新第十一章：抗生素类药物的分析课件

6h第十六章抗生素类药物的分析

TheAnalysisofAntibioticdrugs

6h第十六章抗生素类药物的分析

TheAnalysiso1青霉素的发现者是英国细菌学家弗莱明。1928年的一天，弗莱明在他的一间简陋的实验室里研究导致人体发热的葡萄球菌。由于盖子没有盖好，他发觉培养细菌用的琼脂上附了一层青霉菌。这是从楼上的一位研究青霉菌的学者的窗口飘落进来的。使弗莱明感到惊讶的是，在青霉菌的近旁，葡萄球菌忽然不见了。这个偶然的发现深深吸引了他，他设法培养这种霉菌进行多次试验，证明青霉素可以在几小时内将葡萄球菌全部杀死。

葡萄球菌青霉素的发现者是英国细菌学家弗莱明。葡萄球菌2来源发酵、半合成发酵提、纯来源发酵、半合成发酵提、纯3

本章内容第一节概述第二节-内酰胺类抗生素的分析第三节氨基糖苷类抗生素的分析第四节四环素类抗生素的分析第五节抗生素类药物中高分子杂质

的检查本章内容第一节概述第二节-内酰胺类抗生素的分析第41.纯度较低：三多（同系物、异构体、降解物或聚合物）2.活性组分的变异(组成或比例)：3.多数不稳定：一、抗生素自身的特点第一节概述1.纯度较低：2.活性组分的变异(组成或比例)：3.多数不稳5【检查】【含量测定】【性状】【鉴别】二、抗生素分析的特点【检查】【含量测定】【性状】【鉴别】二、抗生素分析的特点6来源发酵、半合成、全合成原料药定量生物学法(管碟法)HPLC【含量测定】来源发酵、半合成、全合成原料药定量生物学法(管碟法)HPLC7RS生物学法(管碟法)：RS生物学法(管碟法)：8

1.水分测定:

2.有机溶剂残留量

（一）一般杂质检查：

【检查】

3.安全性检查：生物试验1.水分测定:（一）一般杂质检查：【检查】9①无菌：

检查药品中有无杂菌污染℃（+）（-）①无菌：检查药品中有无杂菌污染℃（+）（-）10②细菌内毒素(引起热原反应的主要物质)：鲎G-分子（+）（-）L=？②细菌内毒素(引起热原反应的主要物质)：鲎G-分子（+）（-11③热源:

控制药品中的致热杂质③热源:控制药品中的致热杂质12④降压：

检查有降压作用的杂质④降压：检查有降压作用的杂质13⑤毒性试验:

控制药品中的毒性杂质⑤毒性试验:控制药品中的毒性杂质14

（二）特殊杂质检查：

【检查】①晶体检查：IR、X-射线衍射法、DTA

②已知杂质③有关物质④高分子聚合物（二）特殊杂质检查：【检查】①晶体检查：IR、X-射线衍15β-内酰胺大环内酯氨基糖苷四环素三、抗生素的分类

β-内酰胺大环内酯氨基糖苷四环素三、抗生素的分类161.-内酰胺类抗生素的结构与性质第二节-内酰胺类抗生素的分析3.【含量测定】：R-HPLC阴离子对试剂，离子抑制剂、扫尾剂4.【检查】：水分测定、晶型检查3.原料药与制剂分析异同物理常数、含量测定、有关物质检查检测波长为何不同？2.【鉴别】：羟肟酸铁反应、茚三酮反应本章内容&要求1.-内酰胺类抗生素的结构与性质第二节-内酰胺类抗生17青霉素类头孢菌素类碳青霉烯类亚胺培南R＝－H

美洛培南R＝－CH3一、结构与代表性药物青霉素类头孢菌素类碳青霉烯类亚胺培南R＝－H美洛培南R＝－18新第十一章：抗生素类药物的分析课件19新第十一章：抗生素类药物的分析课件20

①酸性

＊有羧基，具有酸性

＊pKa值在2.5～2.8之间

＊与碱成盐

如：青霉素G钠、青霉素G钾等二、-内酰胺类抗生素的主要性质①酸性二、-内酰胺类抗生素的主要性质21②旋光性：②旋光性：22＊青霉素类母核没有共轭系统，没有紫外吸收。＊侧链中有苯环取代基的药，在紫外区也有吸收。③紫外吸收有共轭体系：（O＝C－N－C＝C）在260nm处有最大吸收。无共轭体系，无紫外吸收。＊青霉素类母核没有共轭系统，没有紫外吸收。③紫外吸收有共轭23氨苄西林阿莫西林

④

IR氨苄西林阿莫西林④IR24⑤显色反应：◆羟肟酸铁反应⑤显色反应：◆羟肟酸铁反应25◆各种盐的鉴别◆硫酸及硫酸-甲醛反应◆硫酸-变色酸反应◆与茚三酮反应：α氨基酸结构◆各种盐的鉴别◆与茚三酮反应：α氨基酸结构261.不能产生羟肟酸铁反应的化合物（）单选题A.

