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文档简介
PRRS诊断与预防
PRRS1猪呼吸道疾病综合征
--蓝耳病毒的危害免疫抑制,猪抵抗力下降流产率升高,产活仔数减少仔猪、小猪、母猪、种公猪死淘率升高种(公、母)猪繁殖力降低仔猪、生长肥育猪生长缓慢或停滞猪呼吸道疾病综合征
--蓝耳病毒的危
病原因子流感病毒、副黏病毒猪瘟病毒兰耳病伪狂犬病链球菌病猪传染性胸膜肺炎猪噬血杆菌猪圆环病毒猪副红细胞体病
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PRRS概况
感染母猪流产、死胎、弱仔断奶仔猪呼吸道症状及死亡母猪产仔数和受胎率降低,小猪发育不良、生产性能及免疫力降低等尚无有效对策分布广泛
PRRS概况
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PRRS概况
已发现有PRRSV的国家:美洲:美国(1987)、加拿大(1987)欧洲:荷兰(1991)、英国、捷克、波兰、斯洛文尼亚、丹麦、德国、西班牙亚洲:日本(1994)、南韩、菲律宾、中国台湾和大陆
PRRS概况
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PRRS概况
美国:阳性群个体阳性率1987年:临床上发现1985年:3.8%9。6%1986年:40%20.8%1987年:37.5%32.4%1988年:63.9%47.6%1989年:83.3%51.7%1990年:18个州87个农场猪群阳性率达82.7%。目前:40-50%猪群感染欧州:目前有50%以上猪群感染
PRRS概况
61999~2003年猪繁殖与呼吸综合征抗体检测结果
2003年83.3%猪场阳性率2003年:55.8%(阳性场:64.8%)
样品阳性率1999~2003年猪繁殖与呼吸综合征71996年来PRRS在我国的分布1996年来PRRS在我国的分布8
一、猪繁殖和呼吸综合征诊断
临床症状
病理变化病毒分离病毒抗原检测病毒抗体检测一、猪繁殖和呼吸综合9
PRRS诊断--(1)临床症状
1.繁殖猪群:急性发病期死亡、厌食、发热。无乳症、昏睡、皮肤变色。发病5%~50%。持续4~5个月,配种后22~109天流产,早产和产期延迟。仔常出现一窝内有死胎、木乃尹化胎儿,组织自溶胎儿、弱仔和健康仔。母猪还可出现延迟发情、持续性不发情。2.仔猪呼吸道症状:仔猪断乳前后发病率和死亡率升高,仔猪精神不振,“八”字腿站姿,生后1周内死亡,呼吸困难,咳嗽、厌食,皮肤损伤变兰,结膜炎,眼窝水肿,新生猪脐带出血,淤血红肿.3.公猪:症状与母猪相同;性欲降低、精子数量和活力降低。4.其它:健康状况不佳可持续整个育成期,零星发生死亡。对育成猪的影响难以估计。
Don等(1996)报道在PRRS暴发期间和之后出生的仔猪肺部病变发生率从30%增加到70%,仔猪年生产能力降低5%~20%。但是大多数育成猪群可能感染PRRS而无临床症状。
PRRS诊断--(1)10临床症状多数猪场表现PRRSV的亚临床感染或慢性感染PRRSV侵袭的保育舍仔猪继发细菌或并发病毒感染则出现咳嗽、呼吸急促者增多肺炎、局限性肺炎
腹泻率升高(20%)萎缩性鼻炎、链球菌病、流感严重性增加
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)临床症状猪繁殖与呼早产的1日仔猪早产的一日龄仔猪早产的1日仔猪早产的一日龄仔猪12PRRS诊断与预防13PRRS诊断与预防14PRRS诊断与预防15PRRS诊断与预防16
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21PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防放线杆菌胸膜肺炎放线杆菌胸膜肺炎支原体肺炎支原体肺炎
PRRS诊断--(2)病理变化
1.肺:小叶区域变红。大面积肺炎,呈间质性肺炎,主要局限于肺泡内,肺泡间隔增厚,含大量巨噬细胞、少量淋巴细胞和2型肺细胞增生。肺泡腔充满炎性细胞和坏死细胞碎片。肺泡巨噬细胞减少(从90%减少到35%)。2.流产胎儿:动脉炎、心肌炎和脑炎(血管周围出现巨噬细胞和淋巴细胞浸润)。3.其它:仔猪、育肥猪眼睑水肿,仔猪皮下水肿,体表淋巴结肿大,心包积液、水肿。有的流产胎儿和死胎也出现皮下水肿和心包积液。
PRRS诊断--(33猪繁殖与呼吸综合征
病理变化
新生仔猪及保育舍仔猪肺脏呈现:轻度至重度、多灶性至弥漫性、棕褐色斑点病变,不塌陷,有弹性间质性肺炎,单核细胞、肥大和增生的2型肺细胞、
猪繁殖与呼吸综合征PRRS诊断与预防35PRRS诊断与预防36PRRS诊断与预防37PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防41PRRS诊断与预防42
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46猪繁殖与呼吸综合征
