶贫的重要试验（Coombs).直接：RBC表面结合不完全抗体为致敏RBC.其在盐水中不凝集，加入抗人球蛋白血清后出现凝集—RBC表面有不完全抗体；间接：先用正常RhD阳性的O型RBC吸附血清的不完全抗体，使之致敏，再按直接法操作—凝集—血清中有游离的不完全抗体。精选ppt143自免溶贫检测AIHA是免疫发生异常，产生抗体或（和）补体，结2.自身免疫性溶血性贫血★（1）.抗人球蛋白试验Coombstest原理检测不完全抗体意义：阳性见于新生儿溶血自身免疫性溶血

SLE

类风湿性关节炎