2023学年柳州市柳江中学高考生物押题试卷（含答案解析）

2023学年高考生物模拟试卷注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．有关核酸是遗传物质证据的实验中，下列叙述正确的是（）A．S型菌和R型菌的结构不同是基因选择性表达的结果B．S型菌的DNA单独侵染小鼠不会使小鼠得败血症C．烟草花叶病毒的RNA单独侵染烟草，烟草不会出现病斑D．噬菌体侵染细菌过程中，细菌裂解后子代仍旧是噬菌体，这种现象是遗传变异的结果2．下列各项的结果中，不可能出现3：1比值的是（）A．15N标记的DNA在14N培养液中复制三次，子代中不含15N与含15N的DNA数量之比B．黄色圆粒豌豆（YyRr）与黄色圆粒豌豆（YyRR）杂交子代的性状分离之比C．酵母菌同时进行需氧呼吸与厌氧呼吸，并消耗相同葡萄糖时，吸入的O2与产生的CO2总量之比D．动物的一个初级卵母细胞经减数分裂形成的极体与卵细胞的数目之比3．蛋白质分子的功能与其结构相关，下列叙述正确的是（）A．酶与底物结合后，两者的形状均发生改变B．酶在最适温度下其空间结构最稳定C．受体与递质结合后形状不会发生改变D．载体与被转运分子结合后发生形状改变需要消耗ATP4．某T2噬菌体DNA含1000个碱基对，某科学工作者用35S标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌，最终形成100个子代T2噬菌体。下列有关叙述错误的是（）A．子代T2噬菌体中含35S的占1/50B．T2噬菌体利用大肠杆菌的RNA聚合酶转录形成RNAC．T2噬菌体繁殖过程中消耗脱氧核苷酸1．98×105个D．T2噬菌体利用大肠杆菌的核糖体合成自身的蛋白质5．经过半个世纪的改造，劳动者将塞罕坝荒漠改造成了绿色林场，创造了荒漠变林场的人间奇迹。下列有关叙述错误的是（）A．在一定条件下，人类活动可改变群落演替的方向和速度B．荒漠生态系统的组成成分是生产者、消费者和分解者C．随着森林覆盖率的上升，塞罕坝林场固定的太阳能逐渐增加D．森林对水土的保持作用体现了生物多样性的间接价值6．某雄性动物的基因型为AaBb。下图是其一个精原细胞减数分裂过程中的两个不同时期细胞的分裂图像。相关叙述正确的是（）A．甲细胞处于减数第二次分裂，称为次级精母细胞，细胞中含有6条染色单体B．四分体时期发生染色体结构变异，导致A和a出现在姐妹染色单体同一位置C．图示该精原细胞整个减数分裂过程中，细胞中最多时可能含有四个B基因D．该细胞经减数分裂形成的四个精子，其基因型可能分别为AB、Ab、ab、aB7．生物膜将真核细胞内的空间包围分隔成不同区域，使细胞内的不同代谢反应在这些区域中高效有序进行。下列关于这些区域的叙述，正确的是（）A．由双层膜包围成的区域均可产生ATP，也可消耗ATPB．口腔上皮细胞内由单层膜包围成的区域的种类比叶肉细胞的少C．植物细胞的色素分子只储存于双层膜包围成的区域中D．蛋白质、核酸、糖类、脂质的合成均发生于由膜包围成的区域中8．（10分）关于遗传和变异，下列说法错误的是（）A．基因突变的方向与环境没有明确的因果关系B．基因重组虽然不能产生新基因，但可以形成多样化基因组合的子代，有利于适应多变的环境，对生物进化有重要意义C．生物体的遗传与变异，往往以细胞内基因的传递和变化为基础D．猫叫综合征是人的第5号染色体缺失引起的遗传病二、非选择题9．（10分）癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：α链：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β链：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'图1（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成____________________作为模板；设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过____________________技术扩增目的基因。（2）选用图1中的两种名称分别为____________________的限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有____________________等。