微生物卫生学洁净技术知识培训

微生物、卫生学及洁净技术知识培训广东康尔乐医疗器械有限公司讲师：黎权2016年9月12日课程内容1、微生物学知识2、卫生学知识3、洁净技术简介4、洁净车间进出程序1、微生物学微生物：–在自然界中，用肉眼无法直接看到的，必须用光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。– 微生物的种类繁多，至少在十万种以上。包括病毒、细菌、霉菌及酵母菌等。– 微生物在自然界分布极广。土壤、水、空气、人类及动植物的体表、呼吸道、消化道等腔道中均存在数量不等的微生物。1、微生物学枯草芽孢杆菌营养态1、微生物学枯草芽孢杆菌菌落1、微生物学大肠杆菌1、微生物学葡萄球菌1、微生物学黑曲霉菌1、微生物学流感病毒1、微生物学几种微生物的比较类型真菌细菌立克次体衣原体枝原体病毒直径（μm）1~5.00.5~2.00.2~0.50.2~0.30.2~0.25<0.25可见性光镜光镜光镜光镜勉强可见光镜勉强可见电镜1、微生物学细菌的大小1、微生物学细菌繁殖方式：二分裂式无性繁殖，约20~30分钟繁殖一代；真菌繁殖方式：无性繁殖——芽殖（为主）、裂殖；有性繁殖——产生子囊孢子微生物酸碱度温度细菌pH7.0~7.537℃真菌(霉菌、酵母菌）pH4.5~6.022~28℃繁殖条件对比微生物的益处食品工业：面包，啤酒，葡萄酒，醋，酸奶的生产制药工业：抗生素，维生素，类固醇，干扰素的生产农业生产：生物农药的生产环境作用：分解废物，循环利用人体作用：帮助肠道中的食物消化1、微生物学微生物的害处导致伤口感染导致胃肠不适引起感冒，咳嗽尿道感染败血症癌症脑脊膜炎破伤风艾滋病1、微生物学1、微生物学人类是第一的(主要)污染源。人类每24小时就会脱落皮肤表面上最外层的皮细胞。这等于每天高达109（1000，000，000）=10亿个细胞的数量。人的头发和皮肤液滴衣着化妆品和珠宝手饰人的操作2023/1/1319未洗的手清水漂洗的手

1、微生物学2023/1/1320洗净的手洗净的手

(用皂液)(用消毒剂)

1、微生物学消毒：消毒是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。通常用化学或物理的方法来达到消毒的作用。

–化学方法—消毒剂：用于消毒的化学药物。

洁净室常用消毒剂有酒精消毒液（75%乙醇）、新洁尔灭（苯扎溴铵）、84消毒液（次氯酸钠）、臭氧（O3）、银离子。

其它还有来苏水（甲酚皂液）、生石灰（CaO）、漂白粉

（Ca(ClO)2）、双氧水（H2O2）、火碱（NaOH）等，但因为腐蚀性、残留、对人体刺激等原因一般不用于洁净室。

–物理方法：高温、紫外线等。2、卫生学无菌：产品上无存活微生物的状态。灭菌：是指对所有微生物的杀灭或除去作用，包括所有微生物的繁殖体和芽孢或孢子。灭菌也分为化学和物理方法两大类。