临床诊断14天内,出现如下3个指标:流产或/和早产8%死产胎儿20%产仔数出生后1周内仔猪死亡率25%猪繁殖与呼吸综合征
PRRS诊断--(3)病毒分离
动脉炎病毒科(LDV,EAV,SHFV)球形,45-83nm
(25-35nm)囊膜不稳定
一、病毒特性:PRRS诊断--(3)48PRRS病毒分类欧洲型PRRSV美洲型PRRSV
Varygenomically(genotype)Partlycross-reactionserologically突变重组PRRS病毒分类欧洲型PRRSV49PRRS病毒血清型和基因型欧洲型PRRSV:
欧洲;加拿大;日本美洲型PRRSV:美洲;丹麦、斯洛文尼亚;亚洲
PRRS病毒血清型和基因型欧洲型PRRSV:50
美洲型毒株基因亚型PRRSV野毒株在有限区域或时间内很容易发生基因变异或重组基因亚型有多少?据GP5基因序列,美洲株至少分为6个基因亚型Andreyev等(1997)日本1991~1999年分离的37个野毒株分成了14个不同基因组。Itou等(2001)美洲型毒株基51同一年份具有不同型毒株;同一农场有不同型毒株Dee等(2001)在一个有PRRSV慢性感染的1750头母猪的种猪场,经过对不同时期仔猪血清内PRRSV基因检测和病毒分离,发现该场PRRSV有A、B、C3个基因亚型,不同基因亚型PRRSVORF5基因差异为5.8%~11%,同一基因亚型内毒株基因同源性为98.%~99%主导基因亚型?如1-3-2-1RFLP类型,为日本主要流行毒株欧洲型毒株和美州型毒株间的重组概率比同型毒株间的重组概率小1万倍(VanVugt等,2001)。同一年份具有不同型毒株;同一农场有不同型毒株52PRRS病毒结构蛋白GP5RNAN
GP2GP3
GP4MPRRS病毒结构蛋白RNAGP2GP3GP4M53ORF2ORF3ORF4ORF5ORF6ORF7
ORF2
ORF3
ORF4
ORF5ORF6ORF7AnAnORF1abORF1abAn15.1kb
GP2GP3GP4GP5MN771bp765bp537bp603bp525bp372bp750bp798bp552bp606bp522bp387bp
GP2GP3GP4GP5MNAnAnAn
AnAnAnAnmRNA1234567
PRRSVVR2332LV
ORFsandSub-genomemRNAofPRRSVORF2ORF3ORF4ORF5ORF6ORF7ORF254
PRRS诊断--(3)病毒分离
二、病料肺脏、脑、心、血清三、细胞Marc145、CL2621、PMA四、鉴定方法血清学:IFA,SN
分子生物学:RT-PCR,DIG-Prob问题:疫苗病毒株的干扰病料问题(死胎的自溶等)
PRRS诊断--(3)55
PRRS诊断--(3)病毒抗原检查
免疫组化法(McAb-SDOW17,SR30---FA免疫金、银、过氧化物酶
组织冰冻切片,PMA
原位杂交法(DIG-Prob,福尔马林固定切片)RT-PCRRT-PCR-RFLP
PRRS诊断--(3)56
PRRS诊断--(4)病毒抗体检测
免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)间接荧光抗体(IFA)试验ELISASN问题:疫苗病毒抗体的干扰
PRRS诊断--(4)57
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二、PRRSV免疫
细胞免疫二次感染持续感染
方法产生时间(天)高峰期(天)维持时间(天)IFA9-1128-35158IPMA5-935-42324ELISA9-1328-42137SN9-2870-77356体液免疫二、PRRSV免疫59
PRRSV在猪体内的分布PRRSV在猪体内的分布60
PRRSVinfectionofimmunecellsforPRRSVreplication______________________________________
PermissiveVirustitleTCID50--------------------------------------------------------------------------------------------巨噬细胞肺macrophagessubpopulation++++>107Spleenmacrophsge+++106-107Brainnicroglis++++107Monocytesalone+/-<104MM-CSF++104adherencetoendothelial++104淋巴细胞B-cells-<104T-cells-<104_____________________________________________________________________________________________
PRRSVinfec61