（3）而后一定温度下，与经过处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____________培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。（4）将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有____________________。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与____________________发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_________________________。10．（14分）环境污染物多聚联苯（C12H10-xClx）难以降解，受其污染的土壤中常有重金属污染同时存在。研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。回答下列问题：（1）为了从富含多聚联苯的环境中分离联苯降解菌，培养基中加入多聚联苯作为__________，该培养基属于__________（填“选择”或“鉴定”）培养基。（2）若要对所分离的菌种进行计数，除显微镜直接计数法以外还常用_______________法接种来进行活菌计数，其原理是__________________________。（3）若从联苯降解菌中分离并得到纯度较高的联苯水解酶（蛋白质），分离该酶常用的方法是_______法，采用该方法先分离出的是相对分子质量______（填“较大”或“较小”）的蛋白质。（4）联苯降解酶在实验室里的降解率很高，但是实际污染环境的治理中降解率很低，这可能是因为________________。11．（14分）某种细菌可以分解石油残存物(含有C、H、O元素)，现要分离、培养该细菌，操作步骤为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布样品到培养基→选择菌落。请据此回答：（1）细菌与真菌最主要的区别在于：细菌___________________________________。（2）石油残存物可以为该种细菌提供的营养物质是________________，分离该细菌的培养基从功能上叫做_____________培养基。（3）取样时用到的一切工具均需要__________________。梯度稀释、涂布样品到培养基则必须在_____________________(填场所)进行。（4）若需要对细菌计数，常用的简便方法是_______________，该方法测得的数目往往比实际值________________(填“大”或“小”)。12．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图1所示，图2、图3分别表示了干扰素基因及质粒的相关信息。（1）在图1治疗过程中是否体现细胞的全能性____（是/否），为什么？________________________。（2）图1步骤③将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有__________________。（3）据图2、图3，对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用的限制酶组合为________________。（4）为了得到实验所需的大量干扰素基因，研究人员利用PCR技术进行扩增。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，因此可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_____________作为引物。若要将1个干扰素基因复制4次，则需要在缓冲液中至少加入_______个引物。（5）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发_____________色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，可以采用_____________方法进行检测。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【答案解析】

