甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件

一、标本的采集种类和要求1

、推荐采集的呼吸道标本种类疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液。气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至实验室。（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。（附表1）

一、标本的采集种类和要求11）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，另一端的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。

2）鼻腔擦拭液的采集方法

将灭菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲数次，采集粘膜表皮。

3）咽喉擦拭液的采集方法

将灭菌棉棒从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮。采集时，要注意不要触碰到唾液。（采样视频网址

1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，2甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件3甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件4甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件5甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件62、拭子的选择

标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做柄。不推荐棉拭子和木柄。标本采集管应包含3毫升病毒采样液（含有蛋白质稳定剂，阻止细菌和真菌生长的抗生素，缓冲液）

2、拭子的选择

标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚73、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。有条件的实验室均应保存在-70℃或-70℃以下。不应保存在-20℃。

3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-784、标本的分装处理

标本送至实验室后，立即进行处理，避免反复冻融。将原始标本分为三份，一份用于核酸检测，一份用于病毒分离，一份保存待复核。（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）

4、标本的分装处理

标本送至实验室后，立即进行处理，避免反复95、标本的运输

疑似人感染甲型H1N1感染病例列为A类，用UN2814包装运输。填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单（附表2）。

5、标本的运输

疑似人感染甲型H1N1感染病例列为A10二、核酸检测

基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用。

1、基于real-timeRT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒（引物和探针序列为美国CDC设计）：

4月29日WHO网站上公布了美国CDC设计的针对此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探针，此实验用于检测疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道样本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建议首先筛选甲型流感病毒并排除季节性流感病毒和H5N1禽流感病毒。real-timeRT-PCR方法参考。

2、基于RT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒（引物序列为国家流感中心设计）：

目前国家流感中心设计了RT-PCR方法检测新的甲型H1N1流感病毒

二、核酸检测

11三、病毒分离鉴定

可采用鸡胚和/或MDCK细胞进行流感病毒分离。具备相应条件的网络实验室在收到标本后24h内进行病毒接种。

三、病毒分离鉴定

可采用鸡胚和/或MDCK细胞进行流感病12四、适用于实验室工作人员的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）实验室级别及个人防护

1、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的诊断性实验工作，在BSL-2实验室内进行。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。遵循生物安全三级个人防护。

2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。

四、适用于实验室工作人员的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一13（二）健康监测

1、所有人员均应自测发热及其他症状。

2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。如有不适，应立即向上级报告。

3、如有人员在无防护情况下暴露于甲型H1N1流感确诊病例的临床标本或活病毒，应考虑在暴露后的7天时间里使用奥司他韦或扎那米韦进行抗病毒药物预防。

（二）健康监测

1、所有人员均应自测发热及其他症状。14五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单

五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采15

附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单

姓名性别年龄职业※

现住址发病日期标本(#)种类标本量（g或ml)采集日期备注附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单16遵循生物安全三级个人防护。填表人员：送样时间：单位（盖章)附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本送检单2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。目前国家流感中心设计了RT-PCR方法检测新的甲型H1N1流感病毒2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。如有不适，应立即向上级报告。气管插管的病人也应收集气管吸取物。real-timeRT-PCR方法参考。5、标本的运输

疑似人感染甲型H1N1感染病例列为A类，用UN2814包装运输。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）4月29日WHO网站上公布了美国CDC设计的针对此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探针，此实验用于检测疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道样本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建议首先筛选甲型流感病毒并排除季节性流感病毒和H5N1禽流感病毒。一、标本的采集种类和要求有条件的实验室均应保存在-70℃或-70℃以下。※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）

采集人员：采集单位（盖章）：

遵循生物安全三级个人防护。※选项：参照传染病报告卡。

17附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本送检单

姓名性别年龄职业※

现住址发病日期标本(#)种类标本量*

（g或ml)采集日期备注附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本送检单

姓名性18※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）*标本量：如果同一份标本有多个包装请注明。

填表人员：送样时间：单位（盖章

)※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽19

谢谢！甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件20一、标本的采集种类和要求1

、推荐采集的呼吸道标本种类疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液。气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至实验室。（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。（附表1）

一、标本的采集种类和要求21甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件22四、适用于实验室工作人员的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）实验室级别及个人防护

1、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的诊断性实验工作，在BSL-2实验室内进行。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。遵循生物安全三级个人防护。

2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。

四、适用于实验室工作人员的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一23

附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单

姓名性别年龄职业※

现住址发病日期标本(#)种类标本量（g或ml)采集日期备注附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单24※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）

采集人员：采集单位（盖章）：

※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻25一、标本的采集种类和要求基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。三、病毒分离鉴定