StemcellMonblastPromoncytesCirculating单核细胞Migrating单核细胞骨髓血液巨噬细胞Interlukine-3Granulocyte/macrophageColonystimulatingfactorMacrophagecolonyStimulatingfactor单核巨噬细胞系统Stemcell骨髓62抗体反应方法产生时间(天)高峰期(天)维持时间(天)间接免疫荧光9-1128-35158IPMA5-935-42324ELISA9-1328-42137中和试验9-2870-77356抗体反应方法63PRRSV与其它病原体的相互作用
临床资料数据表明,很多病原体与PRRSV同时存在于一个猪群或猪体。通常,由PRRSV单独感染造成的临床病理,仅表现为间质性肺炎,但临床上PRRSV引起的病理变化比较严重,说明PRRSV与其它病原体可能存在相互协同作用。
PRRSV与其它病原体的相互作用临床资料数据表明,很多病原64PRRSV与其它病原的关系PRRSV增强猪对下列病原的易感性传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)巴氏杆菌(MP)链球菌(SS)猪霍乱沙门氏菌(S.Cholerasuis)伪狂犬病毒(PRV)呼吸道冠状病毒(PRCV)流感病毒(SIV)PRRSV与其它病原的关系PRRSV增强猪对下列病原的易感性支原体与蓝耳病毒的关系支原体促进蓝耳病毒感染及加重感染的严重程度,延长蓝耳病毒持续感染的时间。支原体与蓝耳病毒的关系支原体促进蓝耳病毒感染及加重感猪呼吸道疾病综合征(PRDC)
--支原体与蓝耳病毒两种病原持续感染的猪场,肥育舍内具有发生“13-15周龄墙”、“18-20周龄墙”(PRDC)的潜在危险性两种病原对PRDC的发生具有协同和加强作用。
猪呼吸道疾病综合征(PRDC)
--病毒与病毒:Groschup等(1996)通过检查猪群中欧洲型PRRSV、猪流感病毒(SIV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)及猪副粘病毒(PPMV)抗体水平,发现:PRRSV与猪呼吸道冠状病毒、PRRSV与SIV亚型H1N1之间有重要联系。日本、美国也发现:PRRSV与SIV间有协同关系。2.病毒与细菌Zeman等(1996)分析了127个猪场的221个PRRSV病例中其它病原菌的感染情况,发现:58%病例存在严重肺部感染,感染菌包括多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、链球菌、猪副嗜血杆菌等。
病毒与病毒:68Rovira等(2002)通过实验室感染试验,即将24头5周龄猪分为4组,分别接种PRRSV、PCV-2、PRRSV+PCV-2及空白对照组。结果发现,两个病毒混合接种组猪病理变化明显加重,PCV-2核酸量明显高于PCV-2单接种感染猪,证明PRRSV感染可促进PCV2增殖。Hans等(2001)用PCV-2和PRRSV人工感染猪试验,发现PCV2可加重PRRSV引起的支主管肺炎病理变化。加拿大和日本等国发现PRRSV感染猪群中有猪2型圆环病毒存在Rovira等(2002)通过实验室感染试验,即将24头5周69二次感染
放线菌2型链球菌嗜血杆菌多杀性巴氏杆菌伪狂犬病病毒猪流感病毒二次感染放线菌70持续感染公猪:PRRSV-RNAdemonstratedinthesemenofboarsat92dpiwhentheserumamplewasnegative母猪:SeaofpigscontainsPRRSV-RNAat210dayspostfarrowing
PRRSVisolated:at157dpiafterinfection其它猪:SPFpigs,commingledwithPRRSV-seronegativepigsthatexposedtoPRRSV22weekspreviously,hadclinicalsignsofPRRSVinfection持续感染公猪:PRRSV-RNAdemons71灭活疫苗免疫效果______________________________________免疫组非免疫组---------------------------------------------------------母猪数1411仔猪总数137112每胎平均仔猪数9.710.18每胎平均健康仔猪数7.60.9每胎平均弱仔猪数12.7每胎平均木乃伊数1.16.5____________________________________________________________________________灭活疫苗免疫效果_______________72猪兰耳病国际市场疫苗
RespPRRS---德国BoehringIngelheim,Inc.PrimePacPRRS---美国Schering-PloughAnimalHealth
Suipravac---西班牙Hipra灭活疫苗---西班牙CyBlue,LaboritoriosSobrino,S.A.
