胰腺淀粉样多肽抗体课件

导师：孙子林学生：李伟胰淀粉样多肽可溶性低聚物诱导的凋亡可被糖尿病相关抗体中和Journal:SciRepImpactfator:2.927

背景一个世纪以前，人们以为淀粉样沉积是AD、T2DM等疾病的主要致病因子，因其与组织退变在病理标本中存在共定位，且淀粉样蛋白的基因突变与一些家族聚集性疾病有关。1901年，两个不同的研究人员描述了胰岛的透明样变性。1986年，学者对胰岛中的透明样物质进行提纯分析，发现其主要是胰淀粉样沉积。且其最小组成单位为胰淀粉样多肽（37个氨基酸组成）。而且，在T2DM尸检中发现90%的患者存在胰淀粉样沉积，而且其沉积与B细胞团块量存在相关性。1994年，有研究者发现hIAPP可以导致B细胞凋亡，而且可以在细胞膜上可以看到hIAPP聚积。综上，在当时及其后一段时间，人们一直认为主要是胰淀粉样沉积直接导致了上述退行性疾病。2022/12/252

背景但是，随着研究的深入，发现存在着一些与上述论断不符合的事实与研究，主要表现在以下几方面：1、并不是所有的T2DM患者病理切片中存在着淀粉样沉积。2、淀粉样沉积的严重度与T2DM的严重度并不存在明显的相关性。3、纯合子的hIAPP小鼠在5-10W时可以观察到发生B细胞的大量凋亡，但是在细胞外却观察不到淀粉样沉积。在20W时可以看到大量胰淀粉样沉积，但是其并不与糖尿病严重程度呈现相关性。因此，作者欲探究确认究竟是哪一种物质导致胰岛细胞的凋亡，并观察T2DM患者体内是否存在针对这一物质的抗体。2022/12/253

结果：低聚物鉴定SDS排阻色谱分析I-monomer,II-dimer,III-trimer,IV-oligomer2022/12/255

结果：低聚物鉴定ThioflavinT(ThT)圆二色谱法Time:minutes2022/12/256结果：对B细胞的影响细胞活力rIAPPhIAPP2022/12/257结果：对B细胞的影响流式荧光活化细胞分选术I-necroticstate,II-lateapoptoticstateIII-earlyapoptoticstate,IV-viablecellsdarkgrey:viablecells,lightgrey:earlyandlateapoptoticcells,black:necroticcells.2022/12/258结果：对B细胞的影响2022/12/2510

结果：低聚物抗体Dot-blotELISPOT2022/12/2512结论确证了hIAPP单体可以形成低聚体，且低聚体在一定时间内相对稳定。而且，其结构主要为α螺旋。低聚体可以通过与细胞膜作用，增加膜的通透性，从而导致细胞活力下降乃至凋亡。T2DM患者血清中存在着抗该低聚物的抗体，且该抗体的存在能中和或者弱化低聚物的细胞毒性效应。而正常人血清中该抗体含量低或者对低聚物的亲和力低。2022/12/2514

意义为淀粉样低聚物的存在及细胞毒性理论提供了证据，有利于进一步探讨淀粉样沉积与糖尿病的关系。抗低聚物抗体的存在有两点意义：一是通过抗低聚物抗体的检测来对糖尿病或者相关代谢