可采用鸡胚和/或MDCK细胞进行流感病毒分离。2、拭子的选择

标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做柄。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。遵循生物安全三级个人防护。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。气管插管的病人也应收集气管吸取物。real-timeRT-PCR方法参考。4月29日WHO网站上公布了美国CDC设计的针对此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探针，此实验用于检测疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道样本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建议首先筛选甲型流感病毒并排除季节性流感病毒和H5N1禽流感病毒。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单有条件的实验室均应保存在-70℃或-70℃以下。（二）健康监测

1、所有人员均应自测发热及其他症状。1、推荐采集的呼吸道标本种类3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。标本量*

（g或ml)）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用。采集时，要注意不要触碰到唾液。五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单2、基于RT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒（引物序列为国家流感中心设计）：填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单（附表2）。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。※选项：参照传染病报告卡。（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。*标本量：如果同一份标本有多个包装请注明。目前国家流感中心设计了RT-PCR方法检测新的甲型H1N1流感病毒（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）real-timeRT-PCR方法参考。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单1、推荐采集的呼吸道标本种类五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，另一端的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。目前国家流感中心设计了RT-PCR方法检测新的甲型H1N1流感病毒附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）

采集人员：采集单位（盖章）：#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）遵循生物安全三级个人防护。3）咽喉擦拭液的采集方法

将灭菌棉棒从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，另一端的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至实验室。1、基于real-timeRT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒（引物和探针序列为美国CDC设计）：具备相应条件的网络实验室在收到标本后24h内进行病毒接种。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液。（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本送检单3）咽喉擦拭液的采集方法

将灭菌棉棒从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）采集时，要注意不要触碰到唾液。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。3、如有人员在无防护情况下暴露于甲型H1N1流感确诊病例的临床标本或活病毒，应考虑在暴露后的7天时间里使用奥司他韦或扎那米韦进行抗病毒药物预防。气管插管的病人也应收集气管吸取物。#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）标本量*

（g或ml)2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至实验室。1、推荐采集的呼吸道标本种类（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至实验室。一、标本的采集种类和要求*标本量：如果同一份标本有多个包装请注明。1、推荐采集的呼吸道标本种类）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单具备相应条件的网络实验室在收到标本后24h内进行病毒接种。（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用。2、拭子的选择

标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做柄。标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至实验室。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，另一端的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液。3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本送检单

姓名性别年龄职业※

现住址发病日期标本(#)种类标本量*

（g或ml)采集日期备注一、标本的采集种类和要求五、附表和附件

附表1疑似人感染甲26一、标本的采集种类和要求1

、推荐采集的呼吸道标本种类疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液。气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至实验室。（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。（附表1）

一、标本的采集种类和要求271）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，另一端的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。

2）鼻腔擦拭液的采集方法

将灭菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲数次，采集粘膜表皮。

3）咽喉擦拭液的采集方法

将灭菌棉棒从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮。采集时，要注意不要触碰到唾液。（采样视频网址

1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，28甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件29甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件30甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件31甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件322、拭子的选择

标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做柄。不推荐棉拭子和木柄。标本采集管应包含3毫升病毒采样液（含有蛋白质稳定剂，阻止细菌和真菌生长的抗生素，缓冲液）

2、拭子的选择

标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚333、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。有条件的实验室均应保存在-70℃或-70℃以下。不应保存在-20℃。

3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-7344、标本的分装处理

标本送至实验室后，立即进行处理，避免反复冻融。将原始标本分为三份，一份用于核酸检测，一份用于病毒分离，一份保存待复核。（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）

4、标本的分装处理

标本送至实验室后，立即进行处理，避免反复355、标本的运输

疑似人感染甲型H1N1感染病例列为A类，用UN2814包装运输。填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单（附表2）。

5、标本的运输

疑似人感染甲型H1N1感染病例列为A36二、核酸检测

基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用。

1、基于real-timeRT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒（引物和探针序列为美国CDC设计）：

4月29日WHO网站上公布了美国CDC设计的针对此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探针，此实验用于检测疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道样本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建议首先筛选甲型流感病毒并排除季节性流感病毒和H5N1禽流感病毒。real-timeRT-PCR方法参考。

2、基于RT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒（引物序列为国家流感中心设计）：

目前国家流感中心设计了RT-PCR方法检测新的甲型H1N1流感病毒

二、核酸检测

37三、病毒分离鉴定

可采用鸡胚和/或MDCK细胞进行流感病毒分离。具备相应条件的网络实验室在收到标本后24h内进行病毒接种。

三、病毒分离鉴定

可采用鸡胚和/或MDCK细胞进行流感病38四、适用于实验室工作人员的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）实验室级别及个人防护

1、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的诊断性实验工作，在BSL-2实验室内进行。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。遵循生物安全三级个人防护。