猪兰耳病国际市场疫苗RespPRRS---德国Bo73灭活疫苗免疫效果______________________________________免疫组非免疫组---------------------------------------------------------母猪数1411仔猪总数137112每胎平均仔猪数9.710.18每胎平均健康仔猪数7.60.9每胎平均弱仔猪数12.7每胎平均木乃伊数1.16.5———————————————————灭活疫苗免疫效果_______________74美国(2002)报道:一个野毒株来源于RespPRRSV弱毒疫苗PRRS活疫苗株是否变异或返强?丹麦Nielsen等(2001)活疫苗怀孕3个月同源性99%以上PRRSV免疫失败?病毒基因多样性及易变性应予关注。基因序列产仔流产美国(2002)报道:一个野毒株来源于RespPRRSV弱75
活疫苗1.不能用于PRRS阴性猪场2.不能用于繁殖母猪3.不能用于种公猪警告活疫苗76
PRRS的控制
1.疫苗接种:猪体尽早用PRRS疫苗免疫,并在接触病毒前获得免疫力,则效果很好。猪群免疫失败的主要原因是其没有足够时间产生免疫力。2.加强仔猪管理:这是控制PRRS的关键之一。45—60天隔离期、21—30天气候适应期;处理粪便,防止仔猪接触PRRSV和其它病原体;繁育猪群要保持稳定,以减少成年猪之间或成年猪与其后代间PRRSV传播;分群饲养,分群哺乳3.加强检疫,及时诊断PRRS的控制1.疫苗接种:77PRRS控制系统方法第一步:加强检疫,及时诊断第二步:加强仔猪管理第三步:保持猪群相对稳定第四步:注意猪群流动和疫苗接种
PRRS控制系统方法第一步:加强检疫,及时诊断78PRRS控制系统方法第一步:加强检疫,及时诊断集中了解生猪流动区域该病血清学状况,以便了解病毒传入途径。还要评价将来引进猪只的状态及其与后备繁殖猪的关系。第二步:加强仔猪管理这是控制PRRS的关键之一。当扩大仔猪群,特别是当新生仔猪进入感染猪场时,一定要有45—60天隔离期和21—30天气候适应期。在开始30天,要进行血清PRRS抗体检测,在气候适应期,即要用疫苗。另外,要注意及时处理粪便,防止仔猪接触PRRSV和其它病原体。PRRS控制系统方法第一步:加强检疫,及时诊断79第二步:加强仔猪管理这是控制PRRS的关键之一。当扩大仔猪群,特别是当新生仔猪进入感染猪场时,一定要有45—60天隔离期和21—30天气候适应期。在开始30天,要进行血清PRRS抗体检测,在气候适应期,即要用疫苗。另外,要注意及时处理粪便,防止仔猪接触PRRSV和其它病原体。第二步:加强仔猪管理80第三步:保持猪群相对稳定繁育猪群要保持稳定,以减少成年猪之间或成年猪与其后代间PRRSV传播。分群饲养可便于猪群稳定,保持猪群免疫对控制该病也很重要。我们应认识到该病有群体效应,不仅仅会影响当前生产,而且也会影响末来群体。当然,如果哺乳期间猪存在毒血症,那么分群饲养的作用就不大。第四步:注意猪群流动和疫苗接种美国和日本已应用PRRSV疫苗及改善管理措施(如分群哺乳)控制该病。他们认为如果猪体尽早用PRRS疫苗免疫,并在接触病毒前获得免疫力,则效果很好。同时认为猪群免疫失败的主要原因是其没有足够时间产生免疫力。疫苗效果好坏,至少需观察6个月。经常改变使用不同型的疫苗,或猪群不稳及仔猪来源不同等弊大利小。第三步:保持猪群相对稳定81控制措施的争议要奌。PRRSV是抗体依懒病毒,免疫有害。使用弱毒疫苗会排毒。弱毒疫苗返强与否?弱毒与强毒的重组。控制措施的争议要奌。PRRSV是抗体依懒病毒,免疫有害。82控制措施的争议要奌。PRRSV是抗体依懒病毒,免疫有害。使用弱毒疫苗会排毒。弱毒疫苗返强与否?弱毒与强毒的重组。控制措施的争议要奌。PRRSV是抗体依懒病毒,免疫有害。83
PRRS研究中的些新热奌。
对其他动物的携带和传佈PRRSV的研究。早期的研究已证明野鸭可感染和携带PRRSV,近期美国学者(J.Brman)的研究证明:在用PRRSV标准参考毒株感染60头猪舎中的20000头苍蝇,在距此猪舍0.4、0.8、1.3、1.7、1.9KM处,分别设制捕蝇奌,在猪感染后14天中,共捕获苍蝇182只,並用PCR检测到与感染的参考PRRSV一致的RNA(ORF5),进一步的实验又证明,这些带毒蝇对猪有感染性。PRRS研究中的些新热奌。84PRRSV灭活疫苗对异源毒株的保护率差。