–化学方法—灭菌剂：用于灭菌的化学药物。灭菌剂有甲醛、环氧乙烷等。–物理方法：干热灭菌、湿热灭菌、过滤除菌、电离辐射灭菌、火焰灭菌等。

2、卫生学环氧乙烷（EthyleneOxide，C2H4O）：

最常用的灭菌气体，使微生物的蛋白基团烷基化达到杀灭的目的。对金属、塑料、橡胶不腐蚀，无残留气味，可用于医疗器械、塑料制品等不能采用高温灭菌的物品灭菌。环氧乙烷具有芳香的醚味，易燃易爆，是一种有毒的致癌物质，对中枢神经系统起麻醉作用，对粘膜有刺激作用。2、卫生学干热灭菌：将物品置于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中、利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方法。适用于玻璃、金属等器皿。常用的干热灭菌条件是170～180℃4小时，250～260℃45分钟。湿热灭菌：将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽，使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。该法灭菌能力强，为热力灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法。适用于塑料容器、培养基、无菌衣、胶塞等。常用的湿热灭菌条件是121℃30分钟。2、卫生学生物指示剂（BiologicalIndicator，BI）：对特定灭菌处理有确定的抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体。细菌的芽孢具有较强的抗力，是否能消灭芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标，因此灭菌效果常以杀灭芽孢为准。以枯草芽孢杆菌芽孢作为环氧乙烷灭菌生物指示剂。在环氧乙烷灭菌过程中，装入含有至少106个枯草芽孢杆菌芽孢的菌片，如果灭菌工艺可以杀灭菌片上所有芽孢，则表示该灭菌工艺能达到10-6的无菌保证水平。2、卫生学洁净技术：是近几十年才形成的一门新兴技术，包含洁净室设计与制造、洁净室测试与监测以及洁净室运行的一系列技术标准。空气净化原理气流→初效净化→空调（表冷）→中效净化→风机送风→管道→高效净化风口→吹入房间→带走尘埃细菌等颗粒→回风百叶窗→初效净化（回流或全排）气流流型：室内空气的流动形态和分布状态。

–单向流（层流）：沿单一方向呈平行流线并且横断面上风速一致的气流。单向流洁净室一般有两种类型，即水平流和垂直流。洁净度要求高的使用单向气流。

–非单向流（紊流）：凡不符合单向流定义的气流。3、洁净技术简介空气洁净度：以单位体积空气中大于或等于某粒径粒子和微生物的数量来区分的洁净程度。–悬浮粒子：用于空气洁净度分级的空气中悬浮粒子尺寸范围在0.5～5μm的固体和液体粒子。–洁净度等级：医疗器械行业目前按照美国联邦标准，分为100级、10,000级、100,000级和300,000级（中国）。以英制计，每立方英尺内大于等于0.5μm的悬浮粒子不超过10,000个为万级，不超过100,000个为十万级。换算成公制乘以35。3、洁净技术简介净化参数

–换气次数：100000级≥15次/h；10000级≥20次/h；1000≥30次/h。–温度18-28℃，湿度45－65%。–压差：空气洁净级别不同的洁净室（区）之间的静压差应大于5帕，洁净室（区）与室外大气的静压差应大于10帕。3、洁净技术简介洁净室（cleanroom）：空气悬浮粒子和微生物浓度，以及温度、湿度、压力等参数受控的房间或限定空间。其建筑结构、装备及其作用均具有减少该房间（区域）内污染源的介入、产生和滞留的功能。将室内之温度、洁净度、室内压力、气流速度与气流分布、噪音振动及照明、静电控制在某一需求范围内。亦即是不论外在之空气条件如何变化，其室内均能具有维持原先所设定要求的洁净度、温湿度及压力等性能之特性。3、洁净技术简介高效空气过滤器（HEPA）：在额定风量下，对粒径大于等于0.3μm粒子的捕集效率在99.97%以上及气流阻力在254Pa以下的空气过滤器。美国原子能委员会为解决对人体有害的放射性尘埃的捕集问题，于1951年研制成功的高效空气过滤器应用于生产车间的送风过滤，才真正诞生了具有现代意义的洁净室。3、洁净技术简介超净工作台(cleanbench)：通过风机将空气吸入预过滤器，经由静压箱进入高效过滤器过滤，将过滤后的空气以垂直或水平气流的状态送出，使操作区域达到百级洁净度。3、洁净技术简介生物安全柜（BiosafetyCabinet）：是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。传递柜（或传递窗）：在洁净室隔墙上设置的传递物料和工器具的开口。两侧装有不能同时开启的柜门。洁净工作服：为把工作人员产生的粒子和微生物限制在最低程度，所使用的发尘、发菌量少的洁净服装。洁净工作服和无菌工作服不得脱落纤维和颗粒性物质，选择质地光滑、不产生静电、不脱落纤维和颗粒性物质的材料制作。无菌工作服应能包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。3、洁净技术简介洁净室环境监测：洁净室的环境要得到有效控制，就需要定期进行监测。监测项目包括：温度、相对湿度、风速/换气次数、静压差、尘埃数、沉降菌数、浮游菌数。具体见YY0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》。