B.

C.

D.

1.不能产生羟肟酸铁反应的化合物（）单选题A.B.C.272.

能与茚三酮试液反应的化合物（）A.

B.

C.

D.

2.能与茚三酮试液反应的化合物（）A.B.C.D.28氨苄西林阿莫西林3.IR氨苄西林阿莫西林3.IR29头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）显色剂？色谱条件：离子对试剂？离子抑制剂？扫尾剂？分离度？P421P417-420头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）显色剂？色谱条件：30要求：1.分别写出Ch.p与USP色谱条件与系统适用性试验要求。2.Ch.p系统适用性试验加头孢克洛α-3异构体目的？3.USA流动相加戊烷磺酸钠与三乙胺的目的？

【含量测定】例：头孢克洛的含量测定（P421）要求：【含量测定】例：头孢克洛的含量测定（P421）311.色谱条件：固定相：流动相：检测器：ChP：C18PH3.4磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（92:8）UV-254nm固定相：流动相：检测器：USP：PH2.5±0.1,戊烷磺酸钠-三乙胺-甲醇C18UV-254nmH+1.色谱条件：固定相：流动相：检测器：ChP：C18PH3.322.系统适用性试验：n、R、T、RSD对照品3.测定法：（按无水物计≥95.0%）RS2.系统适用性试验：n、R、T、RSD对照品3.测定法：（按33小结：-内酰胺类抗生素的含量测定R-HPLC离子抑制剂离子对试剂扫尾剂（三乙胺、乙腈等）R？入？小结：-内酰胺类抗生素的含量测定R-HPLC离子抑制剂离子34头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）容量分析？P421P417-420264nm254nm（等度）220nm（梯度）264nm(UV)头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）容量分析？P42135第一法：费休氏法【检查】：水分（3.0%～6.5%）ChP（2015）四部第二法：烘干法第三法：减压干燥法第四法：甲苯法第五法：GC（热导检测器）第一法：费休氏法【检查】：水分（3.0%～6.5%）ChP（36计算：反应式：滴定管：溶剂：CH3OH(V-V0)T1935KarlFischer结晶水、吸附水、游离水第一法：费休氏法（P127

）非水滴定法：计算：反应式：滴定管：溶剂：CH3OH(V-V0)T193537青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）268nm268nm溶解度总论？P417-420268nm青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）268nm26838第一法：偏光显微镜法第二法：X-射线粉末衍射法文献：DTA、IR、拉曼

【检查】：结晶性ChP（2015）四部：第一法：偏光显微镜法第二法：X-射线粉末衍射法文献：DTA、39双折射现象第一法：偏光显微镜法双折射现象第一法：偏光显微镜法402dhklsinθ=nλ第二法：X-射线粉末衍射法2dhklsinθ=nλ第二法：X-射线粉末衍射法41例:氨苄西林的X—射线衍射图例:氨苄西林的X—射线衍射图42例：氨苄西林不同晶型的DTA曲线：晶型1晶型2晶型1●

DTA例：氨苄西林不同晶型的DTA曲线：晶型1晶型2晶型1●DT43ＡＣ甲苯咪唑中Ａ晶型的检查ＣＡRＡ１Ｃ１SP112图3-3●IR＜AR640AR662AS640AS662

规定：ＡＣ甲苯咪唑中Ａ晶型的检查ＣＡRＡ１Ｃ１SP112图3-3●44青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）溶解度P417，第五节？P417-420青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）溶解度P417，45