美国学者(H.Joo)的研究表明:在经过灭活免疫过二次的母猪中,选用2头姙娠100天和6头姙娠80-90天时采用ORF5核苷酸序例同源性为82.1-84.4%的异源毒攻击,结果8头孕猪中7头发生流产,共产死胎63只、活仔14只。而有趣的是经多亇学者的研究证明,美洲株弱毒苗免疫的母猪,用同源性仅为70%的欧洲株强毒攻击却能有效保护。这也许是PRRS弱毒苗为越来越多的养猪业主采用原因,
PRRSV灭活疫苗对异源毒株的保护率差。美国学者(H85类疫苗毒株的流行值得关注。
韩国学者研究表明:在无症状的PRRS抗体阳性猪场分离到的PRRSV经基因检测明显有别於有症状猪场分离到的PRRSV野毒,而同疫苗株有高疫同源性,故称之谓类疫苗株.用野株攻击孕猪能引起流产和产死胎,而用类疫苗株攻击则无害。目前笔者在国内发现有此类似情况,虽未采用免疫措施,未見明显PRRS固有的危害,但也发现此类猪场中由于在有PRRS有症状的种猪场买种猪,而引发PRRS暴发的,值得同类猪引场以为鉴。类疫苗毒株的流行值得关注。韩国学者研究表明:在无症86对PRRSV基因变异的研究更趋理性化。
早期的研究突出了基因的变异和可能发生重组的风险,现在的研究证明:所有RNA病毒聚合酶的误配率都很大,如脊髓灰质炎病毒的RNA聚合酶(RNA-RNA聚合酶)的误配率约为4.5×10-4或约2200个碱基有一个错误。可以推断PRRSV的15000碱基基因组中平均约有7个碱基误配。作者还认为:通常突变点出现于密码子的第三个碱基础位置(所谓不稳定位置),因此不能改变病毒的毒力或抗原性等重要的表型特征。
AAA:AAA:AAA:AAA:对PRRSV基因变异的研究更趋理性化。
早期的87病毒的变异WilliamL.Mengling(美国)通常突变不能改变病毒的毒力或抗原性等重要的表型特征,在1980年分离的一株PRRSV制备的疫苗,给猪提供的保护力,能抵抗10年后分离的高强毒株攻击。另外有多个国家的学者研究证,美洲株弱毒疫苗能有效保护基因差异较大的欧洲株的攻击。
实验证明强毒株与弱毒株在猪体内的重组可能性不大,当猪同时感染400000000TCID50的减弱(疫苗)PRRS株和40TCID50强毒株(感染后第七天第一次从血清检出),强毒株在猪体内成为优势或唯一的毒株。病毒的变异WilliamL.Menglin88PRRS的危害及防制对策采用疫苗控制本病已盛行于国内外,据美国农业部同意发布的有关信息,该国53%的猪群使用PRRS疫苗,大型猪场70%应用疫苗。在所使用的疫苗中,以弱毒疫苗居首位,高达65.5%。如同其它动物弱毒苗一样,其远期生物安全评估不同的门派之间仍有歧议,但不应阻碍该病弱毒苗的推广应用。广东省长江集团所属猪场1.6万头母猪使用奉贤兽医站研制的PRRS弱毒疫苗,历时三年,免疫厂近百万头猪,控制了PRRS危害,未发现不安全因素。PRRS的危害及防制对策采用疫苗控制本病已盛行于国内外,据美89病毒的变异WilliamL.Mengling(美国)通常突变不能改变病毒的毒力或抗原性等重要的表型特征,在1980年分离的一株PRRSV制备的疫苗,给猪提供的保护力,能抵抗10年后分离的高强毒株攻击。另外有多个国家的学者研究证,美洲株弱毒疫苗能有效保护基因差异较大的欧洲株的攻击。
实验证明强毒株与弱毒株在猪体内的重组可能性不大,当猪同时感染400000000TCID50的减弱(疫苗)PRRS株和40TCID50强毒株(感染后第七天第一次从血清检出),强毒株在猪体内成为优势或唯一的毒株。病毒的变异WilliamL.Mengling(美国90PRRS的危害及防制对策采用疫苗控制本病已盛行于国内外,据美国农业部同意发布的有关信息,该国53%的猪群使用PRRS疫苗,大型猪场70%应用疫苗。在所使用的疫苗中,以弱毒疫苗居首位,高达65.5%。如同其它动物弱毒苗一样,其远期生物安全评估不同的门派之间仍有歧议,但不应阻碍该病弱毒苗的推广应用。广东省长江集团所属猪场1.6万头母猪使用奉贤兽医站研制的PRRS弱毒疫苗,历时三年,免疫厂近百万头猪,控制了PRRS危害,未发现不安全因素。PRRS的危害及防制对策采用疫苗控制本病已盛行于国内外,91疫苗的研究和应用
美洲、欧洲和亚洲各国越来越多的兽医学者推荐使用弱毒疫苗控制PRRSV对猪群的危害(商品名:美洲株弱毒疫苗IngelvacMLV,欧洲株弱毒疫苗PorcilisPRRS)。采纳此建议的养猪业主亦越来越多。虽然,在国内外市场上都有弱毒疫苗和灭活疫苗供应,但是,一般认为弱毒疫苗效果较佳,而灭活疫苗主要用于制备自家疫苗。疫苗的研究和应用美洲、欧洲和亚洲各国越来越92西班牙—美洲株免疫、欧洲株
攻毒的试验结果组别母猪数平均产活数死胎数断奶数(28日龄)空白对照69.71.28.8攻毒对照64.23.561.8免疫组6102.88.8西班牙—美洲株免疫、欧洲株