R型和S型肺炎双球菌的区别是前者没有荚膜（菌落表现粗糙），后者有荚膜（菌落表现光滑）。

由肺炎双球菌转化实验可知，只有S型菌有毒，会导致小鼠死亡，S型菌的DNA才会使R型菌转化为S型菌。

肺炎双球菌体内转化实验：R型细菌→小鼠→存活；S型细菌→小鼠→死亡；加热杀死的S型细菌→小鼠→存活；加热杀死的S型细菌+R型细菌→小鼠→死亡。【题目详解】A、S型菌与R型菌的结构不同是由于遗传物质有差异而表现的，A错误；B、用S型菌的DNA单独去侵染小鼠，小鼠细胞膜具有选择透过性，且小鼠与S型菌亲缘关系较远，S型菌的DNA不能注入小鼠体内，不会使小鼠得败血症，B正确；C、由于烟草花叶病毒的RNA是遗传物质，所以用从烟草花叶病毒分离出的RNA侵染烟草，烟草会感染出现病斑，C错误；D、噬菌体侵染细菌过程中，细菌裂解后子代仍旧是噬菌体，这种现象是遗传的结果，D错误。故选B。2、C【答案解析】

1、基因分离的实质是减数分裂形成配子时，控制一对相对性状的等位基因随着同源染色体的分开而分离，分别进入子细胞中；2、酵母菌细胞有氧呼吸的反应式是：C6H12O6+6O2+6H2O6CO2+12H2O+能量;无氧呼吸反应式是C6H12O62C2H5OH+2CO2+少量能量；3、卵细胞的形成过程：1个卵原细胞减数第一次分裂间期1个初级卵母细胞→减数第一次分裂1个次级卵母细胞+1个极体→减数第二次分裂1个卵细胞+3个极体；4、DNA复制方式为半保留复制。【题目详解】A、15N标记的DNA在14N培养液中复制三次，根据DNA半保留复制特点，子代中含15N的DNA分子为2个，所以不含15N的DNA与含15N的DNA数量比=(8-2):2=3:1；A正确；B、Yy×Yy→3Y_、1yy，Rr×RR→1R_，所以后代表现性为黄色圆粒：绿色圆粒=3：1，B正确；C、酵母菌进行有氧呼吸时分解1mol葡萄糖需消耗6molO2，并生成6molCO2，进行无氧呼吸时消耗1mol葡萄糖生成2molCO2，所以有氧呼吸与无氧呼吸消耗葡萄糖量相同时吸入O2的量与两者产生的CO2总量之比6:(6+2)=3:4，C错误；D、动物的一个初级卵母细胞经减数分裂形成1个卵细胞和3个极体，因此形成的极体与卵细胞的数目之比3:1，D正确。故选C。【答案点睛】结合基因分离的实质、有氧呼吸的过程、卵细胞的形成和DNA的复制方式分析选项是解题的关键。3、A【答案解析】

蛋白质的结构多样性决定了蛋白质功能的多样性，蛋白质的功能包括：①构成细胞和生物体的重要物质，即结构蛋白，如羽毛、头发、蛛丝、肌动蛋白；②催化作用：如绝大多数酶；③传递信息，即调节作用：如胰岛素、生长激素；④免疫作用：如免疫球蛋白（抗体）；⑤运输作用：如红细胞中的血红蛋白。【题目详解】A、酶与底物结合后，酶和底物的形状均会发生改变，A正确；B、最适宜温度条件下，酶活性最高，但是稳定性较低，而较低温度下酶的结构较稳定，B错误；C、受体与递质结合后形状会发生改变，C错误；D、载体与被转运分子结合后发生形状改变不需要消耗ATP，D错误。故选A。4、A【答案解析】

本题考查噬菌体侵染细菌实验、DNA分子复制等知识，要求考生识记噬菌体侵染细菌的过程；识记DNA分子复制方式，能运用其延伸规律进行计算。噬菌体DNA由1000个碱基对组成，其中腺嘌呤占全部碱基的20%，即A=1000×2×20%=400个，根据碱基互补配对原则，A=T=400个，C=G=600个。【题目详解】A、T2噬菌体侵染大肠杆菌时，蛋白质外壳没有进入大肠杆菌中，则子代T2噬菌体不含35S，A错误；B、T2噬菌体侵染大肠杆菌时，只有DNA进入大肠杆菌，则其转录形成RNA时需要的RNA聚合酶来自大肠杆菌，B正确；C、DNA复制是半保留复制，则子代噬菌体合成需要的脱氧核苷酸数量为(100-1)×2000=1．98×105，C正确；D、T2噬菌体属于病毒，无核糖体，侵入大肠杆菌内利用大肠杆菌的核糖体合成自身的蛋白质，D正确。故选A。5、B【答案解析】

种群是指占有一定空间和时间的同一物种的集合体，群落是指在一定空间内所有生物种群的集合体，生态系统是由生物群落（生产者、消费者、分解者）及非生物环境（无机物、有机物、气候、能源）所构成的一个生态学功能系统。群落演替是指随着时间的推移一个群落被另一个群落代替的过程。可分为原生演替与次生演替。生物多样性包括生态系统多样性、遗传多样性、物种多样性。关于生物多样性的价值，科学家一般概括为以下三方面：一是目前人类尚不清楚的潜在价值，二是对生态系统起着重要调节功能的潜在价值（也叫做生态功能，如森林和草地对水土的保护作用，湿地在蓄洪防旱、调节气候等方面的作用），三是对人类有食用、药用和工业原料等实用意义的，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的直接价值。【题目详解】A、在一定条件下，人类活动可以促进演替也可以破坏演替，可改变群落演替的方向和速度，A正确；B、荒漠生态系统的组成成分包括生物成分和非生物成分，生物成分是生产者、消费者和分解者，B错误；C、随着森林覆盖率的上升，生产者增多，生产者固定的太阳能逐渐增加，C正确；D、森林对水土的保持作用体现了生物多样性的间接价值，D正确。故选B。6、D【答案解析】