2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。

四、适用于实验室工作人员的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一39（二）健康监测

1、所有人员均应自测发热及其他症状。

2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。如有不适，应立即向上级报告。

3、如有人员在无防护情况下暴露于甲型H1N1流感确诊病例的临床标本或活病毒，应考虑在暴露后的7天时间里使用奥司他韦或扎那米韦进行抗病毒药物预防。

（二）健康监测

1、所有人员均应自测发热及其他症状。40五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单

五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采41

附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单

姓名性别年龄职业※

现住址发病日期标本(#)种类标本量（g或ml)采集日期备注附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单42遵循生物安全三级个人防护。填表人员：送样时间：单位（盖章)附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本送检单2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。目前国家流感中心设计了RT-PCR方法检测新的甲型H1N1流感病毒2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。如有不适，应立即向上级报告。气管插管的病人也应收集气管吸取物。real-timeRT-PCR方法参考。5、标本的运输

疑似人感染甲型H1N1感染病例列为A类，用UN2814包装运输。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）4月29日WHO网站上公布了美国CDC设计的针对此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探针，此实验用于检测疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道样本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建议首先筛选甲型流感病毒并排除季节性流感病毒和H5N1禽流感病毒。一、标本的采集种类和要求有条件的实验室均应保存在-70℃或-70℃以下。※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）

采集人员：采集单位（盖章）：

遵循生物安全三级个人防护。※选项：参照传染病报告卡。

43附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本送检单

姓名性别年龄职业※

现住址发病日期标本(#)种类标本量*

（g或ml)采集日期备注附表2疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本送检单

姓名性44※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）*标本量：如果同一份标本有多个包装请注明。

填表人员：送样时间：单位（盖章

)※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽45

谢谢！甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件46一、标本的采集种类和要求1

、推荐采集的呼吸道标本种类疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液。气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上送至实验室。（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。（附表1）

一、标本的采集种类和要求47甲型HN流感病毒样品采集运送及检验技术推荐课件48四、适用于实验室工作人员的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一）实验室级别及个人防护

1、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的诊断性实验工作，在BSL-2实验室内进行。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。遵循生物安全三级个人防护。

2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。

四、适用于实验室工作人员的甲型H1N1流感病毒生物安全

（一49

附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单

姓名性别年龄职业※

现住址发病日期标本(#)种类标本量（g或ml)采集日期备注附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单50※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）

采集人员：采集单位（盖章）：

※选项：参照传染病报告卡。

#选项：A鼻咽拭子、B鼻51一、标本的采集种类和要求基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。三、病毒分离鉴定

可采用鸡胚和/或MDCK细胞进行流感病毒分离。2、拭子的选择

标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做柄。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。遵循生物安全三级个人防护。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。气管插管的病人也应收集气管吸取物。real-timeRT-PCR方法参考。4月29日WHO网站上公布了美国CDC设计的针对此次甲型H1N1流感病毒的real-timeRT-PCR引物和探针，此实验用于检测疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道样本,因此，用此real-timeRT-PCR的方法，建议首先筛选甲型流感病毒并排除季节性流感病毒和H5N1禽流感病毒。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单有条件的实验室均应保存在-70℃或-70℃以下。（二）健康监测

1、所有人员均应自测发热及其他症状。1、推荐采集的呼吸道标本种类3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。标本量*

（g或ml)）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用。采集时，要注意不要触碰到唾液。五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单2、基于RT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒（引物序列为国家流感中心设计）：填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单（附表2）。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。※选项：参照传染病报告卡。（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。*标本量：如果同一份标本有多个包装请注明。目前国家流感中心设计了RT-PCR方法检测新的甲型H1N1流感病毒（实际操作：采集鼻拭子2份，咽拭子2份放在同一病毒采样液中，其目的为了增加阳性检出率）real-timeRT-PCR方法参考。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。2、对采集自属于感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的临床标本进行的病毒分离培养工作，应在BSL-3实验室内进行，并遵循生物安全三级个人防护。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。3、临床标本储存要求

保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单1、推荐采集的呼吸道标本种类五、附表和附件

附表1疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单

附表2疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，另一端的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。目前国家流感中心设计了RT-PCR方法检测新的甲型H1N1流感病毒附表1

疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例标本采样单2、感染甲型H1N1流感病毒的症状包括咳嗽、喉咙痛、呕吐、腹泻、头痛、流鼻涕和肌肉疼痛。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）

采集人员：采集单位（盖章）：#选项：A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物、C鼻腔冲洗液、D鼻腔吸取物、E气管吸取物、F其他（如为其他，请在表格中注明）遵循生物安全三级个人防护。3）咽喉擦拭液的采集方法

将灭菌棉棒从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮。）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。1）鼻腔抽吸液的采集方法

抽吸器一端的管子连接在抽吸泵上，另一端的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4