攻毒的试验结果组别93奉贤区兽医研究所
PRRS弱毒疫苗的免疫试验结果接种剂量试验头数抗体阳性头数21日龄28日龄35日龄106.4TCID50/ml50355050105.4TCID50/ml50365050104.4TCID50/ml50362510对照5036182奉贤区兽医研究所
PRRS弱毒疫苗的免疫试验结果接种剂量94PRRSV灭活疫苗法国在一个3366头经产母猪的PRRSV感染场,采用PRRSV灭活疫苗,结果试验组较对照组虽有所改善,但是不够理想。PRRSV灭活疫苗法国在一个3366头经产95法国一PRRSV感染场采用
PRRSV灭活疫苗的试验结果对照疫苗接种次数 0234平均产活数11.511.711.811.7死胎和木乃伊1.31.21.21.1断奶仔猪数9.789.849.9410.04断奶前死亡率21.2%21.6%21.7%18.8%观察结果法国一PRRSV感染场采用
PRRSV灭活疫苗的试验结果96混合感染的控制采用PRRS弱毒疫苗免疫这是目前国内外许多兽医学者推荐的有效方法。据加拿大兽医专家实验证明,哺乳仔猪三周龄左右时接种PRRS弱毒疫苗对保育仔猪起到很显著的效果。混合感染的控制采用PRRS弱毒疫苗免疫97加拿大采用PRRS弱毒疫苗
接种三周龄仔猪的效果组别栏别仔猪数死亡率%饲料转化率日增重g药费$A11025.631.462958.19B10655.821.453094.42平均10845.731.463026.31C10971.551.413361.01D10873.231.513503.96E10732.891.253371.33F9091.981.333561.92平均10412.411.383452.06 未接种疫苗接种疫苗加拿大采用PRRS弱毒疫苗
接种三周龄仔猪的效果组别栏别98
免疫及免疫程序免疫及抗体检测:细胞灭活苗、组织灭活苗、弱毒苗。都处于试制阶段,不稳定的矛盾的较突出,抗体检测有利于判别疫苗质量优劣和免疫工作的好坏。
免疫程序(奉贤弱毒苗):种猪:甲案,小型猪场每隔四个月一次。乙案,大型场60—70胎龄一次免疫。免疫及免疫程序免疫及抗体检测:99免疫及免疫程序仔猪免疫程序:甲案,三周龄断奶,全进全出保育者, 四至五周龄免疫。乙案,三周龄首免,五周龄二免。紧急免疫:
1,全部种猪、后备种猪。2,初生仔超前免疫(实施四周)。3,二周龄首免,四周龄二免。
免疫及免疫程序仔猪免疫程序:100猪圆环病毒病猪圆环病毒分型:I型、II型猪圆环病毒致病性:新生仔猪先天性震(1994)断奶后全身消耗性综合征(1997)猪圆环病毒病猪圆环病毒分型:I型、II型101
临床检测设计方案临床调查、症状观察、病理解剖触片染色镜检细菌分离培养药敏试验基因检测兰耳病圆环病毒病毒分离培养猪肺泡巨噬细胞Marc145、PK15鸡胚接种、观察HA、HI试验治疗、消毒、免疫接种临床检测设计102
临床样品检测结果I:ORF5RT-PCRM123456789101112C临床样品检测结果I:103
RT-PCR-RFLP分析结果MRespSamplp1RT-PCR-RFLP104
猪圆病毒2型PCR检测结果
M12345C猪圆病毒2型PCR检105
临床检测初步结果兰耳病28/32链球菌+其它细菌24/32猪圆环病毒7/18血凝性病毒1/10猪传染性胸膜肺炎0/3猪噬血杆菌0/3猪副红细胞体病1/22(?)临床检测初步106预防和控制激发病因的控制改善生产技术使用抗细菌药物免疫接种预防和控制激发病因的控制107环境因子温度、灰尘、气体、噪音、光照、设备、空间、畜群、饲养员、卫生动物/环境的相互作用动物的性情行为学的生理学的免疫学的应答反应行为性的功能性的病理性的环境因子动物/环境动物的性情应答反应108环境因子对猪细菌性疫病的影响疾病名称温度拥挤度卫生社区气体灰尘大肠杆菌病+++
猪痢疾
+
支猪原体肺炎++
+++萎缩性鼻炎
++
++放线菌胸膜肺炎
++
乳腺炎
+
钩端旋体病
+
链球菌脑膜炎++
环境因子对猪细菌性疫病的影响疾病名称温度拥挤度卫生社区气体灰109不同生长发育阶段猪的适宜温度范围_________________________________________生产阶段温度范围(℃)妊娠母猪15~24泌乳母猪15~21仔猪(未断奶)28~32断奶仔猪25~32
21~27生长猪15~24育成猪14~21_________________________________________不同生长发育阶段猪的适宜温度范围110气温变化会加重猪呼吸系统疾病高温会导致母猪发病,D‘Allaire等(1996)用130头母猪做了为期7天的高温死亡率试验。在3天试验期间,母猪死亡率可达全年死亡率的10%。低温本身不会影响猪的健康状况,而且,许多试验表明,猪可以靠自身机制抵御寒冷。然而气温骤变会诱发猪群疾病。昼夜温差变化达到12℃就会对生长猪造成应激。