分析题图：图示是其一个精原细胞减数分裂过程中的两个不同时期细胞分裂图象，这两个细胞都不含同源染色体，前者出于减数第二次分裂前期，后者处于减数第二次分裂末期。【题目详解】A、甲细胞中含4条染色体，每条染色体含有2条染色单体，因此该细胞含有8条染色单体，A错误；B、四分体时期染色体发生交叉互换，由此引起的变异属于基因重组，B错误；C、由于该细胞的基因型是AaBb，只含有1个B基因，所以在减数分裂过程中，由于复制，细胞中最多含有两个B基因，C错误；D、该细胞经由于发生了交叉互换，所以减数分裂形成的四个精子，其基因型分别为AB、aB、Ab、ab，D正确。故选D。【答案点睛】本题需要考生分析出图中细胞所处时期，关键点是看出细胞发生了交叉互换。7、B【答案解析】

1．生物膜系统：细胞中的细胞器膜、细胞膜和核膜等结构共同构成了细胞的生物膜系统。2．生物膜系统功能如下：（1）细胞膜不仅使细胞具有一个相对稳定的内部环境，同时，在细胞与外部环境进行物质运输、能量转换和信息传递的过程中起着决定性作用；（2）许多重要的化学反应都在生物膜上进行，这些化学反应需要酶的参与，广阔的膜面积为多种酶提供了大量的附着位点；（3）细胞内的生物膜把各种细胞器分隔开，如同一个小小的区室，这样就使得细胞内能够同时进行多种化学反应，而不会互相干扰，保证了细胞生命活动高效有序的进行。【题目详解】A、由双层膜包围成的区域包括线粒体、叶绿体和细胞核，其中叶绿体和线粒体均可产生ATP，也可消耗ATP，但细胞核只能消耗ATP，A错误；B、口腔上皮细胞内进行的代谢比较简单，而叶肉细胞担负着制造有机物的功能，根据结构与功能相适应的观点推测口腔上皮细胞内由单层膜包围成的区域的种类比叶肉细胞的少，B正确；C、植物细胞的色素分子存在于液泡和叶绿体中，但只有叶绿体是双层膜包围成的区域，C错误；D、蛋白质的合成发生在核糖体上，核糖体是无膜结构的细胞器，D错误；故选B。8、D【答案解析】