本章内容第一节概述第二节-内酰胺类抗生素的分析第三节氨基糖苷类抗生素的分析第四节四环素类抗生素的分析第五节抗生素类药物中高分子杂质

的检查本章内容第一节概述第二节-内酰胺类抗生素的分析第46三、控制（检查）方法一、定义、毒副作用第五节抗生素类药物中高分子杂质的检查二、来源与分类及结构三、控制（检查）方法一、定义、毒副作用第五节抗生素类药物47一、定义及毒副作用致敏M：1000～10000分子量大于药物本身的杂质总称定义：毒副作用：-内酰胺类抗生素一、定义及毒副作用致敏M：1000～10000分子量大于药物48青霉素族1.外源性二、来源与分类及结构2.内源性青霉素族1.外源性二、来源与分类及结构2.内源性49１.外源性杂质：发酵过程引入的蛋白、多肽、多糖与抗生素结合产生高分子产物，如青霉噻唑多肽等。１.外源性杂质：发酵过程引入的蛋白、多肽、多糖与抗生素结合产502.内源性杂质：青霉素族聚合物羧苄青霉素氨苄青霉素2.内源性杂质：青霉素族聚合物羧苄青霉素氨苄青霉素51三、控制（检查）方法A.C18B.C8C.硅胶D.凝胶1.固定相：2.分离机理：A.键合色谱

B.离子色谱C.分子排阻色谱D.吸附色谱HPLC三、控制（检查）方法A.C18B.C8C.硅胶52凝胶（亲水凝胶）1、测定成分：2、固定相：3、流动相：4、检测器：5、分离机理：6、出柱顺序：大分子分子排阻色谱法大分子、小分子3.色谱条件与分离机制水溶液或缓冲液UV凝胶（亲水凝胶）1、测定成分：大分子分子排阻色谱法大分子、小534.检测方法④自身对照外标法①主成分自身对照法（L）②面积归一化法（P）③限量法（L）4.检测方法④自身对照外标法①主成分自身对照法（L）②面积归54例:青霉素V钾中青霉素V聚合物的检查(P418)1.写出色谱条件。2.系统适用性试验中加蓝色葡聚糖2000的目的？3.分别写出供试溶液与对照溶液中样品是什么？4.用Ａ、Ｂ两种流动相的目的？5.画出供试溶液与对照溶液可能输出HPLC图谱。6.自身对照外标法与主成分自身对照法的主要区别？7.有时在流动相中加入适量葡萄糖或甘氨酸，为什么？问题：抑制剂例:青霉素V钾中青霉素V聚合物的检查(P418)1.写出色551.色谱条件：固定相：流动相：检测器：2.系统适用性试验：RSD＜5.0%(对照液)葡聚糖凝胶G-10A—磷酸盐缓冲液B—水UV-254nmR(a/b)＞2.0%(样品)1.色谱条件：固定相：流动相：检测器：2.系统适用性试验：R56ＡＢ蓝色葡聚糖2000：①蓝色葡聚糖2000：

tR(A)/tR(B)：0.93～1.07②tR(s)/tR(蓝)

：0.93～1.07n＞400（蓝色葡聚糖2000

）T＜2.0（蓝色葡聚糖2000）R：？ＡＢ蓝色葡聚糖2000：①蓝色葡聚糖2000：tR(A)/573.样品测定：（含青霉素V聚合物按青霉素V计≤0.6%）青霉素V钾样品中的高分子聚合物（杂质）青霉素V对照品在纯水中形成高分子缔合物3.样品测定：（含青霉素V聚合物按青霉素V计≤0.6%）青霉58小结自身对照外标法（HPLC）2.流动相：