气温变化会加重猪呼吸系统疾病111一般地,单纯的低温不会影响健康。只有当生物病原体存在时才会发生呼吸道疾病。但气温的剧烈变化,会引起病原体数量和动物抵抗力的改变而加速疾病的发生。例如:气温从4~30℃这一温度变化的应激会加速猪的Aujeszky疾病的发生,并加重病情。断奶仔猪在透风或低温环境下与对照组相比,易感腹泻、咳嗽、喷嚏和蓝耳病等疾病。
112猪舍中的粉尘是具有生物活性的,与一般的空气中的粉尘不同。猪舍中的粉尘多来自饲料、粪便、动物皮、毛、昆虫和微生物。因而由多种生物体组成,如真菌,内源毒素,有毒气体,以及其它一些有害的病原菌。粉尘微生物对人畜危害极大。高浓度的粉尘会引起猪群的呼吸道疾病,如哮喘、咳嗽和肺病,因而要通过改善猪舍管理,如饲料中适当添加油脂等措施来降低粉尘。
粉尘对猪病的影响猪舍中的粉尘是具有生物活性的,与一般的空气中的粉尘不113
粉尘是臭味的载体
当臭味以自由分子的形式散发到空气中,会被迅速稀释而减小臭味的浓度。然而,一旦臭味分子粘接在粉尘颗粒表面,就会被携带到很远的地方,而且存在的时间更长。例如,猪舍中的器具被拿到舍外后,臭味由于粉尘载体的存在而持续一两个月。因此,减少粉尘可有效地减少猪舍中的臭味。有试验表明,减少80%的粉尘,会减少30%氨和硫化氢。粉尘是臭味的载体114氨气,二氧化碳,硫化氢,甲烷和一氧化碳是影响生产性能和造成疾病的主要有害气体。硫化氢和一氧化碳甚至可以直接造成猪的死亡,当空气中氨的浓度达到50~75ug/l,会对仔猪抗肺部疾病的能力产生不良影响。只要氨气浓度小于25ul/l,就不会对畜场人员造成不适的感觉。应尽量使氨浓度保持在10ul/L以下。
气体对猪病的影响氨气,二氧化碳,硫化氢,甲烷和一氧化碳是影响生产性能和造成疾115湿度对猪病的影响水蒸气,通常容易被忽略。空气湿度为60%~80%时,病原体不易生殖。呼吸系统疾病常与高湿相关,高温和高湿会使动物温度调节中枢功能的下降而造成的热应激。故猪舍应尽量保持干燥环境。
湿度对猪病的影响116牧场卫生猪生长环境内病原体的控制是管理的关键。引种、全进全出和早期隔离断奶,都应有相应管理措施,都需要良好的卫生来控制病原体。病原体的最重要来源是其它猪的粪便。经常对猪舍和器具进行清洗和消毒,可有效地减少猪舍内的病原体。Morgan-Jones(1987)强调清洗过程的四个步骤:1清除所有污物,特别是有机物质2消毒3消毒后,应用清水冲洗
4猪舍在每次使用前空余一段时间牧场卫生117预防和控制激发病因的控制
改善生产技术
多区同步断奶生产全进全出使用抗细菌药物
细菌敏感性感染类型给药途经免疫接种预防和控制激发病因的控制118
PRRS诊断与预防
PRRS119猪呼吸道疾病综合征
--蓝耳病毒的危害免疫抑制,猪抵抗力下降流产率升高,产活仔数减少仔猪、小猪、母猪、种公猪死淘率升高种(公、母)猪繁殖力降低仔猪、生长肥育猪生长缓慢或停滞猪呼吸道疾病综合征
--蓝耳病毒的危
病原因子流感病毒、副黏病毒猪瘟病毒兰耳病伪狂犬病链球菌病猪传染性胸膜肺炎猪噬血杆菌猪圆环病毒猪副红细胞体病
121
PRRS概况
感染母猪流产、死胎、弱仔断奶仔猪呼吸道症状及死亡母猪产仔数和受胎率降低,小猪发育不良、生产性能及免疫力降低等尚无有效对策分布广泛
PRRS概况
122
PRRS概况
已发现有PRRSV的国家:美洲:美国(1987)、加拿大(1987)欧洲:荷兰(1991)、英国、捷克、波兰、斯洛文尼亚、丹麦、德国、西班牙亚洲:日本(1994)、南韩、菲律宾、中国台湾和大陆
PRRS概况
123
PRRS概况
美国:阳性群个体阳性率1987年:临床上发现1985年:3.8%9。6%1986年:40%20.8%1987年:37.5%32.4%1988年:63.9%47.6%1989年:83.3%51.7%1990年:18个州87个农场猪群阳性率达82.7%。目前:40-50%猪群感染欧州:目前有50%以上猪群感染
PRRS概况
1241999~2003年猪繁殖与呼吸综合征抗体检测结果
2003年83.3%猪场阳性率2003年:55.8%(阳性场:64.8%)
样品阳性率1999~2003年猪繁殖与呼吸综合征1251996年来PRRS在我国的分布1996年来PRRS在我国的分布126
一、猪繁殖和呼吸综合征诊断
临床症状
病理变化病毒分离病毒抗原检测病毒抗体检测一、猪繁殖和呼吸综合127
PRRS诊断--(1)临床症状