–静态测量：是指所有设备均已安装就绪，但未运行且没有操作人员在现场的状态。

–动态测量：是指生成设备均按预定的工艺模式运行且有规定数量的操作人员在现场操作的状态。

–风速与换气次数的区别：用风速可以正确地表示出单向流，因为风速越高室内就越洁净。而每小时换气次数与房间的体积有关，如吊顶的高低，因此不适合用来表示单向流，而非单向流因流型不固定，适合用换气次数表示。3、洁净技术简介洁净室的特点和注意事项：洁净室的空气是经过多级过滤除去绝大部分尘埃和微生物，并经过调温、加湿等处理使环境指标达到要求。应当设置防尘、防止昆虫和其他动物进入的设施。洁净室（区）的门、窗及安全门应当密闭。洁净室墙、顶板材一般多采用50mm厚的夹芯彩钢板制造，表面光滑、不产尘、耐擦洗。墙角要做成圆弧状。地面采用环氧自流平地坪或高级耐磨塑料地板。家具、设施、设备都应为圆弧内阴角，易清洁，不积垢。3、洁净技术简介与物料或产品直接接触的设备、工艺装备及管道表面无毒、耐腐蚀、不与物料或产品发生化学反应和粘连，表面无死角并易于清洗、消毒或灭菌。洗涤池排水口应有盖，下水管带U型水封，使用洁净室专用地漏。不能使用产尘或掉纤维的物品，如洗衣粉、棉抹布、普通衣服、食物、面巾纸。所用的润滑剂、冷却剂、清洗剂、消毒剂不会对产品和环境造成污染。洁净室内要使用二氧化碳灭火器。进入洁净室的人员要穿洁净服鞋、戴口罩发罩、不能化妆和佩戴饰物，无传染病、皮肤病及破溃伤口。人员在洁净室内要避免不必要的和大幅度、快速的动作，不要倚靠、坐在桌子上、随便触摸环境表面和设备等。进入洁净室的物料要清洁、消毒。3、洁净技术简介3、洁净技术简介主要的微生物污染源

空气

水

设备

原辅料

人员4、洁净车间进出程序微生物的污染途径

自身污染：由于患者和员工自身携带微生

物而污染。

接触污染：由于和非无菌的用具、器械或

人的接触而污染。

空气污染：由于空气中所含微生物的沉降、

附着或被吸入而污染。

其他污染：由于其他因素（如昆虫）而污染。4、洁净车间进出程序控制微生物的污染途径

有效地阻止室外的污染侵入室内。

迅速有效地排除室内已发生的污染。

控制污染源，减少污染发生量。从人、机、料、法、环方面实施控制。4、洁净车间进出程序洁净车间人员进出流程图4、洁净车间进出程序一更：脱外衣洗手洁净工作区出进二更：戴手套戴口罩穿洁净服换洁净鞋缓冲间：手消毒一更：穿外衣二更：换过渡鞋脱洁净服脱手套脱口罩准备间：戴一次性帽套穿一次性鞋套换过渡鞋准备间：脱一次性帽套脱一次性鞋套换自用鞋洗手的重要性:用流水洗手，能使手上的致病微生物减少80%；用皂液充分洗手，再用流水冲洗能使致病微生物减少95%。洗手后正确使用消毒剂能使致病微生物减少到99%。4、洁净车间进出程序第一步：

用清水润湿双手及手腕以上10厘米洗手4、洁净车间进出程序第二步：

均匀涂上洗手液洗手4、洁净车间进出程序第三步：

掌心相对，手指并拢相互摩擦

洗手4、洁净车间进出程序第四步：手心对手背沿指缝相互摩擦交换进行

洗