A、B两种3.对照溶液：目标物标准品临用新制而成的大分子缔合物。5.检测结果：定量法（外标法）4.杂质色谱峰：所有高分子杂质为单一色谱峰1.分子排阻色谱小结自身对照外标法（HPLC）2.流动相：A、B两种3.59一、阿莫西林颗粒剂服用办法（）思考题A.开水冲后及时服B.凉开水冲后及时服C.开水冲后，随时服D.凉开水冲后，随时服一、阿莫西林颗粒剂服用办法（）思考题A.开水冲后及时服60要求：1.写出色谱条件与系统适用性试验要求。2.系统适用性试验调PH至4.4的目的？3.画出标准品溶液与供试品溶液的色谱图。4.分别写出两种成分的计算公试。二、Ch.P阿莫西林克拉维酸钾片的含量测定（P422）思考题要求：二、Ch.P阿莫西林克拉维酸钾片的含量测定（P422）611.色谱条件：固定相：流动相：检测器：C18PH4.4±0.1,磷酸盐缓冲液-甲醇（95:5）UV-220nm2.系统适用性试验：n、R、T、RSD标准品3.测定法：（规定：90.0%～120.0%）3.51.色谱条件：固定相：流动相：检测器：C18PH4.4±0.62三:头孢呋辛酯中异构体与有关物质的检查(P419)问题：1.写出色谱条件。2.写出活性成分异构体名称？3.写出有关物质的名称？4.标准品溶液与对照溶液有何不同？其用途分别为什么？5.分别画出对照液与样品液的色谱图。呋喃三:头孢呋辛酯中异构体与有关物质的检查(P419)问题：呋喃631.色谱条件：固定相：ODS柱流动相：0.2mol/L磷酸二氢铵溶液-甲醇（62：38）检测器：UV-278nm2.系统适用性试验：n、R、T、RSD3.测定（1）异构体测定（2）杂质对照品的制备（3）有关物质检查1.色谱条件：固定相：ODS柱流动相：0.2mol/L磷酸二64minAA头孢呋辛酯A、B异构体A/AB:48%～55%（1）异构体minAA头孢呋辛酯A、B异构体（1）异构体65头孢呋辛酯A、B异构体60℃UVBA（2）有关物质对照品的制备及保留时间杂质定位RR头孢呋辛酯A、B异构体60℃UVBA（2）有关物质对照品的66minAA（3）有关物质定位minAA（3）有关物质定位67≤1.5和(1.5%)≤和（1.0%）●其它杂单≤1/2和（0.5%）；●杂总≤3和（3.0%）（4）有关物质限量检查≤1.5和(1.5%)≤和（1.0%）●其它杂单≤1/686h第十六章抗生素类药物的分析

TheAnalysisofAntibioticdrugs

6h第十六章抗生素类药物的分析

TheAnalysiso69青霉素的发现者是英国细菌学家弗莱明。1928年的一天，弗莱明在他的一间简陋的实验室里研究导致人体发热的葡萄球菌。由于盖子没有盖好，他发觉培养细菌用的琼脂上附了一层青霉菌。这是从楼上的一位研究青霉菌的学者的窗口飘落进来的。使弗莱明感到惊讶的是，在青霉菌的近旁，葡萄球菌忽然不见了。这个偶然的发现深深吸引了他，他设法培养这种霉菌进行多次试验，证明青霉素可以在几小时内将葡萄球菌全部杀死。

葡萄球菌青霉素的发现者是英国细菌学家弗莱明。葡萄球菌70来源发酵、半合成发酵提、纯来源发酵、半合成发酵提、纯71

本章内容第一节概述第二节-内酰胺类抗生素的分析第三节氨基糖苷类抗生素的分析第四节四环素类抗生素的分析第五节抗生素类药物中高分子杂质

的检查本章内容第一节概述第二节-内酰胺类抗生素的分析第721.纯度较低：三多（同系物、异构体、降解物或聚合物）2.活性组分的变异(组成或比例)：3.多数不稳定：一、抗生素自身的特点第一节概述1.纯度较低：2.活性组分的变异(组成或比例)：3.多数不稳73【检查】【含量测定】【性状】【鉴别】二、抗生素分析的特点【检查】【含量测定】【性状】【鉴别】二、抗生素分析的特点74来源发酵、半合成、全合成原料药定量生物学法(管碟法)HPLC【含量测定】来源发酵、半合成、全合成原料药定量生物学法(管碟法)HPLC75RS生物学法(管碟法)：RS生物学法(管碟法)：76

1.水分测定:

2.有机溶剂残留量

（一）一般杂质检查：

【检查】

3.安全性检查：生物试验1.水分测定:（一）一般杂质检查：【检查】77①无菌：

检查药品中有无杂菌污染℃（+）（-）①无菌：检查药品中有无杂菌污染℃（+）（-）78②细菌内毒素(引起热原反应的主要物质)：鲎G-分子（+）（-）L=？②细菌内毒素(引起热原反应的主要物质)：鲎G-分子（+）（-79③热源:

控制药品中的致热杂质③热源:控制药品中的致热杂质80④降压：

检查有降压作用的杂质④降压：检查有降压作用的杂质81⑤毒性试验:

控制药品中的毒性杂质⑤毒性试验:控制药品中的毒性杂质82

（二）特殊杂质检查：

【检查】①晶体检查：IR、X-射线衍射法、DTA

②已知杂质③有关物质④高分子聚合物（二）特殊杂质检查：【检查】①晶体检查：IR、X-射线衍83β-内酰胺大环内酯氨基糖苷四环素三、抗生素的分类

β-内酰胺大环内酯氨基糖苷四环素三、抗生素的分类841.-内酰胺类抗生素的结构与性质第二节-内酰胺类抗生素的分析3.【含量测定】：R-HPLC阴离子对试剂，离子抑制剂、扫尾剂4.【检查】：水分测定、晶型检查3.原料药与制剂分析异同物理常数、含量测定、有关物质检查检测波长为何不同？2.【鉴别】：羟肟酸铁反应、茚三酮反应本章内容&要求1.-内酰胺类抗生素的结构与性质第二节-内酰胺类抗生85青霉素类头孢菌素类碳青霉烯类亚胺培南R＝－H

美洛培南R＝－CH3一、结构与代表性药物青霉素类头孢菌素类碳青霉烯类亚胺培南R＝－H美洛培南R＝－86新第十一章：抗生素类药物的分析课件87新第十一章：抗生素类药物的分析课件88

①酸性

＊有羧基，具有酸性

＊pKa值在2.5～2.8之间

＊与碱成盐

如：青霉素G钠、青霉素G钾等二、-内酰胺类抗生素的主要性质①酸性二、-内酰胺类抗生素的主要性质89②旋光性：②旋光性：90＊青霉素类母核没有共轭系统，没有紫外吸收。＊侧链中有苯环取代基的药，在紫外区也有吸收。③紫外吸收有共轭体系：（O＝C－N－C＝C）在260nm处有最大吸收。无共轭体系，无紫外吸收。＊青霉素类母核没有共轭系统，没有紫外吸收。③紫外吸收有共轭91氨苄西林阿莫西林

④

IR氨苄西林阿莫西林④IR92⑤显色反应：◆羟肟酸铁反应⑤显色反应：◆羟肟酸铁反应93◆各种盐的鉴别◆硫酸及硫酸-甲醛反应◆硫酸-变色酸反应◆与茚三酮反应：α氨基酸结构◆各种盐的鉴别◆与茚三酮反应：α氨基酸结构941.不能产生羟肟酸铁反应的化合物（）单选题A.

B.

C.

D.

1.不能产生羟肟酸铁反应的化合物（）单选题A.B.C.952.

能与茚三酮试液反应的化合物（）A.

B.

C.

D.

2.能与茚三酮试液反应的化合物（）A.B.C.D.96氨苄西林阿莫西林3.IR氨苄西林阿莫西林3.IR97头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）显色剂？色谱条件：离子对试剂？离子抑制剂？扫尾剂？分离度？P421P417-420头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）显色剂？色谱条件：98要求：1.分别写出Ch.p与USP色谱条件与系统适用性试验要求。2.Ch.p系统适用性试验加头孢克洛α-3异构体目的？3.USA流动相加戊烷磺酸钠与三乙胺的目的？

【含量测定】例：头孢克洛的含量测定（P421）要求：【含量测定】例：头孢克洛的含量测定（P421）991.色谱条件：固定相：流动相：检测器：ChP：C18PH3.4磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（92:8）UV-254nm固定相：流动相：检测器：USP：PH2.5±0.1,戊烷磺酸钠-三乙胺-甲醇C18UV-254nmH+1.色谱条件：固定相：流动相：检测器：ChP：C18PH3.1002.系统适用性试验：n、R、T、RSD对照品3.测定法：（按无水物计≥95.0%）RS2.系统适用性试验：n、R、T、RSD对照品3.测定法：（按101小结：-内酰胺类抗生素的含量测定R-HPLC离子抑制剂离子对试剂扫尾剂（三乙胺、乙腈等）R？入？小结：-内酰胺类抗生素的含量测定R-HPLC离子抑制剂离子102头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）容量分析？P421P417-420264nm254nm（等度）220nm（梯度）264nm(UV)头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）容量分析？P421103第一法：费休氏法【检查】：水分（3.0%～6.5%）ChP（2015）四部第二法：烘干法第三法：减压干燥法第四法：甲苯法第五法：GC（热导检测器）第一法：费休氏法【检查】：水分（3.0%～6.5%）ChP（104计算：反应式：滴定管：溶剂：CH3OH(V-V0)T1935KarlFischer结晶水、吸附水、游离水第一法：费休氏法（P127

）非水滴定法：计算：反应式：滴定管：溶剂：CH3OH(V-V0)T1935105青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）268nm268nm溶解度总论？P417-420268nm青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）268nm268106第一法：偏光显微镜法第二法：X-射线粉末衍射法文献：DTA、IR、拉曼