1.繁殖猪群:急性发病期死亡、厌食、发热。无乳症、昏睡、皮肤变色。发病5%~50%。持续4~5个月,配种后22~109天流产,早产和产期延迟。仔常出现一窝内有死胎、木乃尹化胎儿,组织自溶胎儿、弱仔和健康仔。母猪还可出现延迟发情、持续性不发情。2.仔猪呼吸道症状:仔猪断乳前后发病率和死亡率升高,仔猪精神不振,“八”字腿站姿,生后1周内死亡,呼吸困难,咳嗽、厌食,皮肤损伤变兰,结膜炎,眼窝水肿,新生猪脐带出血,淤血红肿.3.公猪:症状与母猪相同;性欲降低、精子数量和活力降低。4.其它:健康状况不佳可持续整个育成期,零星发生死亡。对育成猪的影响难以估计。
Don等(1996)报道在PRRS暴发期间和之后出生的仔猪肺部病变发生率从30%增加到70%,仔猪年生产能力降低5%~20%。但是大多数育成猪群可能感染PRRS而无临床症状。
PRRS诊断--(1)128临床症状多数猪场表现PRRSV的亚临床感染或慢性感染PRRSV侵袭的保育舍仔猪继发细菌或并发病毒感染则出现咳嗽、呼吸急促者增多肺炎、局限性肺炎
腹泻率升高(20%)萎缩性鼻炎、链球菌病、流感严重性增加
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)临床症状猪繁殖与呼早产的1日仔猪早产的一日龄仔猪早产的1日仔猪早产的一日龄仔猪130PRRS诊断与预防131PRRS诊断与预防132PRRS诊断与预防133PRRS诊断与预防134
135
136
137
138
139PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防放线杆菌胸膜肺炎放线杆菌胸膜肺炎支原体肺炎支原体肺炎
PRRS诊断--(2)病理变化
1.肺:小叶区域变红。大面积肺炎,呈间质性肺炎,主要局限于肺泡内,肺泡间隔增厚,含大量巨噬细胞、少量淋巴细胞和2型肺细胞增生。肺泡腔充满炎性细胞和坏死细胞碎片。肺泡巨噬细胞减少(从90%减少到35%)。2.流产胎儿:动脉炎、心肌炎和脑炎(血管周围出现巨噬细胞和淋巴细胞浸润)。3.其它:仔猪、育肥猪眼睑水肿,仔猪皮下水肿,体表淋巴结肿大,心包积液、水肿。有的流产胎儿和死胎也出现皮下水肿和心包积液。
PRRS诊断--(151猪繁殖与呼吸综合征
病理变化
新生仔猪及保育舍仔猪肺脏呈现:轻度至重度、多灶性至弥漫性、棕褐色斑点病变,不塌陷,有弹性间质性肺炎,单核细胞、肥大和增生的2型肺细胞、
猪繁殖与呼吸综合征PRRS诊断与预防153PRRS诊断与预防154PRRS诊断与预防155PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防PRRS诊断与预防159PRRS诊断与预防160
161
162
163
164猪繁殖与呼吸综合征
临床诊断14天内,出现如下3个指标:流产或/和早产8%死产胎儿20%产仔数出生后1周内仔猪死亡率25%猪繁殖与呼吸综合征
PRRS诊断--(3)病毒分离
动脉炎病毒科(LDV,EAV,SHFV)球形,45-83nm
(25-35nm)囊膜不稳定
一、病毒特性:PRRS诊断--(3)166PRRS病毒分类欧洲型PRRSV美洲型PRRSV
Varygenomically(genotype)Partlycross-reactionserologically突变重组PRRS病毒分类欧洲型PRRSV167PRRS病毒血清型和基因型欧洲型PRRSV:
欧洲;加拿大;日本美洲型PRRSV:美洲;丹麦、斯洛文尼亚;亚洲
PRRS病毒血清型和基因型欧洲型PRRSV:168
美洲型毒株基因亚型PRRSV野毒株在有限区域或时间内很容易发生基因变异或重组基因亚型有多少?据GP5基因序列,美洲株至少分为6个基因亚型Andreyev等(1997)日本1991~1999年分离的37个野毒株分成了14个不同基因组。Itou等(2001)美洲型毒株基169同一年份具有不同型毒株;同一农场有不同型毒株Dee等(2001)在一个有PRRSV慢性感染的1750头母猪的种猪场,经过对不同时期仔猪血清内PRRSV基因检测和病毒分离,发现该场PRRSV有A、B、C3个基因亚型,不同基因亚型PRRSVORF5基因差异为5.8%~11%,同一基因亚型内毒株基因同源性为98.%~99%主导基因亚型?如1-3-2-1RFLP类型,为日本主要流行毒株欧洲型毒株和美州型毒株间的重组概率比同型毒株间的重组概率小1万倍(VanVugt等,2001)。同一年份具有不同型毒株;同一农场有不同型毒
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