可遗传的变异包括基因突变、基因重组和染色体变异：（1）基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失或替换，这会导致基因结构的改变，进而产生新基因；（2）基因重组是指在生物体进行有性生殖的过程中，控制不同性状的非等位基因重新组合，包括两种类型：①自由组合型：减数第一次分裂后期，随着非同源染色体自由组合，非同源染色体上的非等位基因也自由组合；②交叉互换型：减数第一次分裂前期（四分体），基因随着同源染色体的非等位基因的交叉互换而发生重组。此外，某些细菌（如肺炎双球菌转化实验）和在人为作用（基因工程）下也能产生基因重组；（3）染色体变异包括染色体结构变异（重复、缺失、易位、倒位）和染色体数目变异。【题目详解】A、基因突变是不定向的，与环境没有明确的因果关系，A正确；B、基因重组虽然不能产生新基因，但可以形成多样化基因组合的子代，从而使得后代有了更大的变异性，有利于适应多变的环境，对生物进化有重要意义，B正确；C、生物体的遗传与变异，往往以细胞内基因的传递和变化为基础，进而表现出生物体性状上的差异，C正确；D、猫叫综合征是人的第5号染色体部分缺失引起的遗传病，属于染色体结构变异，D错误。故选D。二、非选择题9、cDNAPCRXhoIEoRI启动子、终止子、复制原点卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗体作为对照【答案解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因采用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA采用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质采用抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【题目详解】（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA）。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，可以mRNA为模板反转录形成cDNA；由于PCR技术利用的是DNA分子复制的原理，所以用该cDNA进行PCR技术扩增短时间内可以获得大量的目的基因。（2）分析图1中碱基序列，α链上有“—CTCGAC—”识别序列，β链上有“—GAATTC—”碱基识别序列，与图2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的识别序列相同。故选用XhoI限制酶和EoRI限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建基因表达载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。（3）根据第（2）题可知，基因表达载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有卡那霉素的培养基，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌。（4）基因表达的产物是蛋白质，一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，可以检测细胞膜表面是否具有PD-1基因表达的PD-1蛋白。为判断其是否具有生物学活性和功能，可采用抗原—抗体杂交技术，即从裂解293T细胞中，提取PD-1蛋白看能否与PDL-1发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。为了增加实验的可信度，还需要设置对照实验，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，因为不含PD-1基因，所以“PD-1与PDL-1信号通路”不会阻断。【答案点睛】题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识在新的情景材料下分析运用。10、唯一碳源选择稀释涂布平板在稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落来源于（稀释液中的）一个活菌凝胶色谱较大实际污染环境中多聚联苯不是唯一碳源，或其他环境条件导致联苯水解酶的活性降低【答案解析】

1、培养基按功能分：选择培养基：培养基中加入某种化学成分根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率，如加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌；鉴别培养基：加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别和区分菌落相似的微生物，如伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌。2、凝胶色谱法的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。【题目详解】（1）为了从富含多聚联苯的环境中分离联苯降解菌，应该用以多聚联苯作为唯一碳源的选择培养基。（2）在对所分离的菌种进行计数时，除用显微镜直接计数法以外还常用稀释涂布平板法接种来进行活菌计数，因为在稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落可认为来源于（稀释液中的）一个活菌。（3）纯化该酶常用的方法是凝胶色谱法，该方法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此采用该方法先分离出分子质量较大的蛋白质。（4）由于在实际污染环境中多聚联苯不是唯一碳源，或其他环境条件导致联苯水解酶的活性降低，因此会出现联苯降解酶在实验室里的降解率很高，但是实际污染环境的治理中降解率很低的现象。【答案点睛】本题考查微生物的分离和培养、蛋白质的提取和分离等知识，要求考生识记培养基的种类及功能，掌握平板划线法的具体操作；识记蛋白质提取和分离实验的原理，能结合所学的知识准确答题。11、没有以核膜为界限的细胞核碳源选择灭菌酒精灯火焰旁稀释涂布平板法小【答案解析】

常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；微生物的分离是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要环节。土壤中的微生物很多，要从土壤中获得分解石油的细菌，接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落，用途：一般多用于从菌种的纯化；稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞，计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。【题目详解】（1）原核生物和真核生物的本质区别是有无以核膜为界的细胞核，细菌属于原核生物，真菌属于真核生物，因此细菌与真菌相比的区别在于细菌没有以核膜为界限的细胞核。（2）微生物的生长需要碳源、氮源、水和无机盐等，石油可为该细菌的生长繁殖提供碳源。分离细菌的培养基从功能上属于选择培养基。（3）微生物培养需要无菌环境，因此取样时用到的一切工具需要进行灭菌处理，使用稀释涂布平板法对微生物进行分离培养时，梯度稀释、涂布样品到培养基等操作需要在酒精灯火焰旁进行。（4）对细菌计数，常用的简便方法是稀释涂布平板法，由于两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落，因此该方法统计到的菌落数往往比实际值偏小。【答案点睛】本题考查微生物的分离和培养、测定某种微生物的数量等知识，要求考生识记培养基的成分；能采用稀释涂布平板法对微生物进行计数，并