【检查】：结晶性ChP（2015）四部：第一法：偏光显微镜法第二法：X-射线粉末衍射法文献：DTA、107双折射现象第一法：偏光显微镜法双折射现象第一法：偏光显微镜法1082dhklsinθ=nλ第二法：X-射线粉末衍射法2dhklsinθ=nλ第二法：X-射线粉末衍射法109例:氨苄西林的X—射线衍射图例:氨苄西林的X—射线衍射图110例：氨苄西林不同晶型的DTA曲线：晶型1晶型2晶型1●

DTA例：氨苄西林不同晶型的DTA曲线：晶型1晶型2晶型1●DT111ＡＣ甲苯咪唑中Ａ晶型的检查ＣＡRＡ１Ｃ１SP112图3-3●IR＜AR640AR662AS640AS662

规定：ＡＣ甲苯咪唑中Ａ晶型的检查ＣＡRＡ１Ｃ１SP112图3-3●112青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）溶解度P417，第五节？P417-420青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）溶解度P417，113

本章内容第一节概述第二节-内酰胺类抗生素的分析第三节氨基糖苷类抗生素的分析第四节四环素类抗生素的分析第五节抗生素类药物中高分子杂质

的检查本章内容第一节概述第二节-内酰胺类抗生素的分析第114三、控制（检查）方法一、定义、毒副作用第五节抗生素类药物中高分子杂质的检查二、来源与分类及结构三、控制（检查）方法一、定义、毒副作用第五节抗生素类药物115一、定义及毒副作用致敏M：1000～10000分子量大于药物本身的杂质总称定义：毒副作用：-内酰胺类抗生素一、定义及毒副作用致敏M：1000～10000分子量大于药物116青霉素族1.外源性二、来源与分类及结构2.内源性青霉素族1.外源性二、来源与分类及结构2.内源性117１.外源性杂质：发酵过程引入的蛋白、多肽、多糖与抗生素结合产生高分子产物，如青霉噻唑多肽等。１.外源性杂质：发酵过程引入的蛋白、多肽、多糖与抗生素结合产1182.内源性杂质：青霉素族聚合物羧苄青霉素氨苄青霉素2.内源性杂质：青霉素族聚合物羧苄青霉素氨苄青霉素119三、控制（检查）方法A.C18B.C8C.硅胶D.凝胶1.固定相：2.分离机理：A.键合色谱

B.离子色谱C.分子排阻色谱D.吸附色谱HPLC三、控制（检查）方法A.C18B.C8C.硅胶120凝胶（亲水凝胶）1、测定成分：2、固定相：3、流动相：4、检测器：5、分离机理：6、出柱顺序：大分子分子排阻色谱法大分子、小分子3.色谱条件与分离机制水溶液或缓冲液UV凝胶（亲水凝胶）1、测定成分：大分子分子排阻色谱法大分子、小1214.检测方法④自身对照外标法①主成分自身对照法（L）②面积归一化法（P）③限量法（L）4.检测方法④自身对照外标法①主成分自身对照法（L）②面积归122例:青霉素V钾中青霉素V聚合物的检查(P418)1.写出色谱条件。2.系统适用性试验中加蓝色葡聚糖2000的目的？3.分别写出供试溶液与对照溶液中样品是什么？4.用Ａ、Ｂ两种流动相的目的？5.画出供试溶液与对照溶液可能输出HPLC图谱。6.自身对照外标法与主成分自身对照法的主要区别？7.有时在流动相中加入适量葡萄糖或甘氨酸，为什么？问题：抑制剂例:青霉素V钾中青霉素V聚合物的检查(P418)1.写出色1231.色谱条件：固定相：流动相：检测器：2.系统适用性试验：RSD＜5.0%(对照液)葡聚糖凝胶G-10A—磷酸盐缓冲液B—水UV-254nmR(a/b)＞2.0%(样品)1.色谱条件：固定相：流动相：检测器：2.系统适用性试验：R124ＡＢ蓝色葡聚糖2000：①蓝色葡聚糖2000：

tR(A)/tR(B)：0.93～1.07②tR(s)/tR(蓝)

：0.93～1.07n＞400（蓝色葡聚糖2000

）T＜2.0（蓝色葡聚糖2000）R：？ＡＢ蓝色葡聚糖2000：①蓝色葡聚糖2000：tR(A)/1253.样品测定：（含青霉素V聚合物按青霉素V计≤0.6%）青霉素V钾样品中的高